摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第15-35页 |
1.1 畜禽肠道健康 | 第15-17页 |
1.1.1 遗传信息的改变 | 第15-16页 |
1.1.2 微生物菌群的改变 | 第16页 |
1.1.3 外源饲料酶的添加 | 第16页 |
1.1.4 其他 | 第16-17页 |
1.2 动物肠道健康与表观遗传修饰 | 第17-26页 |
1.2.1 表观遗传学 | 第17-19页 |
1.2.2 畜禽生产与表观遗传机制的关系 | 第19-21页 |
1.2.3 畜禽营养对表观遗传机制的影响 | 第21-23页 |
1.2.4 表观遗传机制与畜禽肠道健康的关系 | 第23-24页 |
1.2.5 表观遗传机制与肠道代谢、免疫 | 第24-26页 |
1.3 组蛋白乙酰转移酶MOF的研究进展 | 第26-28页 |
1.3.1 模式生物——条件性敲除小鼠 | 第26-27页 |
1.3.2 Mof对动物细胞的生理调控作用 | 第27-28页 |
1.3.3 Mof与癌症 | 第28页 |
1.4 畜禽肠道营养、免疫与肠道微生物区系 | 第28-32页 |
1.4.1 肠道微生物区系 | 第28-29页 |
1.4.2 肠道微生物菌群功能 | 第29页 |
1.4.3 肠道免疫系统对肠道微生物菌群的调节作用 | 第29-30页 |
1.4.4 肠道微生物菌群与肠道稳态 | 第30-32页 |
1.5 外源饲料酶添加剂的应用 | 第32-34页 |
1.5.1 外源饲料酶 | 第32-33页 |
1.5.2 漆酶的应用 | 第33-34页 |
1.6 本项研究的目的意义和研究内容 | 第34-35页 |
1.6.1 本项研究的目的意义 | 第34页 |
1.6.2 本项研究的研究内容 | 第34-35页 |
第二章 肠道上皮细胞组蛋白乙酰转移酶MOF特异性敲除小鼠的构建 | 第35-41页 |
2.1 试验材料 | 第36页 |
2.1.1 试验动物 | 第36页 |
2.1.2 试剂的配置 | 第36页 |
2.1.3 引物 | 第36页 |
2.2 试验方法 | 第36-38页 |
2.2.1 敲除小鼠基因型的鉴定 | 第36-37页 |
2.2.2 小鼠肠道上皮细胞的分离 | 第37页 |
2.2.3 小鼠肠道上皮细胞的RNA提取,反转录及q PCR分析 | 第37-38页 |
2.2.4 小鼠肠道上皮细胞蛋白质的提取 | 第38页 |
2.3 结果与分析 | 第38-40页 |
2.3.1 mof肠道特异性敲除小鼠的鉴定 | 第38-39页 |
2.3.2 mof肠道特异性敲除小鼠敲除效果的验证 | 第39-40页 |
2.4 讨论 | 第40页 |
2.5 小结 | 第40-41页 |
第三章 组蛋白乙酰转移酶MOF对肠道功能的影响 | 第41-52页 |
3.1 试验材料 | 第41-42页 |
3.1.1 试验动物 | 第41页 |
3.1.2 引物 | 第41-42页 |
3.2 试验方法 | 第42-43页 |
3.2.1 小鼠体重以及肠道长度的测定 | 第42页 |
3.2.2 小鼠肠道组织的包埋及切片 | 第42页 |
3.2.3 小鼠肠道组织石蜡切片染色 | 第42-43页 |
3.2.4 肠道石蜡切片免疫荧光染色 | 第43页 |
3.2.5 试验数据统计分析 | 第43页 |
3.3 结果与分析 | 第43-49页 |
3.3.1 mof肠道特异性敲除小鼠的体重以及肠道长度的变化 | 第43-44页 |
3.3.2 mof肠道特异性敲除小鼠的H4K16乙酰化水平变化 | 第44-45页 |
3.3.3 mof肠道特异性敲除小鼠的肠道形态变化 | 第45-47页 |
3.3.4 mof肠道特异性敲除小鼠肠道潘氏细胞的功能变化 | 第47-48页 |
3.3.5 mof肠道特异性敲除对肠道细胞增殖和凋亡的影响 | 第48-49页 |
3.3.6 mof肠道特异性敲除对肠道上皮细胞中紧密连接蛋白表达量的影响 | 第49页 |
3.4 讨论 | 第49-51页 |
3.5 小结 | 第51-52页 |
第四章 MOF肠道特异性敲除对肠道微生物区系的影响 | 第52-73页 |
4.1 试验材料 | 第52-53页 |
4.1.1 试验动物 | 第52-53页 |
4.1.2 引物和序列 | 第53页 |
4.2 试验方法 | 第53-54页 |
4.2.1 小鼠肠道内容物的采集 | 第53页 |
4.2.2 微生物基因组DNA的提取 | 第53页 |
4.2.3 数据的处理与分析 | 第53-54页 |
4.2.4 试验数据统计分析 | 第54页 |
4.3 结果与分析 | 第54-71页 |
4.3.1 小鼠肠道内容物样品测序及初步分析结果 | 第54-56页 |
4.3.2 小鼠肠道微生物区系的多样性分析 | 第56-61页 |
4.3.3 小鼠肠道微生物区系的物种组成 | 第61-67页 |
4.3.4 小鼠肠道内容物样品不同组间的物种组成差异分析 | 第67-68页 |
4.3.5 LEf Se分析 | 第68-71页 |
4.4 讨论 | 第71-72页 |
4.5 小结 | 第72-73页 |
第五章 细菌漆酶ATM的特性研究 | 第73-91页 |
5.1 试验材料 | 第74-76页 |
5.1.1 样品来源 | 第74页 |
5.1.2 培养基和试剂的配制 | 第74-75页 |
5.1.3 菌株和载体 | 第75页 |
5.1.4 引物 | 第75-76页 |
5.2 试验方法 | 第76-81页 |
5.2.1 产漆酶菌株的富集培养及初筛 | 第76页 |
5.2.2 产漆酶菌株的复筛 | 第76-77页 |
5.2.3 筛选菌株的鉴定 | 第77页 |
5.2.4 农杆菌S5-1 漆酶类似基因atm的扩增 | 第77-79页 |
5.2.5 Atm蛋白的表达与纯化 | 第79-80页 |
5.2.6 Atm蛋白漆酶活性检测及生化特性研究 | 第80页 |
5.2.7 Atm处理玉米秸秆对体外消化率的影响 | 第80-81页 |
5.2.8 试验数据统计分析 | 第81页 |
5.3 结果与分析 | 第81-89页 |
5.3.1 产漆酶菌株初筛结果 | 第81页 |
5.3.2 筛选菌株木质素降解能力 | 第81页 |
5.3.3 筛选菌株的漆酶酶活力鉴定 | 第81-82页 |
5.3.4 筛选菌株的鉴定 | 第82-83页 |
5.3.5 农杆菌S5-1 漆酶基因atm的克隆 | 第83-85页 |
5.3.6 Atm的纯化表达 | 第85-86页 |
5.3.7 Atm的酶学特性 | 第86-88页 |
5.3.8 Atm对玉米秸秆瘤胃体外消化率的影响 | 第88-89页 |
5.4 讨论 | 第89-90页 |
5.5 小结 | 第90-91页 |
第六章 结论与创新点 | 第91-92页 |
6.1 研究结论 | 第91页 |
6.2 创新点 | 第91页 |
6.3 下一步的研究思路 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-108页 |
附录 | 第108-112页 |
缩略词 | 第112-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
作者简介 | 第114页 |