| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第15-33页 |
| 1.1 鸡传染性法氏囊病(IBD) | 第15-17页 |
| 1.1.1 IBD概况 | 第15页 |
| 1.1.2 IBD流行病学 | 第15-16页 |
| 1.1.3 IBD防控 | 第16-17页 |
| 1.2 鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV) | 第17-24页 |
| 1.2.1 IBDV分类学地位 | 第17页 |
| 1.2.2 IBDV基因组结构 | 第17-18页 |
| 1.2.3 IBDV形态结构 | 第18页 |
| 1.2.4 IBDV蛋白结构与功能 | 第18-24页 |
| 1.3 VP2蛋白与宿主相互作用的研究进展 | 第24-28页 |
| 1.3.1 不同血清型IBDV的细胞受体比较研究 | 第25页 |
| 1.3.2 不同毒力型IBDV的细胞受体比较研究 | 第25-26页 |
| 1.3.3 IBDV候选受体蛋白分子研究进展 | 第26-28页 |
| 1.4 IBDV的复制周期 | 第28-32页 |
| 1.4.1 吸附与侵入 | 第28页 |
| 1.4.2 脱壳 | 第28页 |
| 1.4.3 转录 | 第28-29页 |
| 1.4.4 翻译 | 第29-30页 |
| 1.4.5 组装 | 第30页 |
| 1.4.6 释放 | 第30-32页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第32-33页 |
| 第二章 IBDV VP2蛋白与宿主蛋白CK1α相互作用的鉴定 | 第33-40页 |
| 2.1 材料与方法 | 第33-35页 |
| 2.1.1 细胞、病毒、质粒 | 第33页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第33页 |
| 2.1.3 病毒感染 | 第33-34页 |
| 2.1.4 免疫共沉淀与质谱分析 | 第34页 |
| 2.1.5 CK1α 真核表达质粒构建 | 第34页 |
| 2.1.6 细胞转染 | 第34-35页 |
| 2.1.7 激光共聚焦 | 第35页 |
| 2.1.8 蛋白免疫印迹（Western-blot） | 第35页 |
| 2.2 结果 | 第35-38页 |
| 2.2.1 免疫共沉淀及质谱鉴定CK1α 蛋白为IBDV VP2疑似的相互作用蛋白 | 第35-36页 |
| 2.2.2 外源性蛋白CK1α 与VP2存在相互作用 | 第36-37页 |
| 2.2.3 内源性蛋白CK1α 与VP2存在相互作用 | 第37-38页 |
| 2.3 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 CK1α 在IBDV复制中的作用及分子机制 | 第40-61页 |
| 3.1 材料与方法 | 第40-45页 |
| 3.1.1 细胞、病毒、质粒 | 第40页 |
| 3.1.2 主要试剂及抗体 | 第40页 |
| 3.1.3 siRNA设计与表达siRNA的重组质粒构建 | 第40-41页 |
| 3.1.4 CK1α 下调表达 | 第41-42页 |
| 3.1.5 CK1α 过表达 | 第42页 |
| 3.1.6 D4476药物处理 | 第42页 |
| 3.1.7 细胞活性测定 | 第42页 |
| 3.1.8 病毒效价滴定 | 第42页 |
| 3.1.9 干扰素（IFN）检测 | 第42-43页 |
| 3.1.10 poly I:C转染 | 第43页 |
| 3.1.11 IFN-β 处理DF1细胞 | 第43页 |
| 3.1.12 IFNAR1泛素化相关质粒构建 | 第43-44页 |
| 3.1.13 IFNAR1的定点突变 | 第44页 |
| 3.1.14 IFNAR1细胞内泛素化实验 | 第44页 |
| 3.1.15 IFNAR1胞外区原核表达与多抗制备 | 第44-45页 |
| 3.1.16 流式细胞术 | 第45页 |
| 3.1.17 灰度值分析 | 第45页 |
| 3.1.18 数据统计分析 | 第45页 |
| 3.2 结果 | 第45-56页 |
| 3.2.1 IBDV感染易感细胞后CK1α 下调 | 第45-46页 |
| 3.2.2 CK1α 下调表达抑制病毒复制 | 第46-48页 |
| 3.2.3 CK1α 上调表达促进IBDV复制 | 第48-49页 |
| 3.2.4 D4476抑制IBDV复制 | 第49-50页 |
| 3.2.5 IBDV感染诱导DF1细胞产生IFN-β | 第50页 |
| 3.2.6 CK1α 拮抗IFN-β 的抗病毒作用 | 第50-51页 |
| 3.2.7 CK1α 不影响宿主IFN-β 表达量 | 第51-52页 |
| 3.2.8 CK1α 负调控IFNAR1蛋白 | 第52-54页 |
| 3.2.9 IBDV感染DF1细胞后IFNAR1上调 | 第54-56页 |
| 3.3 讨论 | 第56-61页 |
| 第四章 IBDV VP2蛋白与宿主蛋白CSGalNAcT2相互作用鉴定 | 第61-70页 |
| 4.1 材料与方法 | 第61-63页 |
| 4.1.1 细胞、质粒 | 第61页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第61页 |
| 4.1.3 酵母双杂交筛选 | 第61-62页 |
| 4.1.4 CSGalNAcT2真核表达质粒及其缺失突变株的构建 | 第62页 |
| 4.1.5 免疫共沉淀实验 | 第62-63页 |
| 4.1.6 激光共聚焦实验 | 第63页 |
| 4.1.7 共定位分析 | 第63页 |
| 4.2 结果 | 第63-67页 |
| 4.2.1 酵母双杂交筛选结果 | 第63-64页 |
| 4.2.2 候选互作蛋白免疫共沉淀验证结果 | 第64-65页 |
| 4.2.3 CSGalNAcT2与VP2蛋白共定位于高尔基体 | 第65-67页 |
| 4.3 讨论 | 第67-70页 |
| 第五章 CSGalNAcT2在IBDV复制中的作用 | 第70-80页 |
| 5.1 材料与方法 | 第70-73页 |
| 5.1.1 细胞、病毒、质粒 | 第70页 |
| 5.1.2 主要试剂及抗体 | 第70页 |
| 5.1.3 基因差异表达分析 | 第70-71页 |
| 5.1.4 CSGalNAcT2实时荧光定量RT-PCR检测 | 第71页 |
| 5.1.5 靶向CSGalNAcT2的干扰RNA（siRNA）的设计与合成 | 第71页 |
| 5.1.6 CSGalNAcT2下调表达 | 第71-72页 |
| 5.1.7 CSGalNAcT2过表达 | 第72页 |
| 5.1.8 Brefeldin A药物处理 | 第72页 |
| 5.1.9 IBDV复制检测 | 第72-73页 |
| 5.1.10 灰度值分析 | 第73页 |
| 5.1.11 数据统计分析 | 第73页 |
| 5.2 结果 | 第73-77页 |
| 5.2.1 CSGalNAcT2在IBDV感染过程中上调 | 第73-74页 |
| 5.2.2 CSGalNAcT2上调表达促进IBDV复制 | 第74页 |
| 5.2.3 CSGalNAcT2下调表达抑制IBDV复制 | 第74-75页 |
| 5.2.4 CSGalNAcT2对IBDV的促进作用依赖于高尔基体的完整性 | 第75-77页 |
| 5.3 讨论 | 第77-80页 |
| 第六章 全文结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-92页 |
| 附录 | 第92-97页 |
| 附录 1 | 第92-93页 |
| 附录 2 | 第93-94页 |
| 附录 3 | 第94-95页 |
| 附录 4 | 第95-96页 |
| 附录 5 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 作者简历 | 第98-99页 |
