| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 文献综述 | 第11-22页 |
| 1 JEV的病原学特性 | 第11-13页 |
| ·JEV的理化特性 | 第11-12页 |
| ·JEV的培养特性 | 第12-13页 |
| ·JEV的血凝性 | 第13页 |
| 2 JEV的分子生物学特性 | 第13-15页 |
| ·JEV的基因组及编码蛋白 | 第13-14页 |
| ·结构蛋白 | 第14-15页 |
| ·非结构蛋白 | 第15页 |
| 3 JEV的诊断方法 | 第15-20页 |
| ·JEV的分离鉴定 | 第16页 |
| ·JEV的血清学诊断方法 | 第16-18页 |
| ·JEV的分子生物学诊断方法 | 第18-20页 |
| 4 新型疫苗的研究 | 第20-21页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| ·猪JEV RT-PCR检测方法的建立 | 第21页 |
| ·JEV四川分离株PrM/E基因的序列分析 | 第21-22页 |
| 第一章 猪乙型脑炎病毒RT-PCR检测方法的建立 | 第22-31页 |
| 1 材料 | 第22-23页 |
| ·毒株和细胞 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·实验仪器 | 第22-23页 |
| 2 方法 | 第23-26页 |
| ·JEV引物设计 | 第23页 |
| ·JEV病毒的增殖 | 第23页 |
| ·JEV核酸提取 | 第23-24页 |
| ·JEV CDNA的合成 | 第24-25页 |
| ·JEV RT-PCR的扩增 | 第25页 |
| ·JEV RT-PCR条件的优化 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR特异性试验 | 第26页 |
| ·RT-PCR敏感性试验 | 第26页 |
| ·临床样品的检测 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-29页 |
| ·JEV RT-PCR扩增结果 | 第26-27页 |
| ·RT-PCR扩增优化结果 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR特异性结果 | 第28页 |
| ·RT-PCR敏感性结果 | 第28-29页 |
| ·临床检测结果 | 第29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| ·扩增基因的选择 | 第29页 |
| ·PCR的循环次数 | 第29-30页 |
| ·JEV RT-PCR检测的敏感性 | 第30页 |
| ·JEV RNA提取 | 第30-31页 |
| 第二章 JEV分离株CZ1、NJ1的PrM/E基因的克隆和序列分析 | 第31-45页 |
| 1 材料 | 第31-32页 |
| ·生物材料 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31-32页 |
| 2 方法 | 第32-36页 |
| ·引物设计 | 第32页 |
| ·JEV核酸的提取及cDNA合成 | 第32页 |
| ·JEV PrM/E基因的扩增 | 第32-33页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第33页 |
| ·JEV PrM/E基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·阳性菌落的筛选与鉴定 | 第34-36页 |
| 3 结果 | 第36-42页 |
| ·PrM/E基因的扩增结果 | 第36页 |
| ·重组质粒pMD19-T-PrM/E的鉴定 | 第36-37页 |
| ·PrM/E基因的序列测定 | 第37-38页 |
| ·新分离病毒E基因的相似性分析 | 第38-39页 |
| ·E蛋白活性结构域氨基酸分析 | 第39-40页 |
| ·四川省新分离2株JEV的基因分型 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| ·四川乙脑分离株遗传进化的特征 | 第42-43页 |
| ·乙脑活载体疫苗研制中保护性基因的选择 | 第43页 |
| ·乙脑病毒E蛋白相似性及活性结构域分析 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 附录 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57页 |