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水稻蛋白磷酸酶2C基因OsBIPP2C1和OsBIPP2C2的克隆鉴定与功能分析

摘要第7-10页
ABSTRACT第10页
主要缩写词第14-15页
第一章 文献综述与研究背景第15-53页
    摘要第7-17页
    1.1 植物抗病信号传导第17-23页
        1.1.1 植物与病原物相互作用的一般概念第17-18页
        1.1.2 植物R基因产物及其介导的抗病信号传递第18-21页
            1.1.2.1 植物R基因编码的蛋白结构特征第18-19页
            1.1.2.2 R基因与avr基因的识别第19-20页
            1.1.2.3 植物R基因介导的信号传递第20-21页
        1.1.3 SAR信号传递第21-22页
        1.1.4 茉莉酸酯、乙烯介导的信号途径第22-23页
        1.1.5 信号途径之间的交流第23页
    1.2 高等植物的蛋白磷酸酶2C第23-35页
        1.2.1 蛋白可逆磷酸化在生物信号传递中的作用第23-24页
        1.2.2 蛋白磷酸酶的分类第24-25页
        1.2.3 PP2C的理化性质第25页
        1.2.4 PP2C基因及其蛋白结构特征第25-26页
        1.2.5 PP2C的进化第26页
        1.2.6 PP2C在高等植物中的功能与作用第26-34页
            1.2.6.1 PP2C参与脱落酸(ABA)信号途径第26-30页
                1.2.6.1.1 PP2C参与ABA调控的种子休眠/萌发信号途径第27-28页
                1.2.6.1.2 PP2C参与ABA调控的离子通道与保卫细胞信号传导途径第28-29页
                1.2.6.1.3 PP2C参与ABA调控的抗逆信号途径第29-30页
            1.2.6.2 PP2C参与植物创伤信号途径第30-31页
            1.2.6.3 PP2C参与植物发育生长第31-33页
            1.2.6.4 PP2C参与根瘤共生形成第33页
            1.2.6.5 PP2C参与植物抗病反应第33-34页
                1.2.6.5.1 PP2C作为转录因子作用第33-34页
                1.2.6.5.2 PP2C在植物细胞壁修饰中的作用第34页
        1.2.7 PP2C在植物体内的作用受体第34-35页
            1.2.7.1 PP2C与激酶的相互作用第34页
            1.2.7.2 PP2C与转录因子相互作用第34-35页
            1.2.7.3 PP2C与其他蛋白的作用第35页
            1.2.7.4 PP2C与DNA的结合第35页
        1.2.8 植物PP2C研究的展望第35页
    1.3 其他蛋白磷酸酶参与抗病信号途径第35-37页
        1.3.1 蛋白磷酸酶参与调节PR基因诱导的信号传导第36页
        1.3.2 蛋白磷酸酶参与调节激发子诱导的信号传导第36页
        1.3.3 蛋白磷酸酶参与细胞程序化死亡(PCD)第36-37页
        1.3.4 蛋白磷酸酶参与离子通道的调控第37页
        1.3.5 蛋白磷酸酶参与的其他抗病反应第37页
    1.4 本研究的目标第37-41页
    参考文献第41-53页
第二章 水稻OsBIPP2C1基因的克隆鉴定以及在生物与非生物胁迫中的差别表达第53-81页
    摘要第7-55页
    2.1 前言第55-56页
    2.2 材料与方法第56-59页
        2.2.1 水稻的BTH处理和稻瘟病接种第56页
        2.2.2 水稻ABA及各种逆境处理第56-57页
        2.2.3 水稻OsBIPP2C1基因cDNA序列的克隆第57-58页
        2.2.4 水稻OsBIPP2C1基因cDNA序列的测序及序列分析第58页
        2.2.5 水稻总RNA的提取第58页
        2.2.6 Northern杂交第58-59页
    2.3 结果与分析第59-62页
        2.3.1 OsBIPP2C1基因编码一个新的水稻PP2C蛋白第59-60页
        2.3.2 OsBIPP2C1符合经典GT-AG内含子剪接方式并以单拷贝形式存在存在于水稻第3号染色体上第60页
        2.3.3 OsBIPP2C1参与BTH诱导的水稻抗病反应第60-61页
        2.3.4 OsBIPP2C1不参与水稻与稻瘟病之间的亲和或非亲和互作反应第61页
        2.3.5 OsBIPP2C1表达依不同组织而呈现差异第61页
        2.3.6 水稻OsBIPP2C1受外源H_2O_2和Ca~(2+)处理的诱导但不为SA激发第61-62页
        2.3.7 OsBIPP2C1受到各种逆境因子的激发第62页
