中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第12-30页 |
1 芜菁花叶病毒(TuMV)概述 | 第12-15页 |
1.1 芜菁花叶病毒的生物学特性 | 第12-13页 |
1.2 芜菁花叶病毒的分子生物学特性 | 第13-15页 |
2 植物RNA病毒的分子变异 | 第15-17页 |
2.1 分子变异机制 | 第15-17页 |
2.2 芜菁花叶病毒分子变异的研究进展 | 第17页 |
3 植物病毒侵染性克隆 | 第17-19页 |
3.1 植物病毒侵染性克隆的类型 | 第18页 |
3.2 影响病毒全基因组cDNA侵染活性的因素 | 第18页 |
3.3 植物病毒侵染性克隆的应用 | 第18-19页 |
4 植物病毒与寄主互作的分子机制及其研究方法 | 第19-22页 |
4.1 植物病毒与寄主互作的分子机制 | 第19-20页 |
4.2 植物病毒与寄主互作的研究方法 | 第20-22页 |
5 P3蛋白的功能及研究进展 | 第22-25页 |
5.1 P3蛋白的功能 | 第22-24页 |
5.2 P3N-PIPO蛋白的功能 | 第24页 |
5.3 P3蛋白与寄主互作的研究 | 第24-25页 |
6 SWEET蛋白研究概况 | 第25-28页 |
6.1 SWEET蛋白概述 | 第25-26页 |
6.2 SWEET蛋白的功能 | 第26-28页 |
7 本研究的目的与意义 | 第28-30页 |
第二章 芜菁花叶病毒的分子变异 | 第30-58页 |
1 材料 | 第30-32页 |
1.1 病毒样品的采集 | 第30页 |
1.2 菌株和载体 | 第30页 |
1.3 生化及分子生物学试剂 | 第30-31页 |
1.4 主要试剂及配制 | 第31-32页 |
1.5 主要实验仪器 | 第32页 |
2 方法 | 第32-44页 |
2.1 TuMV全基因组测序 | 第32-41页 |
2.2 TuMV全基因组及cp基因序列分析 | 第41-44页 |
3 结果与分析 | 第44-56页 |
3.1 三个Tu MV分离物全基因组扩增结果 | 第44-46页 |
3.2 TuMV全基因组序列分析 | 第46-53页 |
3.3 cp基因序列分析 | 第53-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
第三章 芜菁花叶病毒侵染性克隆的构建 | 第58-80页 |
1 材料 | 第58-60页 |
1.1 病毒样品的采集 | 第58页 |
1.2 菌株和载体 | 第58页 |
1.3 生化及分子生物学试剂 | 第58-59页 |
1.4 主要试剂及配制 | 第59页 |
1.5 主要实验仪器 | 第59-60页 |
2 方法 | 第60-74页 |
2.1 TuMV侵染性克隆cDNA扩增及克隆 | 第60-68页 |
2.2 pCambia0390载体的改造 | 第68-70页 |
2.3 TuMV LWLB分离物侵染性克隆载体的构建 | 第70-72页 |
2.4 pTu MV侵染性克隆侵染性的验证 | 第72-74页 |
3 结果与分析 | 第74-79页 |
3.1 PCR扩增各段 | 第74-75页 |
3.2 cDNA克隆三段连接p MD18-T克隆载体鉴定 | 第75页 |
3.3 pCambia0390突变载体鉴定 | 第75页 |
3.4 侵染性克隆全长cDNA鉴定 | 第75-78页 |
3.5 侵染性克隆侵染活性的验证 | 第78-79页 |
4 讨论 | 第79-80页 |
第四章 P3蛋白在病毒与寄主互作中的功能 | 第80-92页 |
1 材料 | 第80-82页 |
1.1 样品、菌株和载体 | 第80-81页 |
1.2 生化及分子生物学试剂 | 第81页 |
1.3 主要试剂及配制 | 第81-82页 |
1.4 主要实验仪器 | 第82页 |
2 方法 | 第82-86页 |
2.1 突变引物的设计 | 第82-84页 |
2.2 诱饵载体p3基因的突变 | 第84页 |
2.3 突变后的诱饵蛋白与AtSWEET1蛋白的互作 | 第84-85页 |
2.4 农杆菌侵染及双分子荧光互补观察 | 第85页 |
2.5 AtSWEET4及AtSWEET15猎物载体的构建 | 第85-86页 |
2.6 P3与At SWEET4和AtSWEET15互作的验证 | 第86页 |
2.7 pGR-TuMV-GFP侵染性克隆p3基因的突变 | 第86页 |
3 结果与分析 | 第86-90页 |
3.1 突变后的p3基因诱饵载体质粒PCR验证 | 第86-87页 |
3.2 突变后的P3蛋白与At SWEET1蛋白的互作 | 第87页 |
3.3 BiFC验证P3与AtSWEET1在本氏烟中的互作 | 第87-88页 |
3.4 P3与At SWEET4和AtSWEET15互作的验证 | 第88-89页 |
3.5 pGR-TuMV-GFP侵染性克隆含p3片段区域突变 | 第89-90页 |
4 讨论 | 第90-92页 |
结论 | 第92-93页 |
讨论 | 第93-94页 |
本研究存在的问题和展望 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-110页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第110-111页 |
致谢 | 第111页 |