| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.1 植物参与盐胁迫的分子机制 | 第12-14页 |
| 1.1.1 离子平衡 | 第12页 |
| 1.1.2 渗透平衡 | 第12-13页 |
| 1.1.3 盐压力的损伤控制及修复 | 第13页 |
| 1.1.4 生长调控 | 第13-14页 |
| 1.2 植物蛋白激酶在逆境胁迫信号通路中的作用 | 第14-17页 |
| 1.2.1 植物蛋白激酶的最新研究进展 | 第14页 |
| 1.2.2 类受体蛋白激酶 | 第14-15页 |
| 1.2.3 促分裂原活化蛋白激酶 | 第15-16页 |
| 1.2.4 钙依赖/钙调素不依赖的蛋白激酶 | 第16页 |
| 1.2.5 核糖体S6 蛋白激酶 | 第16-17页 |
| 1.2.6 糖原合成酶激酶 | 第17页 |
| 1.3 酵母双杂交技术在信号通路研究中的应用 | 第17-19页 |
| 1.3.1 酵母双杂交系统的原理 | 第17-18页 |
| 1.3.2 酵母双杂交技术在信号通路研究中的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 高等植物启动子概述 | 第19-24页 |
| 1.4.1 植物启动子结构 | 第19-20页 |
| 1.4.2 植物启动子的分类 | 第20页 |
| 1.4.3 植物启动子常用的克隆方法 | 第20-22页 |
| 1.4.4 植物启动子功能的研究方法 | 第22-24页 |
| 第二章 小麦WTK 蛋白激酶作用蛋白的筛选与鉴定 | 第24-36页 |
| 2.1 实验材料、主要试剂及仪器 | 第24页 |
| 2.1.1 植物材料与载体 | 第24页 |
| 2.1.2 试剂药品及及仪器 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.2.1 诱饵载体的构建 | 第24-27页 |
| 2.2.2 酵母感受态细胞的制备 | 第27页 |
| 2.2.3 诱饵的自激活验证 | 第27页 |
| 2.2.4 共转化法筛选cDNA 文库 | 第27-28页 |
| 2.2.5 酵母克隆的初步鉴定 | 第28页 |
| 2.2.6 酵母质粒的提取 | 第28页 |
| 2.2.7 候选克隆DNA 片段测序及分析 | 第28-29页 |
| 2.2.8 本章实验用培养基配方 | 第29-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 2.3.1 WTK 诱饵载体的构建与自激活作用的检测 | 第30-32页 |
| 2.3.2 小麦盐处理cDNA 文库的筛选 | 第32页 |
| 2.3.3 候选基因的测序结果分析 | 第32-33页 |
| 2.3.4 酵母体内验证WTK 与TaNPK 的互作 | 第33-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 TANPK 启动子的活性分析 | 第36-51页 |
| 3.1 实验材料、主要试剂及仪器 | 第36页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第36页 |
| 3.1.2 菌株及载体 | 第36页 |
| 3.1.3 试剂药品及仪器 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-45页 |
| 3.2.1 染色体步移法克隆TaNPK 基因的5’端侧翼序列 | 第36-39页 |
| 3.2.2 TaNPK 启动子的序列分析 | 第39页 |
| 3.2.3 TaNPK 启动子驱动下的GUS 基因的瞬时表达载体构建 | 第39-40页 |
| 3.2.4 PEG 介导下拟南芥叶片原生质体的瞬时表达 | 第40-41页 |
| 3.2.5 GUS 活性的定量检测 | 第41-43页 |
| 3.2.6 实时荧光定量PCR 检测盐胁迫下TaNPK 基因的表达水平 | 第43-45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-49页 |
| 3.3.1 TaNPK 启动子的克隆与序列分析 | 第45-46页 |
| 3.3.2 TaNPK 启动子5′端不同缺失表达载体的构建 | 第46-47页 |
| 3.3.3 拟南芥原生质体的制备与活力鉴定 | 第47页 |
| 3.3.4 GUS 活性荧光定量检测 | 第47-48页 |
| 3.3.5 NaCl 处理下TaNPK 的表达水平分析 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 TANPK 基因的亚细胞定位 | 第51-56页 |
| 4.1 实验材料、主要试剂及仪器 | 第51页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第51页 |
| 4.1.2 菌株及载体 | 第51页 |
| 4.1.3 试剂药品及仪器 | 第51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-52页 |
| 4.2.1 TaNPK 与GFP 融合载体的构建 | 第51-52页 |
| 4.2.2 TaNPK 蛋白跨膜域的预测 | 第52页 |
| 4.2.3 PEG 介导法转化拟南芥原生质体 | 第52页 |
| 4.3 结论与分析 | 第52-54页 |
| 4.3.1 TaNPK 与16318hGFP 融合载体的构建 | 第52-53页 |
| 4.3.2 TaNPK 蛋白的跨膜区预测结果 | 第53-54页 |
| 4.3.3 TaNPK 基因的亚细胞定位观察 | 第54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
