| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 植物木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶(XTHs)结构与功能 | 第11-14页 |
| 1.1.1 XTH基因产物的分子系统发育 | 第11-12页 |
| 1.1.2 XTHs酶类结构特征 | 第12-13页 |
| 1.1.3 XTHs作用机制 | 第13-14页 |
| 1.1.4 XTHs对细胞壁的作用 | 第14页 |
| 1.2 果胶甲基酯酶PME的结构与功能 | 第14-15页 |
| 1.2.1 PME、PMEI的起源与结构 | 第14-15页 |
| 1.2.2 PME和PMEI在植物发育中的作用 | 第15页 |
| 1.3 细胞壁代谢对非生物胁迫的响应 | 第15-21页 |
| 1.3.1 细胞壁与非生物胁迫 | 第15-16页 |
| 1.3.2 冷胁迫下细胞壁物质组成变化 | 第16-21页 |
| 1.3.2.1 低温胁迫下果胶及其相关酶类变化 | 第17-18页 |
| 1.3.2.2 低温胁迫下半纤维素及其相关酶类变化 | 第18-19页 |
| 1.3.2.3 低温胁迫下木质素及其相关酶类变化 | 第19-21页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料和方法 | 第22-30页 |
| 2.1 XTH5和XTH7基因开放阅读框(ORF)的克隆 | 第22-23页 |
| 2.1.1 野生型拟南芥RNA的提取 | 第22页 |
| 2.1.2 拟南芥木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶XTH5开放阅读框ORF的克隆 | 第22-23页 |
| 2.1.3 拟南芥木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶XTH7开放阅读框ORF的克隆 | 第23页 |
| 2.2 Gateway技术过表达载体的构建与转化 | 第23-25页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.2.2 构建入门载体与表达载体 | 第23-25页 |
| 2.2.2.1 构建入门载体 | 第23-24页 |
| 2.2.2.2 表达载体构建 | 第24-25页 |
| 2.2.3 农杆菌花浸法转化以及转基因植株的筛选 | 第25页 |
| 2.3 生长发育表型 | 第25页 |
| 2.4 常温生长根长与低温生长根长 | 第25页 |
| 2.5 抗冻性分析 | 第25-26页 |
| 2.6 渗透性物质含量测定 | 第26-27页 |
| 2.6.1 脯氨酸含量测定 | 第26页 |
| 2.6.2 可溶性糖含量测定 | 第26-27页 |
| 2.6.2.1 可溶性总糖含量测定 | 第26页 |
| 2.6.2.2 蔗糖含量测定 | 第26页 |
| 2.6.2.3 果糖含量测定 | 第26-27页 |
| 2.7 抗氧化酶活性测定 | 第27页 |
| 2.7.1 考马斯亮蓝法测蛋白质含量 | 第27页 |
| 2.7.2 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定(氮蓝四唑光化还原法) | 第27页 |
| 2.7.3 过氧化物酶(POD)活性测定(愈创木酚法) | 第27页 |
| 2.7.4 过氧化氢酶(CAT)活性测定 | 第27页 |
| 2.8 细胞壁物质组成 | 第27-28页 |
| 2.8.1 果胶含量测定 | 第28页 |
| 2.8.2 半纤维素含量测定 | 第28页 |
| 2.8.3 纤维素含量测定 | 第28页 |
| 2.9 抗冻基因表达 | 第28-30页 |
| 第三章 结果与分析 | 第30-45页 |
| 3.1 XTH5和XTH7生物信息学分析 | 第30-31页 |
| 3.2 XTH与PMEI转基因植株鉴定及表型观察 | 第31-34页 |
| 3.3 过表达XTH和PMEI对拟南芥抗冻性的影响 | 第34-36页 |
| 3.4 oxXTH和oxPMEI基因型植株细胞壁物质组成差异 | 第36-37页 |
| 3.5 过表达PMEI对细胞壁果胶甲酯化程度的影响 | 第37-38页 |
| 3.6 过表达XTH和PMEI对拟南芥渗透性物质含量的影响 | 第38-41页 |
| 3.6.1 过表达XTH和PMEI基因型植株脯氨酸含量变化 | 第38-39页 |
| 3.6.2 过表达XTH和PMEI基因型植株可溶性糖含量变化 | 第39-41页 |
| 3.7 oxXTH和oxPMEI基因型植株抗氧化酶活性差异 | 第41-43页 |
| 3.8 oxXTH和oxPMEI基因型植株抗冻基因表达差异 | 第43-45页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第45-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
