符号说明 | 第4-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
1 引言 | 第14-30页 |
1.1 羽毛角蛋白的结构与组成 | 第14-15页 |
1.2 羽毛角蛋白的应用 | 第15-18页 |
1.2.1 作为畜禽饲料添加剂 | 第15-16页 |
1.2.2 其他用途 | 第16-18页 |
1.3 羽毛角蛋白的降解方法 | 第18-20页 |
1.3.1 高温加压水解法 | 第18页 |
1.3.2 化学水解法 | 第18页 |
1.3.3 膨化法 | 第18页 |
1.3.4 酶解法 | 第18页 |
1.3.5 微生物降解法 | 第18-20页 |
1.4 微生物降解角蛋白的机制 | 第20-22页 |
1.4.1 物理压力理论 | 第20-21页 |
1.4.2 氧化还原理论 | 第21页 |
1.4.3 硫解作用理论 | 第21页 |
1.4.4 复合酶理论 | 第21-22页 |
1.5 角蛋白酶的研究进展 | 第22-29页 |
1.5.1 角蛋白酶的分类 | 第22-23页 |
1.5.2 角蛋白酶的分子量和底物特性 | 第23页 |
1.5.3 角蛋白酶稳定性的影响因素 | 第23-24页 |
1.5.4 角蛋白酶活性的测定 | 第24-25页 |
1.5.5 角蛋白酶的发酵 | 第25-26页 |
1.5.6 角蛋白酶的分离、纯化 | 第26-27页 |
1.5.7 角蛋白酶的应用 | 第27-29页 |
1.6 本研究的目的意义 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-37页 |
2.1 材料 | 第30-31页 |
2.1.1 菌株 | 第30页 |
2.1.2 培养基 | 第30页 |
2.1.3 培养条件 | 第30页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第30-31页 |
2.2 方法 | 第31-37页 |
2.2.1 斜面菌种的制备 | 第31页 |
2.2.2 液体种子的制备 | 第31页 |
2.2.3 摇瓶发酵 | 第31页 |
2.2.4 羽毛发酵前处理 | 第31页 |
2.2.5 降解率的测定 | 第31页 |
2.2.6 氨基酸标准曲线制作 | 第31-32页 |
2.2.6.1 氨基酸标准溶液和茚三酮显色液的制备 | 第31-32页 |
2.2.6.2 标准曲线适宜浓度范围的确定 | 第32页 |
2.2.6.3 氨基酸标准曲线的制作 | 第32页 |
2.2.7 蛋白质标准曲线的制作 | 第32-33页 |
2.2.7.1 蛋白质标准溶液和考马斯亮蓝试剂的制备 | 第32页 |
2.2.7.2 标准曲线适宜浓度范围的确定 | 第32页 |
2.2.7.3 蛋白质标准曲线的制作 | 第32-33页 |
2.2.8 10株羽毛降解细菌降解效果比较 | 第33页 |
2.2.9 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵培养基的优化 | 第33-34页 |
2.2.9.1 不同无机盐对降解效果的影响 | 第33页 |
2.2.9.2 无机盐正交试验 | 第33页 |
2.2.9.3 Plackett-Burman (PB)试验设计 | 第33-34页 |
2.2.9.4 最陡爬坡试验 | 第34页 |
2.2.9.5 中心组合试验设计 | 第34页 |
2.2.10 优化配方的验证 | 第34页 |
2.2.11 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵条件的优化 | 第34-35页 |
2.2.11.1 不同种龄对降解效果的影响 | 第34页 |
2.2.11.2 不同发酵温度对降解效果的影响 | 第34-35页 |
2.2.11.3 不同转速对降解效果的影响 | 第35页 |
2.2.11.4 不同发酵时间对降解效果的影响 | 第35页 |
2.2.11.5 不同发酵液初始pH对羽毛降解率的影响 | 第35页 |
2.2.12 发酵液中的氨基酸与蛋白质分析 | 第35-36页 |
2.2.12.1 发酵液中氨基酸含量测定 | 第35页 |
2.2.12.2 发酵液中氨基酸种类测定 | 第35页 |
2.2.12.3 发酵液中蛋白质含量测定 | 第35-36页 |
2.2.13 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵罐发酵 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-59页 |
