| 常用英文缩略语 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 前言 | 第15-25页 |
| 参考文献 | 第20-25页 |
| 第一部分 siRNA介导的树突状细胞SOCS3基因沉默及其沉默效率验证 | 第25-47页 |
| 一、实验材料 | 第25-29页 |
| 1.1 实验仪器与设备 | 第25-27页 |
| 1.2 实验试剂 | 第27-28页 |
| 1.3 实验相关试剂的配制 | 第28-29页 |
| 1.4 实验动物 | 第29页 |
| 二、实验方法 | 第29-37页 |
| 2.1 小鼠骨髓来源树突状细胞的体外培养 | 第29-30页 |
| 2.2 流式细胞仪检测DC表面MHCⅡ、CD40、CD86、CD11c | 第30页 |
| 2.3 靶向SOCS3 siRNA重组慢病毒表达载体的构建及转染 | 第30-32页 |
| 2.4 qRT-PCR检测SOCS3 mRNA水平 | 第32-34页 |
| 2.5 Western blot检测SOCS3蛋白水平 | 第34-36页 |
| 2.6 Annexin V-FITC/PI双染法 | 第36页 |
| 2.7 台盼蓝染色 | 第36-37页 |
| 2.8 统计学处理 | 第37页 |
| 三、实验结果 | 第37-41页 |
| 3.1 小鼠骨髓源性树突状细胞的诱导培养及鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2 筛选沉默效率最佳siRNA干扰序列 | 第38-40页 |
| 3.3 siRNA转染对DC活性的影响 | 第40-41页 |
| 四、讨论 | 第41-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 第二部分 SOCS3基因沉默对树突状细胞抗白念珠菌感染的生物学特性和功能的影响 | 第47-65页 |
| 一、实验材料 | 第47-50页 |
| 1.1 实验仪器与设备 | 第47-49页 |
| 1.2 实验试剂 | 第49页 |
| 1.3 实验相关试剂的配制 | 第49-50页 |
| 1.4 实验菌株及细胞 | 第50页 |
| 二、实验方法 | 第50-53页 |
| 2.1. 激光共聚焦显微镜观察DC对白念珠菌的吞噬现象 | 第50-51页 |
| 2.2. 流式细胞仪检测DC对白念珠菌的吞噬能力 | 第51-52页 |
| 2.3. DC对白念珠菌的杀伤作用 | 第52页 |
| 2.4. 流式细胞仪检测DC表面MHCⅡ、CD40、CD86 | 第52页 |
| 2.5. Transwell细胞迁移实验 | 第52-53页 |
| 2.6. 流式细胞仪检测DC表面趋化因子受体CCR7 | 第53页 |
| 2.7. 统计学处理 | 第53页 |
| 三、实验结果 | 第53-59页 |
| 3.1. SOCS3基因沉默对DC吞噬白念珠菌能力的影响 | 第53-55页 |
| 3.2. SOCS3基因沉默对DC杀伤白念珠菌功能的影响 | 第55-56页 |
| 3.3. SOCS3基因沉默对DC表型成熟的影响 | 第56-57页 |
| 3.4. SOCS3基因沉默对DC迁移能力的影响 | 第57-59页 |
| 四、讨论 | 第59-63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 第三部分 SOCS3基因沉默DC活化IL-6/STAT3通路增强Th17抗白念珠菌感染保护性免疫应答 | 第65-87页 |
| 一、实验材料 | 第65-67页 |
| 1.1. 实验仪器与设备 | 第65-66页 |
| 1.2. 实验试剂 | 第66-67页 |
| 1.3. 实验试剂的配制 | 第67页 |
| 1.4. 实验菌株与细胞 | 第67页 |
| 二、实验方法 | 第67-72页 |
| 2.1. ELISA检测DC分泌细胞因子IL-6、IL-12p70水平 | 第67-68页 |
| 2.2. qRT-PCR检测DC IL-6、IL-12p35 mRNA水平 | 第68-69页 |
| 2.3. Western blot检测DC IL-6、IL-12p35、STAT3、pSTAT3蛋白水平 | 第69页 |
| 2.4. 混合淋巴细胞反应 | 第69-70页 |
| 2.5. 胞内因子染色法 | 第70-71页 |
| 2.6. qRT-PCR检测转录因子T-bet、RORγ t、GATA3表达情况 | 第71-72页 |
| 2.7. Western blot检测 ROR γ t、IL-17A、IL-23R蛋白水平 | 第72页 |
| 2.8. 统计学处理 | 第72页 |
| 三、实验结果 | 第72-80页 |
| 3.1. SOCS3基因沉默促进白念珠菌诱导成熟DC分泌IL-6,并促进STAT3磷酸化 | 第72-75页 |
| 3.2. SOCS3基因沉默增强白念珠菌诱导成熟DC刺激CD4+T淋巴细胞增殖的能力 | 第75-76页 |
| 3.3. SOCS3基因沉默促进白念珠菌刺激成熟DC诱导Th17细胞免疫应答 | 第76-79页 |
| 3.4. 外源性抗IL-6部分阻断SOCS3基因沉默DC对Th17细胞极化的作用 | 第79-80页 |
| 四、讨论 | 第80-84页 |
| 参考文献 | 第84-87页 |
| 全文小结 | 第87-89页 |
| 综述 | 第89-95页 |
| 参考文献 | 第92-95页 |
| 研究生阶段发表论文 | 第95-97页 |
| 致谢 | 第97-99页 |
