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功能性低聚糖对肠道细菌的影响及机制

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
缩略符号对照表第7-12页
第一章 绪论第12-20页
    1.1 肠道菌群第12-14页
        1.1.1 肠道菌群的组成第12页
        1.1.2 肠道菌群与人体健康、疾病的关系第12-13页
        1.1.3 肠道菌群组成的影响因素第13-14页
    1.2 功能性低聚糖第14-17页
        1.2.1 功能性低聚糖的种类第14-16页
        1.2.2 低聚糖的代谢第16页
        1.2.3 低聚糖对肠道菌群的改变第16-17页
    1.3 益生菌对肠道菌群的影响第17-18页
        1.3.1 益生菌的定义第17页
        1.3.2 益生菌与肠道菌群第17-18页
    1.4 立题意义与研究内容第18-20页
        1.4.1 立题意义第18页
        1.4.2 主要研究内容第18-20页
第二章 利用低聚糖的肠道细菌的预测、分离与鉴定第20-37页
    2.1 前言第20页
    2.2 实验材料与设备第20-21页
        2.2.1 试剂第20-21页
        2.2.2 菌株第21页
        2.2.3 培养基第21页
        2.2.4 主要仪器和设备第21页
    2.3 实验方法第21-27页
        2.3.1 肠道细菌本地数据库的建立第21-22页
        2.3.2 转运蛋白和糖苷酶基因的检索第22-25页
        2.3.3 BLASTP检索第25页
        2.3.4 利用乳酮糖、低聚果糖的肠道细菌的分离与鉴定第25页
        2.3.5 细菌利用乳酮糖、低聚果糖生长的表征第25-26页
        2.3.6 乳酮糖、低聚果糖含量的测定第26页
        2.3.7 细菌基因组DNA提取第26页
        2.3.8 细菌 16S rDNA鉴定第26-27页
        2.3.9 数据统计与分析第27页
    2.4 结果与讨论第27-36页
        2.4.1 与低聚半乳糖利用相关的基因第27页
        2.4.2 与低聚果糖利用相关的基因第27-28页
        2.4.3 与低聚异麦芽糖利用相关的基因第28页
        2.4.4 与棉籽糖利用相关的基因第28页
        2.4.5 与低聚阿拉伯糖利用相关的基因第28-29页
        2.4.6 利用乳酮糖的细菌的分离与鉴定第29-30页
        2.4.7 购买菌株对乳酮糖的利用第30-31页
        2.4.8 利用低聚果糖的细菌的分离与鉴定第31-33页
        2.4.9 分离菌株对低聚果糖的利用第33页
        2.4.10 购买菌株对低聚果糖的利用第33-34页
        2.4.11 利用乳酮糖和低聚果糖的细菌第34-36页
    2.5 本章小结第36-37页
第三章 低聚糖对小鼠粪便菌群组成的影响第37-54页
    3.1 前言第37页
    3.2 实验材料与设备第37-38页
        3.2.1 试剂第37页
        3.2.2 实验动物第37页
        3.2.3 主要仪器和设备第37-38页
    3.3 实验方法第38-42页
        3.3.1 乳酮糖干预的动物实验设计第38页
        3.3.2 低聚果糖干预的动物实验设计第38-39页
        3.3.3 细菌基因组的提取第39-40页
        3.3.4 细菌 16S rDNA的V4 区PCR扩增第40页
        3.3.5 V4 区PCR产物的胶回收与定量第40-41页
        3.3.6 混样、文库构建以及上机测序第41页
        3.3.7 下机数据处理第41页
        3.3.8 Olsenella的分离与鉴定第41-42页
        3.3.9 Olsenella利用低聚果糖生长的表征第42页
        3.3.10 数据统计与分析第42页
    3.4 结果与讨论第42-53页
        3.4.1 小鼠的粪便菌群组成第42-43页
        3.4.2 乳酮糖对小鼠的粪便菌群组成的影响第43-44页
