摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第13-21页 |
1.1 SMSCs概述 | 第13-14页 |
1.2 原代SMSCs的分离方法 | 第14-15页 |
1.3 SMSCs的纯化 | 第15-17页 |
1.4 SMSCs的鉴定 | 第17-18页 |
1.4.1 形态学鉴定 | 第17页 |
1.4.2 标志基因的鉴定 | 第17-18页 |
1.5 p38 MAPK信号通路的特征及功能 | 第18-20页 |
1.6 骨骼肌细胞中实时荧光定量PCR内参基因的筛选 | 第20-21页 |
1.7 本研究的目的与意义 | 第21页 |
2 材料与方法 | 第21-31页 |
2.1 试验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 试验动物及样品 | 第21-22页 |
2.1.2 主要耗材及常规器皿 | 第22页 |
2.1.3 主要试剂及配制 | 第22-23页 |
2.2 试验方法 | 第23-25页 |
2.2.1 山羊SMSCs的分离 | 第23页 |
2.2.2 山羊SMSCs的纯化 | 第23-24页 |
2.2.3 山羊SMSCs的鉴定 | 第24-25页 |
2.2.3.1 SMSCs的形态学鉴定 | 第24页 |
2.2.3.2 SMSCs的免疫荧光染色 | 第24-25页 |
2.3 山羊SMSCs的冻存和复苏 | 第25页 |
2.3.1 SMSCs的冻存 | 第25页 |
2.3.2 SMSCs的复苏 | 第25页 |
2.4 山羊SMSCs的HE染色 | 第25-26页 |
2.5 山羊SMSCs增殖及融合率的检测 | 第26-27页 |
2.5.1 血球计数板统计SMSCs的数目 | 第26页 |
2.5.2 CCK-8试剂盒检测细胞的增殖 | 第26-27页 |
2.5.3 SMSCs融合率的评估 | 第27页 |
2.6 荧光定量PCR | 第27-30页 |
2.6.1 SMSCs总RNA的提取及cDNA的合成 | 第27-28页 |
2.6.2 山羊SMSCs内参基因的筛选 | 第28-29页 |
2.6.3 山羊SMSCs中基因mRNA表达量的检测 | 第29-30页 |
2.6.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)反应 | 第30页 |
2.8 统计方法 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-43页 |
3.1 山羊原代SMSCs的分离纯化 | 第31页 |
3.2 山羊SMSCs的鉴定 | 第31-33页 |
3.2.1 山羊SMSCs的形态学特征 | 第31-32页 |
3.2.2 山羊SMSCs的PAX-7免疫荧光染色鉴定 | 第32-33页 |
3.3 南江黄羊和波尔山羊SMSCs增殖能力的比较 | 第33-36页 |
3.3.1 南江黄羊和波尔山羊SMSCs生长过程中细胞数目的比较 | 第33-34页 |
3.3.2 南江黄羊和波尔山羊SMSCs吸光度(OD值)的比较 | 第34-36页 |
3.4 南江黄羊和波尔山羊SMSCs融合率的比较 | 第36-37页 |
3.5 南江黄羊和波尔山羊SMSCs中各基因mRNA的表达 | 第37-43页 |
3.5.1 山羊SMSCs中内参基因的表达 | 第37-39页 |
3.5.2 南江黄羊和波尔山羊SMSCs标志基因的表达 | 第39-40页 |
3.5.3 p38MAPK信号通路基因在南江黄羊和波尔山羊SMSCs中的表达 | 第40-41页 |
3.5.4 p38MAPK信号通路基因在南江黄羊和波尔山羊SMSCs中表达量的比较 | 第41-43页 |
3.5.5 p38MAPK信号通路基因表达量的相关性分析 | 第43页 |
4 讨论 | 第43-49页 |
4.1 山羊高纯度SMSCs的获得 | 第43-44页 |
4.2 山羊SMSCs中稳定表达的内参基因 | 第44-46页 |
4.3 南江黄羊和波尔山羊SMSCs增殖分化能力的差异 | 第46-49页 |
4.3.1 南江黄羊SMSCs更高的增殖和融合能力 | 第46-47页 |
4.3.2 南江黄羊和波尔山羊SMSCs增殖和融合能力差异可能的分子机制 | 第47-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第58页 |