| 英文缩略词 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 鸡卵巢和卵泡的结构及发育特征 | 第12-16页 |
| 1.1.1 鸡卵泡发育的特征及过程 | 第12-13页 |
| 1.1.2 鸡卵泡的各部分结构及功能 | 第13-15页 |
| 1.1.2.1 鸡卵泡卵黄的特征及功能 | 第13页 |
| 1.1.2.2 鸡卵泡卵黄周膜的特征及功能 | 第13-14页 |
| 1.1.2.3 鸡卵泡颗粒细胞的特征及功能 | 第14页 |
| 1.1.2.4 鸡卵泡基膜的特征及功能 | 第14-15页 |
| 1.1.2.5 鸡卵泡膜细胞的特征及功能 | 第15页 |
| 1.1.3 影响鸡卵泡发育的因素 | 第15-16页 |
| 1.2 CCT6A 基因的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.1 分子伴侣 | 第16页 |
| 1.2.2 CCT 的结构与功能 | 第16页 |
| 1.2.3 CCT6A 的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 RNAi 技术的发现及研究进展 | 第17-20页 |
| 1.3.1 RNA 干扰作用机制 | 第18-19页 |
| 1.3.2 miRNAs 的作用机制 | 第19页 |
| 1.3.3 RNAi 技术的应用及展望 | 第19-20页 |
| 1.3.3.1 RNAi 作为疾病治疗的方法 | 第19-20页 |
| 1.3.3.2 RNAi 技术的展望 | 第20页 |
| 1.4 分子标记的研究进展及应用 | 第20-21页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2. 材料与方法 | 第22-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 实验动物和样品采集 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要试剂及来源 | 第23页 |
| 2.1.4 常用试剂的配制 | 第23-24页 |
| 2.1.5 主要数据库及生物软件 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-38页 |
| 2.2.1 shRNAs 干扰载体的构建 | 第24-25页 |
| 2.2.2 无内毒素质粒大量提取 | 第25-26页 |
| 2.2.3 鸡卵泡外膜细胞分离培养 | 第26-27页 |
| 2.2.4 鸡卵泡颗粒细胞的分离培养 | 第27-28页 |
| 2.2.5 瞬时转染鸡卵泡细胞 | 第28-29页 |
| 2.2.6 各组织总 RNA 提取 | 第29-30页 |
| 2.2.6.1 总 RNA 提取步骤 | 第29-30页 |
| 2.2.6.2 RNA 品质和浓度检测 | 第30页 |
| 2.2.7 荧光定量 PCR | 第30-31页 |
| 2.2.7.1 反转录获得 cDNA | 第30-31页 |
| 2.2.7.2 实时荧光定量 PCR | 第31页 |
| 2.2.8 Western blot 检测 | 第31-34页 |
| 2.2.8.1 细胞总蛋白提取 | 第31-32页 |
| 2.2.8.2 总蛋白浓度测定 | 第32页 |
| 2.2.8.3 蛋白变性 | 第32-33页 |
| 2.2.8.4 Western blot 步骤 | 第33-34页 |
| 2.2.9 实验中用到的引物序列 | 第34-35页 |
| 2.2.10 基因组 DNA 的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.11 克隆测序法检测 SNPs | 第36-38页 |
| 2.2.11.1 PCR 扩增 | 第36页 |
| 2.2.11.2 PCR 产物纯化与连接 | 第36-37页 |
| 2.2.11.3 大肠杆菌 DH5α感受态细胞的转化 | 第37页 |
| 2.2.11.4 质粒 DNA 提取 | 第37-38页 |
| 2.2.11.6 单酶切验证 | 第38页 |
| 2.3 统计分析 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-52页 |
| 3.1 CCT6A 功能的研究结果与分析 | 第40-45页 |
| 3.1.1 鸡卵泡膜细胞和颗粒细胞中 CCT6A 的表达趋势 | 第40-41页 |
| 3.1.2 转染 shRNA 表达载体后分析 | 第41-45页 |
| 3.1.2.1 细胞形态及 GFP 观察 | 第41-42页 |
| 3.1.2.2 转染 shRNA 表达载体后 CCT6A mRNA 的表达分析 | 第42页 |
| 3.1.2.3 转染 shRNA 表达载体后 CCT6A 的蛋白表达分析 | 第42-43页 |
| 3.1.2.4 转染 shRNA 表达载体后卵泡膜细胞形态变化 | 第43-44页 |
| 3.1.2.5 转染 shRNA 表达载体后 BCL-2 和 Caspase-3 基因的表达情况 | 第44-45页 |
| 3.2 CCT6A 启动子区两个 SNPs 的鉴定与分析 | 第45-52页 |
| 3.2.1 克隆测序检测到 CCT6A 基因启动子区存在两个 SNPs | 第45-47页 |
| 3.2.2 等位基因和基因型频率分析 | 第47-48页 |
| 3.2.3 CCT6A 启动子区两突变位点的单倍型频率的分析 | 第48页 |
| 3.2.4 CCT6A 启动子区两突变位点的基因型频率的分析 | 第48-49页 |
| 3.2.5 新杨褐中 CCT6A 启动子区的多态性位点与产蛋性能的关联分析 | 第49-51页 |
| 3.2.7 CCT6A 基因在 AA、AD 和 DD 基因型的个体中 mRNA 表达情况 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第63页 |