        2.3.8 OsBIPP2C1在ABA处理下的表达模式第62页
    2.4 讨论第62-81页
第三章 过量表达水稻蛋白磷酸酶2C基因OsBIPP2C1转基因烟草的表型分析第81-102页
    摘要第7-83页
    3.1 前言第83页
    3.2 试验材料与方法第83-86页
        3.2.1 OsBIPP2C1基因植物表达载体的构建和农杆菌转化第83页
        3.2.2 根癌农杆菌介导pCHF3-CaMV35S-OsBIPP2C1转化烟草第83-84页
        3.2.3 烟草基因组DNA提取第84页
        3.2.4 烟草RNA的提取第84页
        3.2.5 转基因烟苗的PCR检测第84页
        3.2.6 烟草Northern杂交检测OsBIPP2C1表达量第84页
        3.2.7 烟草Southern杂交第84-85页
        3.2.8 Northern杂交检测转OsBIPP2C1基因烟草PR-1基因表达第85页
        3.2.9 转基因烟草种子萌发以及ABA处理和抗旱耐盐生理测试第85页
        3.2.10 转基因烟草植株的抗病性测定第85-86页
    3.3 试验结果第86-88页
        3.3.1 OsBIPP2C1转基因烟草载体构建第86页
        3.3.2 OsBIPP2C1转基因烟草株的获得第86页
        3.3.3 转基因烟草植株的分子鉴定第86-87页
        3.3.4 转OsBIPP2C1基因烟草株系T1代植株的生长状况第87页
        3.3.5 转基因烟草株系T1代对ABA和逆境的反应第87页
        3.3.6 转基因植株中PR基因的表达第87-88页
        3.3.7 转基因烟草植株的抗病性第88页
    3.4 讨论第88-101页
    参考文献第101-102页
第四章 水稻OsBIPP2C2基因CDNA的克隆鉴定及其在生物和非生物胁迫逆境中的表达特征第102-138页
    摘要第7-104页
    4.1 前言第104页
    4.2 试验材料与方法第104-106页
        4.2.1 水稻及其处理第104页
        4.2.2 基因cNDA克隆策略第104-105页
        4.2.3 基因序列测定与分析第105页
        4.2.4 水稻总RNA提取第105页
        4.2.5 Northern杂交第105页
        4.2.6 RT-PCR分析第105-106页
        4.2.7 OsBIPP2C2原核蛋白表达载体构建及其表达第106页
    4.3 结果与分析第106-111页
        4.3.1 OsBIPP2C2基因全长cDNA的克隆第106-108页
        4.3.2 OsBIPP2C2基因存在选择性剪接第108页
        4.3.3 OsBIPP2C2基因以单拷贝形式定位于水稻第3号染色体上第108页
        4.3.4 OSBIPP2C2编码一个新的PP2C类型的蛋白第108-109页
        4.3.5 OSBIPP2C2受BTH诱导第109-110页
        4.3.6 OSBIPP2C2参与BTH诱导的对稻瘟病的抗病反应第110页
        4.3.7 OsBIPP2C2参与稻瘟病诱导的水稻抗病反应第110页
        4.3.8 OsBIPP2C2的K2转录本参与水稻抗病和抗逆反应第110-111页
        4.3.9 OsBIPP2C2参与水稻对ABA反应第111页
        4.3.10 OsBIPP2C2在水稻抗病信号途径中受次级信号分子诱导第111页
        4.3.11 OsBIPP2C2参与抗逆反应第111页
    4.4 讨论第111-136页
    参考文献第136-138页
第五章 根癌农杆菌介导水稻OsBIPP2C2基因转化烟草的研究第138-161页
    摘要第7-140页
    5.1 前言第140页
    5.2 试验方法第140-141页
        5.2.1 OsBIPP2C1-K2和K3植物双元表达载体的构建第140-141页
    5.3 试验结果第141-143页
        5.3.1 OsBIPP2C1-K2和K3植物表达载体的构建第141页
        5.3.2 转基因烟草植株的获得第141页
        5.3.3 转基因烟草植株的PCR鉴定第141页
        5.3.4 转基因烟草Northern杂交检测第141页
        5.3.5 T1转基因烟草在正常状况下的生长状况第141-142页
        5.3.6 T1代转基因烟草在ABA和逆境处理下的生长态势第142-143页
        5.3.7 转基因烟草PR基因表达检测第143页
        5.3.8 转基因烟草的抗病性分析第143页
    5.4 讨论第143-161页
第六章 全文总结与今后的研究第161-165页
    参考文献第164-165页
致谢第165页

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