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绵羊妊娠早期骨髓表达ISG15研究和PIBF的研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第12-13页
第一章 文献综述第13-23页
    1.1 引言第13-14页
    1.2 妊娠早期的胚胎识别第14-20页
        1.2.1 胚胎妊娠识别第14-15页
        1.2.2 妊娠识别的分子调控机制第15页
        1.2.3 反刍动物妊娠识别信号--IFN-τ第15页
        1.2.4 反刍动物IFN-τ 的产生第15-17页
        1.2.5 IFN-τ 的子宫内作用第17-19页
        1.2.6 IFN-τ 的子宫外作用第19页
        1.2.7 IFN-τ 诱导产生ISG15第19-20页
        1.2.8 IFN-τ 的抗黄体溶解机制第20页
    1.3 免疫耐受机制的研究进展第20-22页
        1.3.1 孕酮在早期妊娠对机体的免疫耐受作用第20-21页
        1.3.2 孕酮诱导阻断因子介导的妊娠免疫耐受作用第21页
        1.3.3 PIBF通过干扰素信号通路参与子宫内的免疫调节第21页
        1.3.4 孕酮介导其它调节基因参与免疫第21-22页
    1.4 本研究的技术路线和目的、意义第22-23页
        1.4.1 本研究技术路线第22页
        1.4.2 研究目的与意义第22-23页
第二章 ISG15在绵羊骨髓中的表达第23-40页
    2.1 试验材料与方法第23-24页
        2.1.1 试验动物第23页
        2.1.2 主要仪器和设备第23页
        2.1.3 主要试剂和耗材第23-24页
    2.2 试验方法第24-25页
    2.3 样品采集与处理第25-26页
    2.4 实时荧光定量PCR检测基因相对表达水平第26-28页
        2.4.1 实时荧光定量PCR的引物序列第26-27页
        2.4.2 总RNA的提取和RNA浓度及纯度检测第27页
        2.4.3 cDNA的合成第27-28页
        2.4.4 实时荧光定量PCR第28页
        2.4.5 PCR产物凝胶电泳第28页
    2.5 免疫组织化学染色第28-30页
        2.5.1 免疫组织化学染色溶液配制:第28-29页
        2.5.2 免疫组织化学染色方法第29-30页
    2.6 蛋白免疫印迹分析第30-34页
        2.6.1 Western-Blot所用溶液配制第30-32页
        2.6.2 ISG15一抗的制备第32-33页
        2.6.3 提取骨髓总蛋白第33页
        2.6.4 蛋白定量第33页
        2.6.5 SDS-PAGE电泳第33-34页
    2.7 数据分析第34页
    2.8 结果与分析第34-38页
        2.8.1 总RNA提取与PCR扩增电泳第34-35页
        2.8.2 实时荧光定量PCR目的片段扩增产物鉴定第35页
        2.8.3 实时荧光定量PCR结果第35-36页
        2.8.4 免疫组织化学结果第36-37页
        2.8.5 蛋白免疫印迹分析结果第37-38页
    2.9 讨论第38-40页
第三章 PIBF在绵羊骨髓中的表达第40-46页
    3.1 试验材料与方法第40页
        3.1.1 试验动物第40页
        3.1.2 主要仪器和设备第40页
        3.1.3 主要试剂和药品第40页
    3.2 试验方法与步骤第40页
    3.3 样品采集与处理第40页
    3.4 实时荧光定量PCR检测基因相对表达水平第40-41页
        3.4.1 实时荧光定量PCR的引物序列第40-41页
        3.4.2 总RNA的提取和RNA浓度及纯度检测第41页
        3.4.3 cDNA的合成第41页
        3.4.4 实时荧光定量PCR第41页
        3.4.5 PCR产物凝胶电泳第41页
    3.5 蛋白免疫印迹分析第41-42页
        3.5.1 Western-Blot所用溶液配制:第41页
        3.5.2 Trizol法提取骨髓总蛋白第41页
        3.5.3 蛋白定量(BCA)第41-42页
        3.5.4 SDS-PAGE电泳第42页
    3.6 数据分析第42页
    3.7 结果与分析第42-44页
        3.7.1 总RNA提取与PCR扩增电泳第42页
        3.7.2 实时荧光定量PCR目的片段扩增产物鉴定第42页
        3.7.3 实时荧光定量PCR结果第42-43页
        3.7.4 蛋白免疫印迹分析结果第43-44页
    3.8 讨论第44-46页
第四章 全文总结第46-47页
    4.1 本研究的主要结论和创新第46页
    4.2 下一步研究计划第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-55页
作者简介第55页
攻读硕士学位期间的成果第55-56页

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