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谷实夜蛾肠道微生物介导番茄植株防御反应及其机理的研究

摘要第3-6页
abstract第6-8页
缩略词及中英文对照第10-17页
第一章 前言第17-28页
    1.1 研究背景第17-25页
        1.1.1 昆虫肠道微生物与寄主昆虫的相互关系第17-19页
        1.1.2 植物防御反应第19-22页
        1.1.3 昆虫肠道微生物与植物诱导防御反应第22-25页
    1.2 昆虫肠道微生物的研究方法和技术手段第25-26页
    1.3 本研究的目的和意义第26-28页
第二章 谷实夜蛾幼虫肠道微生物分离鉴定第28-36页
    2.1 引言第28-29页
    2.2 材料与方法第29-31页
        2.2.1 供试昆虫第29页
        2.2.2 主要试剂与仪器第29页
        2.2.3 试剂的配制第29页
        2.2.4 细菌的培养第29-30页
        2.2.5 16S rRNA测序第30-31页
        2.2.6 Biotyper鉴定细菌第31页
        2.2.7 野外和室内谷实夜蛾幼虫肠道微生物CFU的比较第31页
    2.3 结果与分析第31-34页
        2.3.1 两种来自不同环境中生长的谷实夜蛾口腔分泌物中微生物的比较第31-32页
        2.3.2 利用 16S rRNA测序法鉴定田间采集的谷实夜蛾肠道细菌第32-33页
        2.3.3 利用Biotyper法鉴定田间采集的谷实夜蛾肠道细菌第33-34页
        2.3.4 利用 16S rRNA测序法鉴定室内饲养的谷实夜蛾肠道细菌第34页
    2.4 结论与讨论第34-36页
第三章 介导番茄和谷实夜蛾免疫反应的肠道细菌的筛选第36-45页
    3.1 引言第36-37页
    3.2 材料与方法第37-39页
        3.2.1 供试昆虫第37页
        3.2.2 供试植物第37页
        3.2.3 主要仪器第37页
        3.2.4 细菌的培养第37-38页
        3.2.5 番茄植株接种细菌处理第38页
        3.2.6 PPO活性测定第38页
        3.2.7 谷实夜蛾幼虫接种细菌处理第38-39页
        3.2.8 GOX活性测定第39页
        3.2.9 实验数据处理与图表制作第39页
    3.3 结果与分析第39-42页
        3.3.1 谷实夜蛾肠道细菌对番茄植株PPO活性的影响第39-41页
        3.3.2 田间和室内饲养的谷实夜蛾唾液腺体内GOX活性第41页
        3.3.3 谷实夜蛾肠道细菌对谷实夜蛾幼虫唾液腺中GOX活性的影响第41-42页
    3.4 结论与讨论第42-45页
第四章 E. ludwigii接种的谷实夜蛾对番茄诱导防御的影响第45-57页
    4.1 引言第45-46页
    4.2 材料与方法第46-51页
        4.2.1 供试材料第46页
        4.2.2 E. ludwigii培养第46页
        4.2.3 室内饲养的谷实夜蛾接种E. ludwigii处理第46-47页
        4.2.4 番茄植株的处理第47页
        4.2.5 PPO测定的方法第47页
        4.2.6 总RNA提取第47-48页
        4.2.7 cDNA第一条链的合成第48-49页
        4.2.8 实时荧光定量聚合酶链式反应第49-50页
        4.2.9 番茄叶片中JA萃取及含量的测定第50-51页
        4.2.10 实验数据处理与图表制作第51页
    4.3 结果与分析第51-56页
        4.3.1 的谷实夜蛾幼虫接种E. ludwigii后对番茄叶片PPO活性的影响第51-52页
        4.3.2 被E. ludwigii接种谷实夜蛾幼虫危害的番茄叶片对幼虫生长的影响。第52-53页
        4.3.3 E. ludwigii接种谷实夜蛾幼虫的取食对番茄叶片防御相关基因表达的影响。第53-55页
        4.3.4 E. ludwigii接种谷实夜蛾幼虫的取食对番茄叶片JA含量的影响。第55-56页
    4.4 结论与讨论第56-57页
第五章 谷实夜蛾肠道细菌E. ludwigii直接介导番茄防御反应第57-63页
    5.1 引言第57-58页
    5.2 材料与方法第58-59页
        5.2.1 供试植物第58页
