中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-18页 |
1.1 桔小实蝇的危害与防治 | 第14页 |
1.2 谷氨酰胺合成酶的研究现状 | 第14-16页 |
1.2.1 谷氨酰胺合成酶 | 第14-15页 |
1.2.2 谷氨酰胺合成酶在生物体内的分布 | 第15页 |
1.2.3 谷氨酰胺合成酶的功能 | 第15-16页 |
1.3 研究意义 | 第16-18页 |
第二章 桔小实蝇谷氨酰胺合成酶同工酶基因克隆 | 第18-28页 |
2.1 材料和方法 | 第18-23页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第18页 |
2.1.2 主要试剂和仪器 | 第18-20页 |
2.1.3 总RNA提取 | 第20-21页 |
2.1.4 cDNA合成 | 第21页 |
2.1.5 引物设计与合成 | 第21-22页 |
2.1.6 PCR扩增反应 | 第22页 |
2.1.7 克隆及测序 | 第22页 |
2.1.8 桔小实蝇BdGSs基因的序列分析 | 第22-23页 |
2.2 结果与分析 | 第23-25页 |
2.2.1 桔小实蝇BdGSs基因的cDNA克隆 | 第23-24页 |
2.2.2 系统发育分析 | 第24-25页 |
2.3 讨论 | 第25-28页 |
第三章 桔小实蝇谷氨酰胺合成酶基因的时空表达模式 | 第28-36页 |
3.1 材料和方法 | 第28-30页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第28页 |
3.1.2 主要试剂和仪器 | 第28-29页 |
3.1.3 样品准备 | 第29页 |
3.1.4 引物设计与合成 | 第29-30页 |
3.1.5 实时荧光定量PCR | 第30页 |
3.1.6 标准曲线制作 | 第30页 |
3.2 结果与分析 | 第30-33页 |
3.2.1 引物扩增效率 | 第30-31页 |
3.2.2 BdGSs在桔小实蝇不同发育阶段的表达模式 | 第31-32页 |
3.2.3 BdGSs在桔小实蝇不同组织的表达模式 | 第32-33页 |
3.3 讨论 | 第33-36页 |
第四章 桔小实蝇谷氨酰胺合成酶对环境胁迫的响应 | 第36-42页 |
4.1 材料和方法 | 第36-38页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第36页 |
4.1.2 主要试剂和仪器 | 第36-37页 |
4.1.3 试虫处理 | 第37页 |
4.1.4 样品准备 | 第37页 |
4.1.5 实时荧光定量PCR | 第37-38页 |
4.2 结果与分析 | 第38-39页 |
4.2.1 极端温度对桔小实蝇BdGSs基因表达水平的影响 | 第38页 |
4.2.2 UV-B处理对桔小实蝇BdGSs基因表达水平的影响 | 第38-39页 |
4.2.3 杀虫剂处理对桔小实蝇BdGSs基因表达水平的影响 | 第39页 |
4.3 讨论 | 第39-42页 |
第五章 桔小实蝇BdGSs参与幼虫生长发育过程 | 第42-50页 |
5.1 材料和方法 | 第42-46页 |
5.1.1 供试昆虫 | 第42页 |
5.1.2 主要试剂和仪器 | 第42页 |
5.1.3 专性抑制剂饲喂 | 第42-43页 |
5.1.4 dsRNA引物设计 | 第43-44页 |
5.1.5 dsRNA合成 | 第44-45页 |
5.1.6 dsRNA纯化 | 第45页 |
5.1.7 幼虫RNA干扰 | 第45-46页 |
5.2 结果与分析 | 第46-48页 |
5.2.1 专性抑制剂处理后幼虫表型观察 | 第46页 |
5.2.2 RNAi后沉默效率及GS酶活检测 | 第46-47页 |
5.2.3 RNAi后幼虫表型变化 | 第47页 |
5.2.4 RNAi后BdSpook表达量变化 | 第47-48页 |
5.3 讨论 | 第48-50页 |
第六章 桔小实蝇BdGSs参与成虫生殖调控 | 第50-56页 |
6.1 材料和方法 | 第50-51页 |
6.1.1 供试昆虫 | 第50页 |
6.1.2 主要试剂和仪器 | 第50页 |
6.1.3 dsRNA引物设计 | 第50页 |
6.1.4 dsRNA合成 | 第50-51页 |
6.1.5 成虫RNAi干扰实验 | 第51页 |
6.2 结果与分析 | 第51-53页 |
6.2.1 RNAi后沉默效率 | 第51页 |
6.2.2 干扰BdGSs对桔小实蝇产卵量的影响 | 第51-52页 |
6.2.3 干扰BdGSs对桔小实蝇卵巢发育的影响 | 第52-53页 |
6.3 讨论 | 第53-56页 |
第七章 主要结论、创新点及研究展望 | 第56-58页 |
7.1 主要结果与结论 | 第56页 |
7.2 创新点 | 第56页 |
7.3 展望 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
在读期间发表论文目录 | 第66-68页 |
致谢 | 第68页 |