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蜡状芽孢杆菌X5降解羽毛角蛋白的发酵优化

符号说明第4-10页
摘要第10-12页
Abstract第12-13页
1 引言第14-30页
    1.1 羽毛角蛋白的结构与组成第14-15页
    1.2 羽毛角蛋白的应用第15-18页
        1.2.1 作为畜禽饲料添加剂第15-16页
        1.2.2 其他用途第16-18页
    1.3 羽毛角蛋白的降解方法第18-20页
        1.3.1 高温加压水解法第18页
        1.3.2 化学水解法第18页
        1.3.3 膨化法第18页
        1.3.4 酶解法第18页
        1.3.5 微生物降解法第18-20页
    1.4 微生物降解角蛋白的机制第20-22页
        1.4.1 物理压力理论第20-21页
        1.4.2 氧化还原理论第21页
        1.4.3 硫解作用理论第21页
        1.4.4 复合酶理论第21-22页
    1.5 角蛋白酶的研究进展第22-29页
        1.5.1 角蛋白酶的分类第22-23页
        1.5.2 角蛋白酶的分子量和底物特性第23页
        1.5.3 角蛋白酶稳定性的影响因素第23-24页
        1.5.4 角蛋白酶活性的测定第24-25页
        1.5.5 角蛋白酶的发酵第25-26页
        1.5.6 角蛋白酶的分离、纯化第26-27页
        1.5.7 角蛋白酶的应用第27-29页
    1.6 本研究的目的意义第29-30页
2 材料与方法第30-37页
    2.1 材料第30-31页
        2.1.1 菌株第30页
        2.1.2 培养基第30页
        2.1.3 培养条件第30页
        2.1.4 主要仪器设备第30-31页
    2.2 方法第31-37页
        2.2.1 斜面菌种的制备第31页
        2.2.2 液体种子的制备第31页
        2.2.3 摇瓶发酵第31页
        2.2.4 羽毛发酵前处理第31页
        2.2.5 降解率的测定第31页
        2.2.6 氨基酸标准曲线制作第31-32页
            2.2.6.1 氨基酸标准溶液和茚三酮显色液的制备第31-32页
            2.2.6.2 标准曲线适宜浓度范围的确定第32页
            2.2.6.3 氨基酸标准曲线的制作第32页
        2.2.7 蛋白质标准曲线的制作第32-33页
            2.2.7.1 蛋白质标准溶液和考马斯亮蓝试剂的制备第32页
            2.2.7.2 标准曲线适宜浓度范围的确定第32页
            2.2.7.3 蛋白质标准曲线的制作第32-33页
        2.2.8 10株羽毛降解细菌降解效果比较第33页
        2.2.9 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵培养基的优化第33-34页
            2.2.9.1 不同无机盐对降解效果的影响第33页
            2.2.9.2 无机盐正交试验第33页
            2.2.9.3 Plackett-Burman (PB)试验设计第33-34页
            2.2.9.4 最陡爬坡试验第34页
            2.2.9.5 中心组合试验设计第34页
        2.2.10 优化配方的验证第34页
        2.2.11 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵条件的优化第34-35页
            2.2.11.1 不同种龄对降解效果的影响第34页
            2.2.11.2 不同发酵温度对降解效果的影响第34-35页
            2.2.11.3 不同转速对降解效果的影响第35页
            2.2.11.4 不同发酵时间对降解效果的影响第35页
            2.2.11.5 不同发酵液初始pH对羽毛降解率的影响第35页
        2.2.12 发酵液中的氨基酸与蛋白质分析第35-36页
            2.2.12.1 发酵液中氨基酸含量测定第35页
            2.2.12.2 发酵液中氨基酸种类测定第35页
            2.2.12.3 发酵液中蛋白质含量测定第35-36页
        2.2.13 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵罐发酵第36-37页
3 结果与分析第37-59页
    3.1 谷氨酸标准曲线第37页
    3.2 蛋白质标准曲线第37-38页
    3.3 10株降解细菌对羽毛角蛋白的降解效果第38-40页
        3.3.1 降解率的比较第38-39页
        3.3.2 发酵液中氨基酸含量的比较第39-40页
        3.3.3 发酵液中蛋白质含量的比较第40页
    3.4 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵培养基的优化结果第40-50页
        3.4.1 不同无机盐对降解效果的影响第40-45页
            3.4.1.1 不同浓度的KH_2PO_4对降解效果的影响第41页
            3.4.1.2 不同浓度的K_2HPO_4对降解效果的影响第41-42页
            3.4.1.3 不同浓度的Ca_3(PO_4)_2对降解效果的影响第42-43页
            3.4.1.4 不同浓度的(NH_4)_2SO_4对降解效果的影响第43页
            3.4.1.5 不同浓度的CaCO_3对降解效果的影响第43-44页
            3.4.1.6 不同浓度的NaCl对降解效果的影响第44页
            3.4.1.7 不同浓度的MgSO_4对降解效果的影响第44-45页
        3.4.2 发酵培养基无机盐正交优化试验结果第45-46页
        3.4.3 Plackett-Burman试验结果第46-47页
        3.4.4 最陡爬坡试验结果第47页
        3.4.5 中心组合试验结果第47-50页
    3.5 发酵培养基优化结果的验证第50页
    3.6 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵条件的优化结果第50-54页
        3.6.1 不同种龄对羽毛降解率的影响第50-51页
        3.6.2 不同发酵温度对降解效果的影响第51-52页
        3.6.3 不同转速对降解效果的影响第52-53页
        3.6.4 不同发酵时间对降解效果的影响第53-54页
        3.6.6 不同发酵液初始pH对降解效果的影响第54页
    3.7 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵液中氨基酸与蛋白质分析第54-56页
        3.7.1 发酵液氨基酸的含量第54-55页
        3.7.2 发酵液中氨基酸的种类第55页
        3.7.3 发酵液中蛋白质的含量第55-56页
    3.8 X5菌株降解羽毛角蛋白的发酵罐发酵第56-59页
        3.8.1 发酵过程pH的变化第56页
        3.8.2 发酵过程DO的变化第56-57页
        3.8.3 不同发酵时间的降解率第57-59页
4 讨论第59-65页
    4.1 羽毛角蛋白降解细菌的筛选第59页
    4.2 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵培养基和发酵条件的优化第59-62页
    4.3 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵液中氨基酸及蛋白质含量分析第62-64页
        4.3.1 发酵液中氨基酸种类及含量测定第62-63页
        4.3.2 发酵液中蛋白质的含量测定第63-64页
    4.4 羽毛粉发酵罐发酵第64页
    4.5 下一步研究设想第64-65页
5 结论第65-66页
    5.1 10株降解细菌对羽毛角蛋白的降解第65页
    5.2 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵培养基和发酵条件的优化第65页
    5.3 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵液中成分分析第65页
    5.4 X5菌株降解羽毛粉发酵罐发酵第65-66页
参考文献第66-76页
附录 SAS分析程序第76-78页
    1. 标准曲线的一元线性回归方程显著性检验的SAS程序第76页
    2. 正交试验试验SAS分析的源程序第76-77页
    3. 响应面分析CCD试验设计SAS分析的源程序第77-78页
致谢第78-79页
攻读硕士学位期间发表论文第79页

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