| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略表 | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述及选题目的意义 | 第12-25页 |
| 1 鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展 | 第12-19页 |
| ·生物学分类地位 | 第12页 |
| ·病毒粒子结构 | 第12-13页 |
| ·基因组结构 | 第13页 |
| ·病毒的转录与复制过程 | 第13-15页 |
| ·结构蛋白及其生物学功能 | 第15-18页 |
| ·纤突蛋白(S) | 第15-16页 |
| ·囊膜蛋白(M) | 第16-17页 |
| ·核衣壳蛋白(N) | 第17页 |
| ·小囊膜蛋白(E) | 第17-18页 |
| ·非结构蛋白 | 第18页 |
| ·IBV的致病性 | 第18-19页 |
| 2 鸡传染性支气管炎病毒流行病学研究进展 | 第19-22页 |
| ·分子变异机制 | 第19-20页 |
| ·基因突变 | 第19页 |
| ·同源重组 | 第19-20页 |
| ·国外流行情况 | 第20-21页 |
| ·国内流行情况 | 第21-22页 |
| 3 传染性支气管炎病毒基因表达研究进展 | 第22-23页 |
| 4 研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二部分 试验内容 | 第25-56页 |
| 第一章 四川部分地区鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定和遗传进化分析 | 第25-41页 |
| 1 材料 | 第25-27页 |
| ·病料 | 第25页 |
| ·鸡胚、鸡红细胞及雏鸡 | 第25页 |
| ·主要试验仪器 | 第25页 |
| ·菌种、载体及试验试剂 | 第25-27页 |
| ·引物的设计 | 第27页 |
| 2 试验方法 | 第27-33页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第27-29页 |
| ·病毒分离 | 第27页 |
| ·病毒鉴定 | 第27-29页 |
| ·IBV S1基因的序列的测定 | 第29-31页 |
| ·S1基因的PCR扩增 | 第29页 |
| ·胶回收 | 第29页 |
| ·IBV S1与pMD19-T载体连接 | 第29页 |
| ·连接产物的转化 | 第29-30页 |
| ·重组质粒pMD19-S1的筛选和鉴定 | 第30-31页 |
| ·IBV分离株S1基因的遗传变异分析 | 第31页 |
| ·EID50的测定 | 第31-32页 |
| ·IBV分离株的致病性研究 | 第32-33页 |
| 3 试验结果 | 第33-36页 |
| ·病毒分离与鉴定 | 第33-34页 |
| ·病毒分离 | 第33页 |
| ·病毒的鉴定 | 第33-34页 |
| ·IBV S1基因的序列的测定 | 第34-35页 |
| ·IBV分离株S1基因的遗传变异分析 | 第35-36页 |
| ·EID50的测定 | 第36页 |
| ·IBV分离株的致病性研究 | 第36页 |
| 4 讨论 | 第36-41页 |
| 第二章 鸡传染性支气管炎病毒四川分离株S1基因的原核表达 | 第41-54页 |
| 1 材料 | 第41-43页 |
| ·毒株、菌种及载体 | 第41页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·常用仪器 | 第42页 |
| ·常用试剂配制 | 第42-43页 |
| 2 方法 | 第43-47页 |
| ·S1基因的生物信息学分析 | 第43页 |
| ·引物的设计 | 第43-44页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第44页 |
| ·目的片段的T克隆 | 第44页 |
| ·重组质粒pMD19-pS1与pET-32a(+)载体的酶切 | 第44页 |
| ·目的片段与pET-32a(+)载体的连接转化 | 第44页 |
| ·pET-32-S1的表达 | 第44-46页 |
| ·重组质粒pET-32-S1的表达 | 第44-45页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第45页 |
| ·表达条件的优化 | 第45-46页 |
| ·Western-blot分析 | 第46-47页 |
| ·兔抗IBV高免血清的制备 | 第46页 |
| ·Western-blot | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-52页 |
| ·S1基因的生物信息学分析 | 第47-49页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第49页 |
| ·pET-32-S1的表达 | 第49-51页 |
| ·表达条件的优化 | 第49-51页 |
| ·蛋白质的初纯 | 第51页 |
| ·Western-blot | 第51-52页 |
| ·高免血清的制备 | 第51页 |
| ·Western-blot | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 附录 | 第64-68页 |