        5.2.2 E. ludwigii培养第58页
        5.2.3 番茄植株接种E. ludwigii处理第58页
        5.2.4 PPO活性的测定第58页
        5.2.5 E. ludwigii接种侵染番茄植株对其防御相关基因表达的影响第58-59页
        5.2.6 实验数据处理与图表制作第59页
    5.3 结果与分析第59-61页
        5.3.1 不同浓度的E. ludwigii接种番茄植株对其PPO活性的影响第59-60页
        5.3.2 E. ludwigii接种番茄植株对其防御相关基因表达的影响第60-61页
    5.4 结论与讨论第61-63页
第六章 接种E. ludwigii对谷实夜蛾分泌GOX的影响第63-71页
    6.1 引言第63-64页
    6.2 材料与方法第64-67页
        6.2.0 供试昆虫第64页
        6.2.1 供试植物第64页
        6.2.2 供试菌株第64页
        6.2.3 室内饲养谷实夜蛾接种E.ludwigii处理第64页
        6.2.4 番茄植株的虫害处理第64页
        6.2.5 GOX的洗脱第64-65页
        6.2.6 SDS-PAGE电泳第65页
        6.2.7 转膜和封闭第65-66页
        6.2.8 抗体孵育第66页
        6.2.9 计算GOX蛋白质的含量第66页
        6.2.10 实验数据处理与图表制作第66-67页
    6.3 结果与分析第67-69页
        6.3.1 GOX标准曲线的制备第67-68页
        6.3.2 谷实夜蛾分泌在番茄叶片上GOX的量的测定第68-69页
    6.4 结论与讨论第69-71页
第七章 E. ludwigii在肠道回流液和番茄叶片中的检测第71-80页
    7.1 引言第71-72页
    7.2 材料与方法第72-75页
        7.2.1 供试昆虫第72页
        7.2.2 供试植物第72页
        7.2.3 供试菌株第72页
        7.2.4 室内饲养谷实夜蛾接种E. ludwigii处理第72页
        7.2.5 激光共聚焦显微镜观察谷实夜蛾分泌肠道回流液第72-74页
        7.2.6 E. ludwigii特异性引物设计第74页
        7.2.7 E. ludwigii在肠道回流液和番茄叶片上的检测第74-75页
    7.3 结果与分析第75-78页
        7.3.1 E. ludwigii不会影响谷实夜蛾幼虫在番茄叶片上分泌肠道回流液第75-76页
        7.3.2 番茄叶片上检测不到E. ludwigii的存在第76-78页
    7.4 结论与讨论第78-80页
第八章 E. ludwigii接种的谷实夜蛾唾液对番茄防御反应的影响第80-90页
    8.1 引言第80页
    8.2 材料与方法第80-83页
        8.2.1 供试昆虫第80页
        8.2.2 供试植物第80页
        8.2.3 供试菌株第80-81页
        8.2.4 室内饲养谷实夜蛾接种E. ludwigii处理第81页
        8.2.5 谷实夜蛾唾液和唾液腺体的收集第81页
        8.2.6 谷实夜蛾唾液腺喷丝头烧灼第81-82页
        8.2.7 番茄植株的处理第82页
        8.2.8 PPO测定的方法第82页
        8.2.9 实验数据处理与图表制作第82-83页
    8.3 结果与分析第83-87页
        8.3.1 谷实夜蛾唾液对番茄叶片PPO活性的影响第83-84页
        8.3.2 谷实夜蛾唾液腺匀浆液对番茄叶片中PPO活性的影响。第84-85页
        8.3.3 烧灼喷丝头对谷实夜蛾诱导番茄叶片中PPO活性的影响。第85-86页
        8.3.4 GOX对番茄植株叶片中PPO活性的影响第86-87页
    8.4 结论与讨论第87-90页
第九章 本文主要结论、创新之处与研究展望第90-94页
    9.1 主要结论第90-91页
    9.2 创新之处第91-92页
    9.3 研究展望或者需要进一步深入的方面第92-94页
致谢第94-95页
参考文献第95-106页
附录A 饲养谷实夜蛾的人工饲料配方成分和配制方法(2 L)第106-107页
附录B 攻读博士学位期间发表的论文第107-108页
附录C 攻读博士学位期间获得的奖励第108页

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