中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
前言 | 第11-13页 |
1 研究目的和意义 | 第11-12页 |
2 研究技术路线 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-21页 |
1 昆虫细胞凋亡 | 第13-17页 |
1.1 细胞凋亡概述 | 第13页 |
1.2 细胞凋亡特征 | 第13-14页 |
1.3 凋亡标志基因 Caspase 家族 | 第14-15页 |
1.4 昆虫细胞凋亡通路 | 第15页 |
1.5 外源物对昆虫细胞凋亡的影响 | 第15-17页 |
2 家蚕丝腺的研究进展 | 第17-19页 |
2.1 家蚕丝腺的结构与功能 | 第17-18页 |
2.2 家蚕丝腺细胞凋亡的研究进展 | 第18-19页 |
3 基因芯片技术研究进展 | 第19-20页 |
3.1 基因芯片技术概述 | 第19-20页 |
3.2 基因芯片技术在家蚕研究中的应用 | 第20页 |
4 总结 | 第20-21页 |
第二章 利用基因芯片技术分析家蚕丝腺经辛硫磷诱导后的转录特征 | 第21-35页 |
摘要 | 第21页 |
1 前言 | 第21-22页 |
2 材料方法 | 第22-24页 |
2.1 家蚕品系和杀虫剂 | 第22页 |
2.2 实验材料和总 RNA 的提取与纯化 | 第22页 |
2.3 基因芯片杂交实验和数据分析 | 第22-23页 |
2.4 琼脂糖凝胶电泳观察丝腺细胞凋亡 DNA 结构变化 | 第23页 |
2.5 Caspase-3 酶活检测 | 第23页 |
2.6 实时荧光定量 PCR 和数据分析 | 第23-24页 |
2.7 统计学分析 | 第24页 |
3 结果与分析 | 第24-32页 |
3.1 芯片杂交结果与分析 | 第24-27页 |
3.2 辛硫磷诱导后部分差异表达基因分类 | 第27-29页 |
3.3 荧光定量 PCR 结果 | 第29页 |
3.4 辛硫磷诱导后丝素蛋白转录水平特征 | 第29-30页 |
3.5 辛硫磷诱导引起 DNA 断裂 | 第30-32页 |
4 讨论 | 第32-35页 |
4.1 辛硫磷诱导引起丝腺细胞的凋亡 | 第32-33页 |
4.2 解毒相关基因的转录特征 | 第33页 |
4.3 蛋白降解和丝素合成相关基因的转录特征 | 第33-35页 |
第三章 吐丝预蛹期家蚕丝腺凋亡对丝素蛋白合成的影响 | 第35-47页 |
摘要 | 第35页 |
1 引言 | 第35-36页 |
2 材料与方法 | 第36-40页 |
2.1 昆虫品系和化学试剂 | 第36-37页 |
2.2 总 RNA 抽提 | 第37页 |
2.3 逆转录 | 第37页 |
2.4 实施荧光定量 PCR | 第37-38页 |
2.5 Western blot | 第38-40页 |
2.6 Caspase-3 酶活检测 | 第40页 |
2.7 统计学分析 | 第40页 |
3 结果与分析 | 第40-45页 |
3.1 丝腺形态变化 | 第40-41页 |
3.2 丝腺中 caspase 转录特征以及 caspase-3 酶活力测定 | 第41-42页 |
3.3 丝腺组织中 Fib-H, Fib-L, P25 的表达水平 | 第42-44页 |
3.4 ace 在丝腺中的转录表达特征 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-46页 |
4.1 丝腺凋亡的发生及鉴定 | 第45页 |
4.2 丝素在丝腺凋亡中特征 | 第45-46页 |
4.3 ace 在丝腺凋亡过程中作用 | 第46页 |
5 总结 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-58页 |
攻读学位期间本人公开发表论文 | 第58-59页 |
附录:试剂的配制及实验方法 | 第59-64页 |
致谢 | 第64-65页 |