中英文缩略词表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1 前言 | 第13-15页 |
2 实验材料 | 第15-21页 |
2.1 实验动物 | 第15页 |
2.2 实验仪器 | 第15-16页 |
2.3 实验试剂 | 第16-17页 |
2.4 抗体 | 第17页 |
2.5 siRNA与shRNA干扰序列 | 第17页 |
2.6 配制试剂 | 第17-21页 |
3 实验方法 | 第21-30页 |
3.1 提取、分离和培养原代大鼠关节软骨细胞 | 第21-22页 |
3.2 透射电子显微镜(TEM)法观察自噬小体 | 第22页 |
3.3 单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察自噬囊泡 | 第22-23页 |
3.4 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第23页 |
3.5 质粒的提取 | 第23-24页 |
3.6 Lipofectamine2000与control siRNA转染比例 | 第24页 |
3.7 转染Beclin1 siRNA | 第24-25页 |
3.8 转染ASIC1a shRNA | 第25-26页 |
3.9 转染GFP-mRFP-LC3质粒 | 第26-27页 |
3.10 Western Blot | 第27-29页 |
3.11 统计学分析 | 第29-30页 |
4 实验结果 | 第30-45页 |
4.1 ASIC1a介导酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬 | 第30-36页 |
4.2 ASIC1a介导大鼠关节软骨细胞凋亡 | 第36-38页 |
4.3 自噬抑制ASIC1a介导的大鼠关节软骨细胞凋亡 | 第38-41页 |
4.4 Beclin1 si RNA增强ASIC1a介导的关节软骨细胞凋亡 | 第41-45页 |
5 讨论 | 第45-47页 |
6 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
附录 | 第52-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
综述 | 第55-76页 |
参考文献 | 第69-76页 |