符号说明 | 第4-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-25页 |
1.1 小麦纹枯病的研究现状 | 第11-15页 |
1.1.1 小麦纹枯病的危害症状 | 第11页 |
1.1.2 小麦纹枯病的病原 | 第11-12页 |
1.1.3 小麦纹枯病的病害循环 | 第12-13页 |
1.1.4 小麦纹枯病菌的发病条件 | 第13-14页 |
1.1.5 小麦纹枯病的病害控制 | 第14-15页 |
1.2 丝核菌的分类概况 | 第15-18页 |
1.2.1 丝核菌的分类特征 | 第16页 |
1.2.2 菌丝融合群分类法在丝核菌上的应用 | 第16-18页 |
1.3 DNA条形码技术 | 第18-21页 |
1.3.1 常见的DNA条形码分类及应用 | 第19-20页 |
1.3.2 内转录间隔区(ITS)在真菌分类中的应用 | 第20-21页 |
1.4 内转录间隔区(ITS)异质性研究 | 第21-22页 |
1.5 丝核菌原生质体制备技术 | 第22-23页 |
1.5.1 原生质体的制备与再生技术 | 第22-23页 |
1.5.2 丝核菌原生质体的制备和再生 | 第23页 |
1.6 本实验的目的和意义 | 第23-25页 |
2 材料方法 | 第25-32页 |
2.1 材料 | 第25-26页 |
2.1.1 供试菌株 | 第25页 |
2.1.2 仪器 | 第25页 |
2.1.3 载体、酶与生化试剂 | 第25页 |
2.1.4 寡聚核苷酸引物 | 第25页 |
2.1.5 部分培养基及试剂配制 | 第25-26页 |
2.2 方法 | 第26-32页 |
2.2.1 菌种的选取、活化和保存 | 第26-27页 |
2.2.2 原生质体制备及菌落再生 | 第27页 |
2.2.3 单细胞原生质体菌落荧光染色 | 第27-28页 |
2.2.4 单细胞原生质体菌落(SPIs)全基因组DNA提取 | 第28页 |
2.2.5 ITS序列PCR扩增 | 第28-29页 |
2.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
2.2.7 片段回收及检测 | 第29-30页 |
2.2.8 特异扩增片段的克隆 | 第30-31页 |
2.2.9 序列测定及分析 | 第31页 |
2.2.10 单细胞原生质体菌落融合型检测 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-46页 |
3.1 原生质体的制备和再生 | 第32-33页 |
3.2 单细胞原生质体菌落的形态及核相观察 | 第33-34页 |
3.3 原生质体菌落融合型检测 | 第34-35页 |
3.4 ITS序列的异质性分析 | 第35-43页 |
3.4.1 序列长度分析 | 第37-38页 |
3.4.2 GC含量分析 | 第38-39页 |
3.4.3 单核苷酸多态位点(SNPs)分析 | 第39-42页 |
3.4.4 相似性分析 | 第42-43页 |
3.5 系统发育分析 | 第43-46页 |
4 讨论 | 第46-50页 |
4.1 丝核菌ITS序列异质性问题 | 第46-47页 |
4.2 中国小麦纹枯病病原融合亚群分类 | 第47页 |
4.3 禾谷丝核菌ITS1区和ITS2区遗传差异比较 | 第47-48页 |
4.4 利用单细胞原生质体再生菌落作为实验材料的意义 | 第48页 |
4.5 禾谷丝核菌细胞核异质性分析 | 第48-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
硕士期间发表论文 | 第60页 |