| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第10-22页 |
| 1.1 研究意义与背景 | 第10-11页 |
| 1.2 胰岛素概述 | 第11-13页 |
| 1.2.1 人胰岛素的结构 | 第11-12页 |
| 1.2.2 人胰岛素的理化性质 | 第12页 |
| 1.2.3 胰岛素的生理作用 | 第12-13页 |
| 1.3 胰岛素的分类 | 第13-16页 |
| 1.3.1 速效胰岛素 | 第13-14页 |
| 1.3.2 中效胰岛素 | 第14-15页 |
| 1.3.3 长效胰岛素 | 第15-16页 |
| 1.4 门冬胰岛素综述 | 第16-19页 |
| 1.4.1 门冬胰岛素与人胰岛素在治疗糖尿病方面的比较 | 第16-18页 |
| 1.4.2 门冬胰岛素下游纯化工艺 | 第18-19页 |
| 1.5 反相高效制备液相色谱法对于蛋白质纯化的应用 | 第19-20页 |
| 1.6 研究目的 | 第20页 |
| 1.7 研究内容与技术路线 | 第20-22页 |
| 2 门冬胰岛素前体的纯化与酶切 | 第22-30页 |
| 2.1 引言 | 第22-23页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第23-24页 |
| 2.2.1 实验所用试剂与材料 | 第23-24页 |
| 2.2.2 实验所用仪器 | 第24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.3.1 亲和层析柱纯化胰岛素前体蛋白 | 第24-25页 |
| 2.3.2 强阳离子色谱纯化 | 第25页 |
| 2.3.3 胰蛋白酶酶切与Lys-C酶酶切对比 | 第25页 |
| 2.3.4 RP-HPLC检测门冬胰岛素前体纯化及酶切结果 | 第25页 |
| 2.3.5 酶切后处理 | 第25-26页 |
| 2.4 实验结果 | 第26-28页 |
| 2.4.1 亲和层析纯化结果 | 第26页 |
| 2.4.2 强阳离子柱纯化结果 | 第26页 |
| 2.4.3 门冬胰岛素前体酶切结果 | 第26-28页 |
| 2.5 讨论 | 第28-30页 |
| 3 门冬胰岛素的转肽研究 | 第30-42页 |
| 3.1 引言 | 第30-32页 |
| 3.2 实验所用材料 | 第32页 |
| 3.3 实验方法 | 第32-34页 |
| 3.3.1 苏氨酸叔丁酯转肽研究 | 第32-33页 |
| 3.3.2 苏氨酸甲酯转肽研究 | 第33页 |
| 3.3.3 转肽反应的中式放大研究 | 第33-34页 |
| 3.3.4 RP-HPLC检测门冬胰岛素转肽结果 | 第34页 |
| 3.3.5 转肽后处理 | 第34页 |
| 3.4 实验结果 | 第34-39页 |
| 3.4.1 苏氨酸叔丁酯转肽结果 | 第34-36页 |
| 3.4.2 苏氨酸甲酯转肽研究结果 | 第36-39页 |
| 3.4.3 转肽反应的中式放大 | 第39页 |
| 3.5 讨论 | 第39-42页 |
| 4 转肽后纯化及门冬胰岛素酯的脱保护 | 第42-53页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42-46页 |
| 4.3.1 转肽后纯化 | 第42-45页 |
| 4.3.2 门冬胰岛素酯的脱保护 | 第45页 |
| 4.3.3 脱保护后纯化 | 第45-46页 |
| 4.4 实验结果 | 第46-51页 |
| 4.4.1 转肽后纯化 | 第46-48页 |
| 4.4.2 门冬胰岛素酯的脱保护 | 第48-51页 |
| 4.4.3 脱保护后纯化 | 第51页 |
| 4.5 讨论 | 第51-53页 |
| 5 门冬胰岛素的结晶 | 第53-63页 |
| 5.1 引言 | 第53-55页 |
| 5.2 实验材料与仪器 | 第55-56页 |
| 5.2.1 实验所用试剂 | 第55页 |
| 5.2.2 实验所用仪器 | 第55-56页 |
| 5.3 实验方法 | 第56-57页 |
| 5.3.1 结晶体系的建立 | 第56页 |
| 5.3.2 门冬胰岛素结晶条件的优化 | 第56-57页 |
| 5.3.3 结晶后样品洗涤与处理 | 第57页 |
| 5.4 实验结果 | 第57-62页 |
| 5.4.1 结晶体系的建立的实验结果 | 第57-59页 |
| 5.4.2 结晶体系优化的实验结果 | 第59-62页 |
| 5.5 讨论 | 第62-63页 |
| 6 结论与展望 | 第63-65页 |
| 6.1 结论 | 第63页 |
| 6.2 创新点 | 第63页 |
| 6.3 展望 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
