摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-20页 |
1 粘体动物研究概况 | 第10-14页 |
1.1 粘体动物及相关病害简述 | 第10-11页 |
1.2 异育银鲫“喉孢子虫病”及其病原的研究概述 | 第11-14页 |
2 粘体动物免疫学研究概况 | 第14-16页 |
2.1 粘体动物抗原特性的研究 | 第14-15页 |
2.2 粘体动物壳瓣和极丝的抗原研究概况 | 第15-16页 |
3 粘体动物—宿主的相互作用 | 第16-18页 |
3.1 非特异性免疫反应 | 第16-17页 |
3.1.1 细胞免疫 | 第16页 |
3.1.2 体液免疫 | 第16-17页 |
3.2 特异性体液免疫 | 第17-18页 |
4 粘体动物病害的免疫防治 | 第18-19页 |
5 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
第二章 洪湖碘泡虫多克隆抗体的制备及免疫特性分析 | 第20-31页 |
1 材料与方法 | 第20-25页 |
1.1 实验材料 | 第20-23页 |
1.1.1 病鱼采集 | 第20页 |
1.1.2 主要试剂和材料 | 第20-21页 |
1.1.3 主要缓冲液的配制 | 第21-23页 |
1.2 实验方法 | 第23-25页 |
1.2.1 洪湖碘泡虫成熟孢子的分离纯化 | 第23页 |
1.2.2 可溶性蛋白的制备及SDS-PAGE分析 | 第23页 |
1.2.3 免疫小鼠与血清收集 | 第23页 |
1.2.4 多抗血清效价的测定 | 第23-24页 |
1.2.5 多克隆抗体的Western blotting分析 | 第24页 |
1.2.6 间接免疫荧光(IFAT)试验 | 第24-25页 |
1.2.6.1 IFAT抗原定位 | 第24页 |
1.2.6.2 多克隆抗体的交叉反应试验 | 第24-25页 |
2 结果与分析 | 第25-29页 |
2.1 洪湖碘泡虫的分离纯化 | 第25页 |
2.2 可溶性蛋白制备及SDS-PAGE分析 | 第25-26页 |
2.3 多抗血清的效价测定 | 第26-27页 |
2.4 多抗免疫印迹分析 | 第27页 |
2.5 间接免疫荧光(IFAT)抗原定位 | 第27-28页 |
2.6 多克隆抗体的交叉反应试验 | 第28-29页 |
3 讨论 | 第29-31页 |
第三章 洪湖碘泡虫壳瓣和极丝单克隆抗体的制备与鉴定 | 第31-49页 |
1 材料与方法 | 第31-40页 |
1.1 实验材料 | 第31-34页 |
1.1.1 病鱼采集 | 第31-32页 |
1.1.2 实验动物 | 第32页 |
1.1.3 主要试剂和材料 | 第32页 |
1.1.4 主要培养基及其配制 | 第32-34页 |
1.1.5 主要缓冲液配制 | 第34页 |
1.2 实验方法 | 第34-40页 |
1.2.1 成熟孢子的分离纯化 | 第34页 |
1.2.2 可溶性蛋白的制备 | 第34页 |
1.2.3 免疫小鼠 | 第34页 |
1.2.4 细胞融合 | 第34-36页 |
1.2.4.1 饲养细胞的制备 | 第34-35页 |
1.2.4.2 脾细胞的制备 | 第35页 |
1.2.4.3 骨髓瘤细胞的准备 | 第35页 |
1.2.4.4 细胞融合 | 第35-36页 |
1.2.4.5 细胞培养 | 第36页 |
1.2.5 阳性克隆的筛选和亚克隆 | 第36-37页 |
1.2.5.1 ELISA检测上清效价 | 第36页 |
1.2.5.2 杂交瘤细胞的亚克隆 | 第36页 |
1.2.5.3 杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第36-37页 |
1.2.6 单克隆抗体的大量制备和纯化 | 第37页 |
1.2.6.1 小鼠腹水的制备及收集 | 第37页 |
1.2.6.2 腹水的纯化 | 第37页 |
1.2.7 单克隆抗体亚类的鉴定 | 第37-38页 |
1.2.8 间接酶联免疫吸附法(ELISA)测定抗体的效价 | 第38页 |
1.2.9 利用间接免疫荧光(IFAT)定位虫体抗原 | 第38页 |
1.2.10 单克隆抗体特异性评价 | 第38页 |
1.2.11 单克隆抗体的Western Blotting分析 | 第38页 |
1.2.12 利用质谱技术分析单抗针对抗原决定簇的蛋白组成 | 第38-40页 |
2 结果与分析 | 第40-47页 |
2.1 杂交瘤细胞的筛选和杂交瘤细胞株的建立 | 第40页 |
2.2 单克隆抗体效价测定及亚类鉴定 | 第40页 |
2.3 间接免疫荧光定位抗原—成熟孢子及一种放射孢子虫 | 第40-43页 |
2.4 单克隆抗体的免疫印记试验 | 第43页 |
2.5 利用质谱技术分析单抗所针对抗原决定簇的蛋白组成 | 第43-46页 |
2.6 单克隆抗体的特异性评价(交叉反应) | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-61页 |
附录 | 第61-63页 |
致谢 | 第63-64页 |