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深红红螺菌CbbM基因的玉米叶绿体表达载体构建及表达分析

摘要第11-12页
Abstract第12页
第一章 文献综述第13-22页
    1.1 Rubisco的研究进展第13-16页
        1.1.1 Rubisco的分类和进化第13-14页
        1.1.2 Rubisco的重组研究第14-15页
        1.1.3 深红红螺菌Form Ⅱ Rubisco的研究进展第15-16页
    1.2 叶绿体基因工程的研究进展第16-20页
        1.2.1 叶绿体遗传转化的特点第16-17页
        1.2.2 叶绿体基因工程的应用第17-18页
        1.2.3 叶绿体遗传转化的方法第18-19页
        1.2.4 叶绿体基因工程所需的标记基因和报告基因第19-20页
        1.2.5 玉米叶绿体转化的研究进展第20页
    1.3 研究的目的及思路第20-22页
第二章 深红红螺菌CbbM及玉米RbcL启动子和终止子的克隆第22-44页
    2.1 材料与仪器第22-23页
        2.1.1 材料第22-23页
        2.1.2 仪器第23页
    2.2 方法第23-29页
        2.2.1 深红红螺菌基因组DNA的提取第23-24页
        2.2.2 CbbM基因的克隆第24-27页
        2.2.3 CbbM基因的生物信息学分析及与玉米RbcL的比较第27页
        2.2.4 玉米B73全基因组DNA的提取第27-28页
        2.2.5 RbcL基因启动子的克隆第28-29页
        2.2.6 RbcL基因终止子的克隆第29页
    2.3 结果与分析第29-42页
        2.3.1 深红红螺菌总DNA的提取结果第29-30页
        2.3.2 CbbM基因片段克隆结果第30-33页
        2.3.3 CbbM基因生物信息学分析及与玉米RbcL的比较第33-37页
        2.3.4 玉米B73全基因组DNA提取结果第37页
        2.3.5 RbcL基因启动子的克隆结果第37-40页
        2.3.6 RbcL基因终止子的克隆结果第40-42页
    2.4 讨论第42-43页
    2.5 结论第43-44页
第三章 玉米叶绿体同源重组片段trnA、trnI基因的克隆第44-53页
    3.1 材料与仪器第44页
        3.1.1 材料第44页
        3.1.2 仪器第44页
    3.2 方法第44-46页
        3.2.1 同源序列trnA基因的克隆第44-45页
        3.2.2 同源序列trnI基因的克隆第45-46页
    3.3 结果与分析第46-51页
        3.3.1 同源序列trnA基因的克隆结果第46-48页
        3.3.2 同源序列trnI基因的克隆结果第48-51页
    3.4 讨论第51页
    3.5 结论第51-53页
第四章 16SrRNA启动子、aadA标记基因和RbcL终止子的克隆第53-64页
    4.1 材料与仪器第53页
        4.1.1 材料第53页
        4.1.2 仪器第53页
    4.2 方法第53-56页
        4.2.1 16SrRNA基因启动子的克隆第53-54页
        4.2.2 aadA基因的克隆第54-55页
        4.2.3 RbcL基因终止子的克隆第55-56页
    4.3 结果与分析第56-63页
        4.3.1 16SrRNA基因启动子的克隆结果第56-58页
        4.3.2 aadA基因的克隆结果第58-60页
        4.3.3 RbcL基因终止子的克隆结果第60-63页
    4.4 讨论第63页
    4.5 结论第63-64页
第五章 深红红螺菌CbbM基因玉米叶绿体表达载体的构建第64-76页
    5.1 材料与仪器第64-65页
        5.1.1 材料第64-65页
        5.1.2 仪器第65页
    5.2 方法第65-66页
        5.2.1 中间载体pUC19-p的构建第65页
        5.2.2 中间载体1302-a-T2-A的构建第65页
        5.2.3 中间载体pBs Ⅱ KS-I-RP-M-T的构建第65-66页
        5.2.4 CbbM叶绿体表达载体pBs Ⅱ KS-CbbM的构建及验证第66页
    5.3 结果与分析第66-75页
        5.3.1 中间载体pUC19-p的构建的结果第66-67页
        5.3.2 中间载体1302-a-T2-A的构建的结果第67-69页
        5.3.3 中间载体pBs Ⅱ KS-I-RP-M-T的构建的结果第69-71页
        5.3.4 CbbM叶绿体表达载体pBs Ⅱ KS-CbbM的构建及验证第71-72页
        5.3.5 CbbM叶绿体表达载体pBs Ⅱ KS-CbbM的构建总结第72-75页
    5.4 讨论第75页
    5.5 结论第75-76页
第六章 深红红螺菌CbbM基因表达分析第76-85页
    6.1 材料与仪器第76-77页
        6.1.1 材料第76-77页
        6.1.2 菌种的活化及处理第77页
        6.1.3 仪器第77页
    6.2 方法第77-79页
        6.2.1 引物设计第77-78页
        6.2.2 深红红螺菌RNA的提取第78页
        6.2.3 第一链cDNA合成第78-79页
        6.2.4 实时荧光定量PCR第79页
    6.3 结果与分析第79-83页
        6.3.1 深红红螺菌总RNA提取和检测结果第79-80页
        6.3.2 引物检测结果第80页
        6.3.3 RT-PCR扩增产物鉴定结果第80-81页
        6.3.4 CbbM基因实时定量PCR结果第81-83页
    6.4 讨论第83-84页
    6.5 结论第84-85页
参考文献第85-92页
致谢第92页

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