| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第13-37页 |
| 1 核盘菌简介 | 第13-19页 |
| 1.1 核盘菌命名及生物学分类 | 第13-14页 |
| 1.2 核盘菌的生活史及病害循环 | 第14-19页 |
| 2 Forkhead转录因子研究进展 | 第19-24页 |
| 2.1 Forkhead家族基因的由来及命名 | 第19-20页 |
| 2.2 Forkhead结构域（FHD） | 第20页 |
| 2.3 Forkhead家族转录因子在动物中研究进展 | 第20-22页 |
| 2.4 Forkhead转录因子在真菌中的研究进展 | 第22-24页 |
| 3 重组蛋白的表达系统 | 第24-29页 |
| 3.1 宿主菌（Organism） | 第24-25页 |
| 3.2 复制子（Replicon） | 第25页 |
| 3.3 启动子（Promoter） | 第25-26页 |
| 3.4 筛选标记（Selection marker） | 第26页 |
| 3.5 标签（Tags） | 第26-28页 |
| 3.6 包涵体（Inclusion bodies，IBs） | 第28-29页 |
| 4 酵母双杂交（Yeast Two-hybrid System）研究互作蛋白方法简介 | 第29-35页 |
| 4.1 蛋白、酶和第一个蛋白互作的发现 | 第29-30页 |
| 4.2 酵母双杂交系统筛选互作蛋白 | 第30-35页 |
| 5 本研究的目的及意义 | 第35-37页 |
| 第一章 核盘菌中Forkhead家族转录因子的生物信息学分析及Ss-Fox E2基因的克隆 | 第37-52页 |
| 1 实验材料 | 第37-39页 |
| 1.1 菌株及载体 | 第37页 |
| 1.2 主要试剂 | 第37-38页 |
| 1.3 实验仪器 | 第38页 |
| 1.4 试剂配制 | 第38-39页 |
| 2 实验方法 | 第39-45页 |
| 2.1 核盘菌中Forkhead家族基因的生物信息学分析 | 第39-40页 |
| 2.2 基因Ss-Fox E2的克隆 | 第40-45页 |
| 3 实验结果 | 第45-50页 |
| 3.1 核盘菌中的Forkhead家族基因 | 第45-46页 |
| 3.2 核盘菌中Forkhead家族转录因子与其他物种中同源蛋白氨基酸序列的比对 | 第46-47页 |
| 3.3 核盘菌中Forkhead家族转录因子的系统进化分析 | 第47-48页 |
| 3.4 核盘菌RNA的提取 | 第48-49页 |
| 3.5 Ss-Fox E2反转录PCR | 第49-50页 |
| 3.6 重组质粒的鉴定与测序 | 第50页 |
| 4 小结与讨论 | 第50-52页 |
| 第二章 Ss-Fox E2的表达分析 | 第52-72页 |
| 1 实验材料 | 第52-55页 |
| 1.1 菌株及载体 | 第52页 |
| 1.2 主要试剂 | 第52页 |
| 1.3 实验仪器 | 第52页 |
| 1.4 试剂配制 | 第52-55页 |
| 2 实验方法 | 第55-65页 |
| 2.1 Ss-Fox E2在核盘菌各时期组织中的表达分析 | 第55-58页 |
| 2.2 Ss-Fox E2亚细胞定位分析 | 第58-61页 |
| 2.3 Ss-Fox E2的原核表达 | 第61-65页 |
| 3 实验结果与分析 | 第65-69页 |
| 3.1 核盘菌各时期组织RNA的提取 | 第65页 |
| 3.2 Ss-Fox E2在核盘菌不同时期的表达量分析 | 第65页 |
| 3.3 Ss-Fox E2的亚细胞定位 | 第65-67页 |
| 3.4 Ss-Fox E2在宿主菌中的表达检测 | 第67页 |
| 3.5 表达产物的Western blot分析 | 第67-68页 |
| 3.6 目的蛋白可溶性检测 | 第68-69页 |
| 3.7 目的蛋白的亲和纯化 | 第69页 |
| 4 小结与讨论 | 第69-72页 |
| 第三章 利用酵母双杂交筛选Ss-Fox E2的互作蛋白 | 第72-100页 |
| 1 实验材料 | 第72-74页 |
| 1.1 菌株及载体 | 第72页 |
| 1.2 主要试剂 | 第72页 |
| 1.3 实验仪器 | 第72页 |
| 1.4 试剂配制 | 第72-74页 |
| 2 实验方法 | 第74-86页 |
| 2.1 Ss-Fox E2基因全长诱饵载体构建 | 第74-75页 |
| 2.2 酿酒酵母AH109的小规模转化 | 第75-76页 |
| 2.3 酵母阳性转化子的PCR验证 | 第76-77页 |
| 2.4 Ss-Fox E2基因全长诱饵载体检测 | 第77-78页 |
| 2.5 Ss-Fox E2基因部分序列诱饵载体构建 | 第78-79页 |
| 2.6 Ss-Fox E2基因部分序列诱饵载体检测 | 第79-81页 |
| 2.7 文库构建 | 第81-83页 |
| 2.8 酵母双杂交筛选互作蛋白 | 第83-84页 |
| 2.9 阳性克隆的验证 | 第84-86页 |
| 3 实验结果 | 第86-96页 |
| 3.1 重组质粒p GBKT7::Ss-Fox E2的鉴定 | 第86-87页 |
| 3.2 酵母阳性转化子的PCR验证 | 第87页 |
| 3.3 Ss-Fox E2基因全长表达产物对酵母的毒性检测 | 第87-88页 |
| 3.4 Ss-Fox E2基因全长诱饵载体的自激活检测 | 第88页 |
| 3.5 Ss-Fox E2部分序列诱饵载体构建 | 第88-90页 |
| 3.6 Ss-Fox E2-CD表达产物对酵母毒性检测 | 第90-91页 |
| 3.7 p GBKT7:: Ss-Fox E2-CD自激活检测 | 第91页 |
| 3.8 诱饵蛋白Ss-Fox E2-CD的表达检测 | 第91-92页 |
| 3.9 文库滴度检测 | 第92页 |
| 3.10 文库插入片段的检测 | 第92-93页 |
| 3.11 酵母双杂交阳性克隆的验证 | 第93-94页 |
| 3.12 阳性克隆的序列分析 | 第94-96页 |
| 4 小结与讨论 | 第96-100页 |
| 全文结论 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
