| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-22页 |
| 1 拉沙里菌素概述 | 第13-19页 |
| 1.1 LAS理化性质 | 第13页 |
| 1.2 LAS作用机理 | 第13-16页 |
| 1.2.1 抗球虫机理 | 第14页 |
| 1.2.2 促生长机理 | 第14-16页 |
| 1.3 LAS在畜禽生产中的应用 | 第16-18页 |
| 1.3.1 LAS在养鸡生产中的应用 | 第16-17页 |
| 1.3.2 LAS在养牛生产中的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 LAS的毒性 | 第18-19页 |
| 2 LAS限量标准 | 第19-20页 |
| 3 LAS残留检测方法 | 第20-21页 |
| 3.1 高效液相色谱法 | 第20页 |
| 3.2 液相色谱-质谱联用法 | 第20-21页 |
| 3.3 酶联免疫吸附法 | 第21页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 拉沙里菌素人工抗原的合成与鉴定 | 第22-31页 |
| 1 材料和方法 | 第22-26页 |
| 1.1 主要试剂与材料 | 第22页 |
| 1.2 主要仪器 | 第22页 |
| 1.3 主要溶液系统 | 第22-23页 |
| 1.4 LAS人工抗原的制备 | 第23-24页 |
| 1.4.1 透析袋的处理 | 第23页 |
| 1.4.2 免疫原的制备 | 第23-24页 |
| 1.4.3 包被原的制备 | 第24页 |
| 1.5 人工抗原蛋白浓度的测定 | 第24-25页 |
| 1.6 人工抗原的鉴定 | 第25-26页 |
| 1.6.1 人工抗原紫外扫描鉴定 | 第25页 |
| 1.6.2 人工抗原变性聚丙烯酰胺凝胶电泳考马斯亮蓝染色鉴定 | 第25-26页 |
| 1.6.3 人工抗原免疫学方法鉴定 | 第26页 |
| 2 结果 | 第26-29页 |
| 2.1 人工抗原蛋白浓度的测定 | 第26页 |
| 2.2 人工抗原紫外扫描鉴定 | 第26-28页 |
| 2.3 人工抗原变性聚丙烯酰胺凝胶电泳考马斯亮蓝染色鉴定 | 第28页 |
| 2.4 人工抗原免疫学方法鉴定 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 拉沙里菌素单克隆抗体的制备及鉴定 | 第31-44页 |
| 1 材料和方法 | 第31-37页 |
| 1.1 实验动物 | 第31页 |
| 1.2 主要试剂与材料 | 第31页 |
| 1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 1.4 主要溶液系统 | 第31-32页 |
| 1.5 LAS单克隆抗体的制备 | 第32-37页 |
| 1.5.1 免疫原的乳化与小鼠免疫 | 第32-33页 |
| 1.5.2 ELISA法检测小鼠血清抗体效价 | 第33-34页 |
| 1.5.3 细胞融合 | 第34-35页 |
| 1.5.4 杂交瘤细胞的培养及阳性孔的筛选 | 第35页 |
| 1.5.5 阳性孔亚克隆培养 | 第35-36页 |
| 1.5.6 杂交瘤细胞稳定性试验及建株 | 第36页 |
| 1.5.7 腹水的制备 | 第36页 |
| 1.5.8 腹水效价的检测 | 第36页 |
| 1.5.9 腹水纯化 | 第36-37页 |
| 1.6 单克隆抗体的鉴定 | 第37页 |
| 1.6.1 腹水蛋白浓度测定 | 第37页 |
| 1.6.2 单克隆抗体亚型的鉴定 | 第37页 |
| 1.6.3 单克隆抗体特异性的鉴定 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-41页 |
| 2.1 包被原和阳性血清最佳工作浓度的确定 | 第37-38页 |
| 2.2 杂交瘤细胞生长状况 | 第38-39页 |
| 2.3 杂交瘤细胞的筛选、建株及稳定性 | 第39页 |
| 2.4 腹水的制备 | 第39页 |
| 2.5 腹水的效价 | 第39-40页 |
| 2.6 单克隆抗体的鉴定 | 第40-41页 |
| 2.6.1 纯化前后腹水蛋白浓度测定 | 第40页 |
| 2.6.2 单克隆抗体亚型的鉴定 | 第40-41页 |
| 2.6.3 单克隆抗体特异性的鉴定 | 第41页 |
| 3 讨论 | 第41-44页 |
| 第四章 拉沙里菌素单克隆抗体CiELISA方法的建立及牛奶样品添加回收实验 | 第44-54页 |
| 1 材料和方法 | 第44-46页 |
| 1.1 主要试剂与材料 | 第44页 |
| 1.2 主要仪器 | 第44页 |
| 1.3 样品 | 第44页 |
| 1.4 CiELSIA检测方法的建立 | 第44-45页 |
| 1.4.1 最佳封闭液和最佳封闭浓度的确定 | 第44-45页 |
| 1.4.2 抗原抗体最佳工作浓度的确定 | 第45页 |
| 1.4.3 CiELISA标准工作曲线的绘制及相关参数的计算 | 第45页 |
| 1.5 样品添加回收试验 | 第45-46页 |
| 1.5.1 样品的预处理 | 第45页 |
| 1.5.2 样品基质干扰 | 第45-46页 |
| 1.5.3 标准工作曲线的绘制 | 第46页 |
| 1.5.4 样品中LAS回收率的测定 | 第46页 |
| 2 结果 | 第46-52页 |
| 2.1 CiELSIA检测方法的建立 | 第46-50页 |
| 2.1.1 最佳封闭液和最佳封闭浓度的确定 | 第46-48页 |
| 2.1.2 抗原抗体最佳工作浓度的确定 | 第48页 |
| 2.1.3 CiELISA标准工作曲线及参数 | 第48-50页 |
| 2.2 样品添加回收试验 | 第50-52页 |
| 2.2.1 样品基质干扰 | 第50-51页 |
| 2.2.2 样品溶液标准曲线的建立 | 第51-52页 |
| 2.2.3 样品添加回收率的测定 | 第52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第63-64页 |
