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巨核细胞的体外大规模生产及临床前安全性和有效性研究

中文摘要第5-7页
Abstract第7-9页
前言第10-15页
第一部分 CD34~+造血干/祖细胞体外高效产生巨核细胞培养体系的建立第15-36页
    1、实验材料第15-19页
    2、实验方法第19-23页
        2.1 人脐带血标本采集第19页
        2.2 脐带血CD34~+细胞分离与提取第19-20页
        2.3 第一阶段:CD34~+细胞体外扩增培养第20页
        2.4 第二阶段:巨核细胞诱导分化及成熟第20-21页
        2.5 培养时长优化第21-22页
        2.6 统计分析第22-23页
    3、实验结果第23-33页
        3.1 培养第一阶段: CD34~+造血干/祖细胞的体外扩增第23-26页
        3.2 培养第二阶段:巨核细胞诱导分化及成熟第26-29页
        3.3 确定最佳培养时长第29-31页
        3.4 巨核细胞的产率计算第31-33页
    4、讨论第33-36页
第二部分 巨核细胞中试规模生产平台的建立及细胞特性的体外鉴定第36-53页
    1、实验材料第36-41页
    2、实验方法第41-45页
        2.1 巨核细胞中试规模培养第41页
        2.2 瑞氏-吉姆萨染色第41页
        2.3 多倍体含量检测第41-42页
        2.4 细胞免疫荧光染色第42页
        2.5 总RNA提取第42页
        2.6 cDNA合成第42-43页
        2.7 qPCR检测第43-44页
        2.8 成熟巨核细胞储存第44页
        2.9 统计分析第44-45页
    3、实验结果第45-51页
        3.1 巨核细胞中试规模生产平台的建立第45-46页
        3.2 细胞形态观察及鉴定第46-48页
        3.3 巨核细胞DNA多倍体含量检测第48-49页
        3.4 巨核细胞相关基因的表达第49-50页
        3.5 巨核细胞储存稳定性研究第50-51页
    4、讨论第51-53页
第三部分 巨核细胞在动物模型中的安全性和有效性评价第53-81页
    1、实验材料第53-58页
    2、实验方法第58-62页
        2.1 巨核祖细胞移植NOD/SCID小鼠第58页
        2.2 成熟巨核细胞移植NOD/SCID小鼠第58-59页
        2.3 食蟹猴外周血CD34~+细胞的动员与分离第59页
        2.4 诱导分化食蟹猴巨核细胞第59-60页
        2.5 食蟹猴骨髓抑制性血小板减少症模型的建立第60页
        2.6 食蟹猴巨核祖细胞的自体移植第60-61页
        2.7 食蟹猴成熟巨核细胞的自体移植和同种异体移植第61页
        2.8 统计分析第61-62页
    3、实验结果第62-78页
        3.1 人巨核祖细胞在小鼠模型中生成血小板和重构造血系统的研究第62-63页
        3.2 人成熟巨核细胞在小鼠模型中的血小板释放动力学和组织分布研究第63-65页
        3.3 食蟹猴骨髓抑制性血小板减少症模型的建立第65-68页
        3.4 食蟹猴巨核祖细胞自体移植促进造血恢复的研究第68-73页
        3.5 食蟹猴成熟巨核细胞自体和同种异体移植提升血小板数目的研究第73-77页
        3.6 巨核细胞在小鼠和食蟹猴模型中的安全性评价第77-78页
    4、讨论第78-81页
全文总结及创新点第81-82页
参考文献第82-91页
攻读博士学位期间参与完成的其他课题-1第91-101页
攻读博士学位期间参与完成的其他课题-2第101-107页
文献综述第107-125页
    参考文献第118-125页
英文名词及缩写第125-127页
简历第127-131页
致谢第131-133页

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