3.1 谷氨酸标准曲线 | 第37页 |
3.2 蛋白质标准曲线 | 第37-38页 |
3.3 10株降解细菌对羽毛角蛋白的降解效果 | 第38-40页 |
3.3.1 降解率的比较 | 第38-39页 |
3.3.2 发酵液中氨基酸含量的比较 | 第39-40页 |
3.3.3 发酵液中蛋白质含量的比较 | 第40页 |
3.4 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵培养基的优化结果 | 第40-50页 |
3.4.1 不同无机盐对降解效果的影响 | 第40-45页 |
3.4.1.1 不同浓度的KH_2PO_4对降解效果的影响 | 第41页 |
3.4.1.2 不同浓度的K_2HPO_4对降解效果的影响 | 第41-42页 |
3.4.1.3 不同浓度的Ca_3(PO_4)_2对降解效果的影响 | 第42-43页 |
3.4.1.4 不同浓度的(NH_4)_2SO_4对降解效果的影响 | 第43页 |
3.4.1.5 不同浓度的CaCO_3对降解效果的影响 | 第43-44页 |
3.4.1.6 不同浓度的NaCl对降解效果的影响 | 第44页 |
3.4.1.7 不同浓度的MgSO_4对降解效果的影响 | 第44-45页 |
3.4.2 发酵培养基无机盐正交优化试验结果 | 第45-46页 |
3.4.3 Plackett-Burman试验结果 | 第46-47页 |
3.4.4 最陡爬坡试验结果 | 第47页 |
3.4.5 中心组合试验结果 | 第47-50页 |
3.5 发酵培养基优化结果的验证 | 第50页 |
3.6 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵条件的优化结果 | 第50-54页 |
3.6.1 不同种龄对羽毛降解率的影响 | 第50-51页 |
3.6.2 不同发酵温度对降解效果的影响 | 第51-52页 |
3.6.3 不同转速对降解效果的影响 | 第52-53页 |
3.6.4 不同发酵时间对降解效果的影响 | 第53-54页 |
3.6.6 不同发酵液初始pH对降解效果的影响 | 第54页 |
3.7 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵液中氨基酸与蛋白质分析 | 第54-56页 |
3.7.1 发酵液氨基酸的含量 | 第54-55页 |
3.7.2 发酵液中氨基酸的种类 | 第55页 |
3.7.3 发酵液中蛋白质的含量 | 第55-56页 |
3.8 X5菌株降解羽毛角蛋白的发酵罐发酵 | 第56-59页 |
3.8.1 发酵过程pH的变化 | 第56页 |
3.8.2 发酵过程DO的变化 | 第56-57页 |
3.8.3 不同发酵时间的降解率 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-65页 |
4.1 羽毛角蛋白降解细菌的筛选 | 第59页 |
4.2 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵培养基和发酵条件的优化 | 第59-62页 |
4.3 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵液中氨基酸及蛋白质含量分析 | 第62-64页 |
4.3.1 发酵液中氨基酸种类及含量测定 | 第62-63页 |
4.3.2 发酵液中蛋白质的含量测定 | 第63-64页 |
4.4 羽毛粉发酵罐发酵 | 第64页 |
4.5 下一步研究设想 | 第64-65页 |
5 结论 | 第65-66页 |
5.1 10株降解细菌对羽毛角蛋白的降解 | 第65页 |
5.2 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵培养基和发酵条件的优化 | 第65页 |
5.3 X5菌株降解羽毛角蛋白发酵液中成分分析 | 第65页 |
5.4 X5菌株降解羽毛粉发酵罐发酵 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-76页 |
附录 SAS分析程序 | 第76-78页 |
1. 标准曲线的一元线性回归方程显著性检验的SAS程序 | 第76页 |
2. 正交试验试验SAS分析的源程序 | 第76-77页 |
3. 响应面分析CCD试验设计SAS分析的源程序 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第79页 |