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芜菁花叶病毒的分子变异及其P3蛋白在病毒与寄主互作中的功能研究

中文摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 前言第12-30页
    1 芜菁花叶病毒(TuMV)概述第12-15页
        1.1 芜菁花叶病毒的生物学特性第12-13页
        1.2 芜菁花叶病毒的分子生物学特性第13-15页
    2 植物RNA病毒的分子变异第15-17页
        2.1 分子变异机制第15-17页
        2.2 芜菁花叶病毒分子变异的研究进展第17页
    3 植物病毒侵染性克隆第17-19页
        3.1 植物病毒侵染性克隆的类型第18页
        3.2 影响病毒全基因组cDNA侵染活性的因素第18页
        3.3 植物病毒侵染性克隆的应用第18-19页
    4 植物病毒与寄主互作的分子机制及其研究方法第19-22页
        4.1 植物病毒与寄主互作的分子机制第19-20页
        4.2 植物病毒与寄主互作的研究方法第20-22页
    5 P3蛋白的功能及研究进展第22-25页
        5.1 P3蛋白的功能第22-24页
        5.2 P3N-PIPO蛋白的功能第24页
        5.3 P3蛋白与寄主互作的研究第24-25页
    6 SWEET蛋白研究概况第25-28页
        6.1 SWEET蛋白概述第25-26页
        6.2 SWEET蛋白的功能第26-28页
    7 本研究的目的与意义第28-30页
第二章 芜菁花叶病毒的分子变异第30-58页
    1 材料第30-32页
        1.1 病毒样品的采集第30页
        1.2 菌株和载体第30页
        1.3 生化及分子生物学试剂第30-31页
        1.4 主要试剂及配制第31-32页
        1.5 主要实验仪器第32页
    2 方法第32-44页
        2.1 TuMV全基因组测序第32-41页
        2.2 TuMV全基因组及cp基因序列分析第41-44页
    3 结果与分析第44-56页
        3.1 三个Tu MV分离物全基因组扩增结果第44-46页
        3.2 TuMV全基因组序列分析第46-53页
        3.3 cp基因序列分析第53-56页
    4 讨论第56-58页
第三章 芜菁花叶病毒侵染性克隆的构建第58-80页
    1 材料第58-60页
        1.1 病毒样品的采集第58页
        1.2 菌株和载体第58页
        1.3 生化及分子生物学试剂第58-59页
        1.4 主要试剂及配制第59页
        1.5 主要实验仪器第59-60页
    2 方法第60-74页
        2.1 TuMV侵染性克隆cDNA扩增及克隆第60-68页
        2.2 pCambia0390载体的改造第68-70页
        2.3 TuMV LWLB分离物侵染性克隆载体的构建第70-72页
        2.4 pTu MV侵染性克隆侵染性的验证第72-74页
    3 结果与分析第74-79页
        3.1 PCR扩增各段第74-75页
        3.2 cDNA克隆三段连接p MD18-T克隆载体鉴定第75页
        3.3 pCambia0390突变载体鉴定第75页
        3.4 侵染性克隆全长cDNA鉴定第75-78页
        3.5 侵染性克隆侵染活性的验证第78-79页
    4 讨论第79-80页
第四章 P3蛋白在病毒与寄主互作中的功能第80-92页
    1 材料第80-82页
        1.1 样品、菌株和载体第80-81页
        1.2 生化及分子生物学试剂第81页
        1.3 主要试剂及配制第81-82页
        1.4 主要实验仪器第82页
    2 方法第82-86页
        2.1 突变引物的设计第82-84页
        2.2 诱饵载体p3基因的突变第84页
        2.3 突变后的诱饵蛋白与AtSWEET1蛋白的互作第84-85页
        2.4 农杆菌侵染及双分子荧光互补观察第85页
        2.5 AtSWEET4及AtSWEET15猎物载体的构建第85-86页
        2.6 P3与At SWEET4和AtSWEET15互作的验证第86页
        2.7 pGR-TuMV-GFP侵染性克隆p3基因的突变第86页
    3 结果与分析第86-90页
        3.1 突变后的p3基因诱饵载体质粒PCR验证第86-87页
        3.2 突变后的P3蛋白与At SWEET1蛋白的互作第87页
        3.3 BiFC验证P3与AtSWEET1在本氏烟中的互作第87-88页
        3.4 P3与At SWEET4和AtSWEET15互作的验证第88-89页
        3.5 pGR-TuMV-GFP侵染性克隆含p3片段区域突变第89-90页
    4 讨论第90-92页
结论第92-93页
讨论第93-94页
本研究存在的问题和展望第94-95页
参考文献第95-110页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第110-111页
致谢第111页

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