        3.4.3 FOS对小鼠粪便菌群组成的影响-序列丰富度第44-45页
        3.4.4 低剂量FOS对小鼠粪便菌群组成的影响第45-46页
        3.4.5 高剂量FOS对小鼠粪便菌群组成的影响第46-49页
        3.4.6 急性高剂量FOS对小鼠粪便菌群组成的影响第49-51页
        3.4.7 Olsenella的分离、鉴定及其利用FOS生长的表征第51-53页
    3.5 本章小结第53-54页
第四章 低聚糖对小鼠肠腔内容物和粘膜菌群组成的影响第54-68页
    4.1 前言第54页
    4.2 实验材料与设备第54-55页
        4.2.1 试剂第54页
        4.2.2 培养基第54-55页
        4.2.3 实验动物第55页
        4.2.4 主要仪器和设备第55页
    4.3 实验方法第55-58页
        4.3.1 实验设计第55-56页
        4.3.2 盲肠、结肠的总重和壁重第56页
        4.3.3 内容物pH的测定第56页
        4.3.4 内容物中SCFAs含量的测定第56-57页
        4.3.5 内容物中铵含量的测定第57页
        4.3.6 内容物中乳酮糖、葡萄糖含量的测定第57页
        4.3.7 血清代谢参数测定第57页
        4.3.8 内容物和粘膜样品的 16S rDNA宏基因组测序分析第57页
        4.3.9 利用乳酮糖的细菌的分离、鉴定第57-58页
        4.3.10 数据统计与分析第58页
    4.4 结果与讨论第58-67页
        4.4.1 小鼠体重与进食量第58页
        4.4.2 小鼠血清生化指标第58-59页
        4.4.3 盲肠和结肠总重、壁重第59页
        4.4.4 内容物的SCFAs的含量第59-60页
        4.4.5 内容物的pH第60-61页
        4.4.6 内容物中乳酮糖和铵的含量第61-62页
        4.4.7 序列丰富度第62页
        4.4.8 内容物和粘膜的菌群组成第62-63页
        4.4.9 乳酮糖对内容物和粘膜的菌群组成的影响第63-65页
        4.4.10 利用乳酮糖的细菌第65-67页
    4.5 本章小结第67-68页
第五章 低聚糖对细菌在小鼠肠道内定植的影响第68-80页
    5.1 前言第68页
    5.2 实验材料与设备第68-69页
        5.2.1 试剂第68页
        5.2.2 菌株第68页
        5.2.3 培养基第68-69页
        5.2.4 实验动物第69页
        5.2.5 主要仪器和设备第69页
    5.3 实验方法第69-71页
        5.3.1 动物实验设计第69-70页
        5.3.2 粪便样品的收集及细菌基因组提取第70页
        5.3.3 细菌菌群组成分析第70页
        5.3.4 细菌利用低聚果糖生长的代时测定第70-71页
        5.3.5 E. coli、Klebsiella以及L. plantarum ST-III的特异性PCR扩增第71页
        5.3.6 数据统计与分析第71页
    5.4 结果与讨论第71-79页
        5.4.1 SPF级小鼠的粪便菌群组成第71-72页
        5.4.2 细菌利用低聚果糖、葡萄糖生长的代时第72页
        5.4.3 Escherichia coli的PCR检测第72-73页
        5.4.4 Klebsiella sp.的PCR检测第73页
        5.4.5 ST-III以及 ΔSac A的PCR检测第73-74页
        5.4.6 单菌灌胃时菌株在小鼠肠道内的定植第74-76页
        5.4.7 混合菌株灌胃时菌株在小鼠肠道内的定植第76-79页
    5.5 本章小结第79-80页
主要结论与展望第80-82页
    主要结论第80-81页
    展望第81-82页
论文创新点第82-83页
致谢第83-84页
参考文献第84-98页
附录I:作者在攻读博士学位期间发表的论文第98-99页
附录II第99-110页

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