摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-20页 |
1.1 木聚糖与木聚糖酶 | 第8-9页 |
1.1.1 木聚糖及其结构 | 第8页 |
1.1.2 木聚糖酶 | 第8-9页 |
1.2 木聚糖酶的产生菌种 | 第9-10页 |
1.3 木聚糖酶的分类 | 第10-11页 |
1.4 木聚糖降解酶系统的催化机制 | 第11-12页 |
1.5 木聚糖酶的诱导合成 | 第12-13页 |
1.6 木聚糖酶的生产 | 第13-15页 |
1.6.1 天然菌种发酵生产 | 第13-14页 |
1.6.2 工程菌生产木聚糖酶 | 第14页 |
1.6.3 固定化菌体生产木聚糖酶 | 第14-15页 |
1.7 木聚糖酶的生产影响因素 | 第15-16页 |
1.8 木聚糖酶的应用 | 第16-17页 |
1.9 木聚糖酶应用中存在的问题及研究方向 | 第17-20页 |
2 引言 | 第20-21页 |
3 材料与方法 | 第21-28页 |
3.1 菌种 | 第21页 |
3.2 主要仪器 | 第21页 |
3.3 主要试剂 | 第21页 |
3.4 培养基 | 第21-22页 |
3.4.1 斜面培养基 | 第21-22页 |
3.4.2 产酶培养基 | 第22页 |
3.5 单孢子悬液制备 | 第22页 |
3.6 液体产酶培养 | 第22页 |
3.7 粗酶液的制备 | 第22页 |
3.8 木聚糖酶活力的测定 | 第22-23页 |
3.9 生物量的测定 | 第23页 |
3.10 菌丝体的获得 | 第23页 |
3.11 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23页 |
3.12 酶谱的检测电泳 | 第23页 |
3.13 总 RNA 的提取 | 第23-24页 |
3.14 RNA 的纯度和完整性分析 | 第24页 |
3.15 cDNA 的合成 | 第24-25页 |
3.16 电泳检测 | 第25页 |
3.17 引物设计 | 第25页 |
3.18 半定量 RT-PCR 对黑曲霉诱导产木聚糖酶的分析 | 第25-26页 |
3.18.1 半定量 RT-PCR 程序设置 | 第26页 |
3.18.2 结果检测 | 第26页 |
3.19 实时 PCR | 第26-28页 |
3.19.1 PCR 程序设置 | 第26-27页 |
3.19.2 应用 SYBR Green 方法对不同条件下两基因表达进行分析 | 第27-28页 |
4 结果与分析 | 第28-42页 |
4.1 黑曲霉 A09 的木聚糖酶 F10 和 G11 在不同碳源中表达规律的研究 | 第28-33页 |
4.1.1 黑曲霉 A09 在不同碳源下的生长及产酶的情况 | 第28页 |
4.1.2 RNA 的纯度和完整性分析 | 第28-29页 |
4.1.3 RT-PCR 法检测 F10 和 G11 表达情况 | 第29-30页 |
4.1.4 用 Real-time PCR 法分析黑曲霉 A09 的 F10 和 G11 木聚糖酶在不同碳源中表达差异 | 第30-33页 |
4.1.4.1 黑曲霉 A09 的 18SrRNA、F10 和 G11 的融解曲线 | 第30页 |
4.1.4.2 黑曲霉 A09 的 18SrRNA、F10 和 G11 基因的扩增曲线分析 | 第30-31页 |
4.1.4.3 不同碳源下黑曲霉 A09 的木聚糖酶 F10 和 G11 基因相对表达量差异 | 第31-33页 |
4.2 黑曲霉 A09 的木聚糖酶 F10、G11 基因在不同氮源中表达规律的研究 | 第33-37页 |
4.2.1 黑曲霉 A09 在不同氮源下的生长及产酶的情况 | 第33-34页 |
4.2.2 RNA 的纯度和完整性分析 | 第34页 |
4.2.3 RT-PCR 法检测 F10 和 G11 表达情况 | 第34-35页 |
4.2.4 用 Real-time PCR 法分析黑曲霉 A-09 木聚糖酶 F10 和 G11 在不同氮源中基因表达差异 | 第35-37页 |
4.2.4.1 黑曲霉 A-09 的 18SrRNA、F10 和 G11 基因的扩增曲线分析 | 第35-36页 |
4.2.4.2 黑曲霉 A-09 在不同氮源下木聚糖酶基因 F10 和 G11 的表达量差异 | 第36-37页 |
4.3 黑曲霉 A09 的 F10 和 G11 木聚糖酶在不同生长阶段表达差异的研究 | 第37-42页 |
4.3.1 黑曲霉 A09 在不同培养阶段的生长及产酶的情况 | 第37-38页 |
4.3.2 RNA 的纯度和完整性分析 | 第38页 |
4.3.3 RT-PCR 法检测 F10 和 G11 表达情况 | 第38-39页 |
4.3.4 用 Real-time PCR 法分析黑曲霉 A09 木聚糖酶 F10 和 G11 在不同生长阶段基因表达差异 | 第39-41页 |
4.3.4.1 黑曲霉 A09 的 18SrRNA、F10 和 G11 基因的扩增曲线分析 | 第39-40页 |
4.3.4.2 培养 A09 不同生长阶段 F10 和 G11 基因的相对表达量差异 | 第40-41页 |
4.3.5 酶谱检测分析 | 第41-42页 |
5 结论与讨论 | 第42-44页 |
5.1 结论 | 第42页 |
5.2 讨论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
Abstract | 第51-52页 |