| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第10-15页 |
| 第一部分 CD34~+造血干/祖细胞体外高效产生巨核细胞培养体系的建立 | 第15-36页 |
| 1、实验材料 | 第15-19页 |
| 2、实验方法 | 第19-23页 |
| 2.1 人脐带血标本采集 | 第19页 |
| 2.2 脐带血CD34~+细胞分离与提取 | 第19-20页 |
| 2.3 第一阶段:CD34~+细胞体外扩增培养 | 第20页 |
| 2.4 第二阶段:巨核细胞诱导分化及成熟 | 第20-21页 |
| 2.5 培养时长优化 | 第21-22页 |
| 2.6 统计分析 | 第22-23页 |
| 3、实验结果 | 第23-33页 |
| 3.1 培养第一阶段: CD34~+造血干/祖细胞的体外扩增 | 第23-26页 |
| 3.2 培养第二阶段:巨核细胞诱导分化及成熟 | 第26-29页 |
| 3.3 确定最佳培养时长 | 第29-31页 |
| 3.4 巨核细胞的产率计算 | 第31-33页 |
| 4、讨论 | 第33-36页 |
| 第二部分 巨核细胞中试规模生产平台的建立及细胞特性的体外鉴定 | 第36-53页 |
| 1、实验材料 | 第36-41页 |
| 2、实验方法 | 第41-45页 |
| 2.1 巨核细胞中试规模培养 | 第41页 |
| 2.2 瑞氏-吉姆萨染色 | 第41页 |
| 2.3 多倍体含量检测 | 第41-42页 |
| 2.4 细胞免疫荧光染色 | 第42页 |
| 2.5 总RNA提取 | 第42页 |
| 2.6 cDNA合成 | 第42-43页 |
| 2.7 qPCR检测 | 第43-44页 |
| 2.8 成熟巨核细胞储存 | 第44页 |
| 2.9 统计分析 | 第44-45页 |
| 3、实验结果 | 第45-51页 |
| 3.1 巨核细胞中试规模生产平台的建立 | 第45-46页 |
| 3.2 细胞形态观察及鉴定 | 第46-48页 |
| 3.3 巨核细胞DNA多倍体含量检测 | 第48-49页 |
| 3.4 巨核细胞相关基因的表达 | 第49-50页 |
| 3.5 巨核细胞储存稳定性研究 | 第50-51页 |
| 4、讨论 | 第51-53页 |
| 第三部分 巨核细胞在动物模型中的安全性和有效性评价 | 第53-81页 |
| 1、实验材料 | 第53-58页 |
| 2、实验方法 | 第58-62页 |
| 2.1 巨核祖细胞移植NOD/SCID小鼠 | 第58页 |
| 2.2 成熟巨核细胞移植NOD/SCID小鼠 | 第58-59页 |
| 2.3 食蟹猴外周血CD34~+细胞的动员与分离 | 第59页 |
| 2.4 诱导分化食蟹猴巨核细胞 | 第59-60页 |
| 2.5 食蟹猴骨髓抑制性血小板减少症模型的建立 | 第60页 |
| 2.6 食蟹猴巨核祖细胞的自体移植 | 第60-61页 |
| 2.7 食蟹猴成熟巨核细胞的自体移植和同种异体移植 | 第61页 |
| 2.8 统计分析 | 第61-62页 |
| 3、实验结果 | 第62-78页 |
| 3.1 人巨核祖细胞在小鼠模型中生成血小板和重构造血系统的研究 | 第62-63页 |
| 3.2 人成熟巨核细胞在小鼠模型中的血小板释放动力学和组织分布研究 | 第63-65页 |
| 3.3 食蟹猴骨髓抑制性血小板减少症模型的建立 | 第65-68页 |
| 3.4 食蟹猴巨核祖细胞自体移植促进造血恢复的研究 | 第68-73页 |
| 3.5 食蟹猴成熟巨核细胞自体和同种异体移植提升血小板数目的研究 | 第73-77页 |
| 3.6 巨核细胞在小鼠和食蟹猴模型中的安全性评价 | 第77-78页 |
| 4、讨论 | 第78-81页 |
| 全文总结及创新点 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-91页 |
| 攻读博士学位期间参与完成的其他课题-1 | 第91-101页 |
| 攻读博士学位期间参与完成的其他课题-2 | 第101-107页 |
| 文献综述 | 第107-125页 |
| 参考文献 | 第118-125页 |
| 英文名词及缩写 | 第125-127页 |
| 简历 | 第127-131页 |
| 致谢 | 第131-133页 |
