致谢 | 第9-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-14页 |
前言 | 第15-17页 |
第1章 文献综述 | 第17-26页 |
1.1 引言 | 第17页 |
1.2 Serpin的分类和结构 | 第17-19页 |
1.3 Serpin的作用机制 | 第19-20页 |
1.4 Serpin在昆虫中的功能 | 第20-23页 |
1.5 蝶蛹金小蜂毒液的研究进展 | 第23-26页 |
第2章 蝶蛹金小蜂蛋白酶抑制剂PpSPN4的基因克隆与表达模式分析 | 第26-51页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 材料 | 第26-27页 |
2.2.1 供试昆虫 | 第26-27页 |
2.2.2 试剂和仪器 | 第27页 |
2.3 方法 | 第27-40页 |
2.3.1 雌蜂各组织RNA的提取 | 第27-28页 |
2.3.2 雌蜂全蜂总RNA的提取 | 第28页 |
2.3.3 cDNA反转录 | 第28-29页 |
2.3.4 转录组数据分析 | 第29页 |
2.3.5 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR) | 第29-31页 |
2.3.6 PpSPN4全长的克隆 | 第31-34页 |
2.3.7 PpSPN4的原核表达 | 第34-38页 |
2.3.8 SDS-PAGE蛋白电泳 | 第38页 |
2.3.9 Western Blot | 第38-39页 |
2.3.10 组织表达分布 | 第39页 |
2.3.11 时间表达分布 | 第39-40页 |
2.3.12 数据分析 | 第40页 |
2.4 结果 | 第40-49页 |
2.4.1 蝶蛹金小蜂PpSPN4序列分析 | 第40-46页 |
2.4.2 PpSPN4在大肠杆菌中的表达 | 第46-47页 |
2.4.3 PpSPN4在蝶蛹金小蜂雌蜂各组织表达分布 | 第47-48页 |
2.4.4 PpSPN4在蝶蛹金小蜂毒液和毒腺中表达时相 | 第48-49页 |
2.5 讨论 | 第49-51页 |
第3章 蝶蛹金小蜂蛋白酶抑制剂PpSPN6的基因克隆与表达模式分析 | 第51-66页 |
3.1 引言 | 第51页 |
3.2 材料 | 第51页 |
3.3 方法 | 第51-57页 |
3.3.1 雌蜂各组织RNA的提取 | 第51页 |
3.3.2 雌蜂全蜂总RNA的提取 | 第51页 |
3.3.3 cDNA反转录 | 第51页 |
3.3.4 转录组数据分析 | 第51-52页 |
3.3.5 半定量PCR(Semi-quantitative interpretation) | 第52-53页 |
3.3.6 PpSPN6的全长克隆 | 第53-55页 |
3.3.7 PpSPN6的原核表达 | 第55-56页 |
3.3.8 SDS-PAGE蛋白电泳 | 第56页 |
3.3.9 Western Blot | 第56页 |
3.3.10 组织表达分布 | 第56页 |
3.3.11 时间表达分布 | 第56-57页 |
3.4 结果 | 第57-64页 |
3.4.1 蝶蛹金小蜂PpSPN6序列分析 | 第57-61页 |
3.4.2 PpSPN6在大肠杆菌中的表达 | 第61-62页 |
3.4.3 PpSPN6在蝶蛹金小蜂雌蜂各组织表达分布 | 第62-63页 |
3.4.4 PpSPN6在蝶蛹金小蜂毒液和毒腺中表达时相 | 第63-64页 |
3.5 讨论 | 第64-66页 |
总结 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
附录 | 第76页 |