| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-14页 |
| 1.1 淀粉酶与生淀粉 | 第9-10页 |
| 1.1.1 生淀粉 | 第9页 |
| 1.1.2 淀粉酶 | 第9-10页 |
| 1.1.3 生淀粉酶 | 第10页 |
| 1.2 生淀粉酶AmyP | 第10-11页 |
| 1.2.1 AmyP的来源及特点 | 第10页 |
| 1.2.2 AmyP的序列分析 | 第10-11页 |
| 1.3 淀粉结合结构域(SBD) | 第11页 |
| 1.3.1 定义 | 第11页 |
| 1.3.2 分类及功能 | 第11页 |
| 1.4 融合蛋白 | 第11-12页 |
| 1.5 研究目的、内容及意义 | 第12-14页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第12页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第12-13页 |
| 1.5.3 研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 AmyP与来自菌株Cryptococcus sp.S-2的SBD的融合研究 | 第14-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-18页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第14页 |
| 2.1.2 酶和主要试剂及实验仪器设备 | 第14-15页 |
| 2.1.3 试剂的配制 | 第15-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-22页 |
| 2.2.1 重组质粒pET28a-AmyP-Cr的构建 | 第18-19页 |
| 2.2.2 融合酶的诱导表达及纯化 | 第19页 |
| 2.2.3 融合酶AmyP-Cr最适反应条件的测定 | 第19-21页 |
| 2.2.4 动力学参数的测定 | 第21页 |
| 2.2.5 酶对生大米淀粉的降解率 | 第21页 |
| 2.2.6 酶对大米生淀粉的吸附作用 | 第21页 |
| 2.2.7 扫描电镜观察彻底降解后生淀粉颗粒表面的结构变化 | 第21-22页 |
| 2.3 融合酶AmyP-Cr的结果与分析 | 第22-28页 |
| 2.3.1 Cr-SBD的序列分析 | 第22页 |
| 2.3.2 重组质粒pET28a-AmyP-Cr的构建 | 第22页 |
| 2.3.3 pET28a-AmyP-Cr的诱导表达与纯化 | 第22-23页 |
| 2.3.4 融合酶AmP-Cr的最适反应条件 | 第23-24页 |
| 2.3.5 AmyP-Cr的底物特异性 | 第24-25页 |
| 2.3.6 AmyP-Cr对生大米淀粉水解动力学 | 第25页 |
| 2.3.7 AmyP-Cr的吸附作用 | 第25-26页 |
| 2.3.8 AmyP-Cr对生大米淀粉的降解率 | 第26页 |
| 2.3.9 AmyP-Cr热稳定性 | 第26-27页 |
| 2.3.10 AmyP-Cr的电镜扫描 | 第27-28页 |
| 2.4 本章小结 | 第28-29页 |
| 第三章 AmyP与来自菌株Thermobifida fusca NTU22的SBD融合的研究 | 第29-36页 |
| 3.1 实验材料 | 第29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29页 |
| 3.2.1 重组质粒pET28a-AmyP-Th的构建 | 第29页 |
| 3.2.2 AmyP-Th诱导表达及酶学性质的测定 | 第29页 |
| 3.3 实验结果分析 | 第29-35页 |
| 3.3.1 Th-SBD的序列分析 | 第29-30页 |
| 3.3.2 重组质粒pET28a-AmyP-Th的构建 | 第30页 |
| 3.3.3 AmyP-Th诱导表达和纯化 | 第30-31页 |
| 3.3.4 AmyP-Th最适反应条件的测定 | 第31-32页 |
| 3.3.5 AmyP-Th最适底物 | 第32-33页 |
| 3.3.6 AmyP-Th的酶促反应动力学 | 第33页 |
| 3.3.7 AmyP-Th对生大米淀粉的降解率 | 第33-34页 |
| 3.3.8 AmyP-Th的温度稳定性 | 第34-35页 |
| 3.4 本章小结 | 第35-36页 |
| 第四章 AmyP与来自菌株Clostridium butyricum T-7的SBD的融合研究 | 第36-43页 |
| 4.1 实验材料 | 第36页 |
| 4.2 实验方法 | 第36页 |
| 4.2.1 重组质粒pET28a-AmyP-Cl的构建 | 第36页 |
| 4.2.2 融合酶AmyP-Cl的诱导表达纯化及酶学性质的测定 | 第36页 |
| 4.3 实验结果分析 | 第36-42页 |
| 4.3.1 Cl-SBD的序列分析 | 第36-37页 |
| 4.3.2 重组质粒pET28a-AmyP-Cl的构建 | 第37页 |
| 4.3.3 融合酶AmyP-Cl诱导表达和纯化 | 第37-38页 |
| 4.3.4 AmyP-Cl的最适反应条件的测定 | 第38-39页 |
| 4.3.5 AmyP-Cl的底物特异性 | 第39-40页 |
| 4.3.6 AmyP-Cl酶促反应动力学 | 第40页 |
| 4.3.7 AmyP-Cl对生大米淀粉的降解率 | 第40-41页 |
| 4.3.8 AmyP-Cl的温度稳定性 | 第41-42页 |
| 4.4 本章小结 | 第42-43页 |
| 主要结论与创新点 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 附录 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 研究生期间发表论文情况 | 第56页 |
