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鲤钙蛋白酶基因家族克隆表达及与肌肉质构相关性研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第1章 绪论第18-35页
    1.1 课题背景及研究的目的和意义第18-19页
    1.2 钙蛋白酶家族第19-27页
        1.2.1 钙蛋白酶概述第19页
        1.2.2 CAPN1和CAPN2蛋白的结构与功能第19-23页
        1.2.3 CAPN3蛋白的结构与功能第23-24页
        1.2.4 CAST蛋白的结构和功能第24-26页
        1.2.5 鱼类钙蛋白酶系统研究现状第26-27页
    1.3 鱼类肉质质构研究进展第27-33页
        1.3.1 鱼类肉质质构研究现状第27-28页
        1.3.2 影响鱼类肉质质构的因素第28-33页
    1.4 本论文的主要研究内容第33-35页
第2章 实验材料与方法第35-48页
    2.1 实验材料第35-37页
        2.1.1 实验样品采集第35页
        2.1.2 试剂第35-37页
        2.1.3 仪器第37页
    2.2 测试方法第37-42页
        2.2.1 总RNA的浓度与质量检测第37-38页
        2.2.2 PCR扩增第38-39页
        2.2.3 扩增产物的回收与测序第39页
        2.2.4 荧光定量PCR方法第39-40页
        2.2.5 蛋白浓度的测定第40-41页
        2.2.6 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第41页
        2.2.7 鲤肌肉营养成分的测定第41页
        2.2.8 鲤肌肉质构(TPA)测量第41-42页
    2.3 实验方法第42-46页
        2.3.1 鲤全鱼总RNA的提取第42页
        2.3.2 引物的设计第42-44页
        2.3.3 5’RACE法扩增capn基因家族 5’末端第44-45页
        2.3.4 3’RACE法扩增capn基因家族 3’末端第45页
        2.3.5 钙蛋白酶的提取第45-46页
        2.3.6 生物信息学分析方法第46页
    2.4 数据处理第46-48页
第3章 鲤capn基因家族克隆及序列分析第48-67页
    3.1 引言第48页
    3.2 鲤capn基因家族序列分析第48-51页
        3.2.1 capn1基因序列分析第49页
        3.2.2 capn2基因序列分析第49-50页
        3.2.3 capn3基因序列分析第50-51页
        3.2.4 cast基因序列分析第51页
    3.3 鲤capn基因家族外显子分析第51-57页
        3.3.1 capn1基因外显子分析第51-53页
        3.3.2 capn2基因外显子分析第53-55页
        3.3.3 capn3基因外显子分析第55-56页
        3.3.4 cast基因外显子分析第56-57页
    3.4 鲤capn基因家族系统发育及同源性分析第57-65页
        3.4.1 capn1基因的同源性及系统发育分析第58-60页
        3.4.2 capn2基因的同源性及系统发育分析第60-62页
        3.4.3 capn3基因的同源性及系统发育分析第62-63页
        3.4.4 cast基因的同源性及系统发育分析第63-65页
    3.5 本章小结第65-67页
第4章 鲤capn基因家族编码蛋白质的特性第67-83页
    4.1 引言第67页
    4.2 CAPN蛋白家族的疏水性和跨膜螺旋预测第67-71页
        4.2.1 CAPN蛋白家族的疏水性第68-69页
        4.2.2 CAPN蛋白家族的跨膜螺旋预测第69-71页
    4.3 CAPN蛋白家族的信号肽及亚细胞定位第71-73页
        4.3.1 CAPN蛋白家族的信号肽分析第71-73页
        4.3.2 CAPN蛋白家族的亚细胞定位第73页
    4.4 CAPN蛋白家族磷酸化位点的预测第73-78页
        4.4.1 CAPN1蛋白磷酸化位点的预测第74-75页
        4.4.2 CAPN2蛋白质磷酸化位点的预测第75-76页
        4.4.3 CAPN3蛋白质磷酸化位点的预测第76-77页
        4.4.4 CAST蛋白质磷酸化位点的预测第77-78页
    4.5 CAPN蛋白家族糖基化位点预测第78-82页
        4.5.1 CAPN1蛋白糖基化位点预测第78-79页
        4.5.2 CAPN2蛋白质糖基化位点预测第79-80页
        4.5.3 CAPN3蛋白质糖基化位点预测第80-81页
        4.5.4 CAST蛋白质糖基化位点预测第81-82页
    4.6 本章小结第82-83页
第5章 鲤CAPN蛋白家族结构与功能域分析第83-105页
    5.1 引言第83页
    5.2 CAPN蛋白家族氨基酸组成分析第83-85页
    5.3 CAPN蛋白家族一级结构第85-87页
    5.4 CAPN蛋白家族二级结构预测第87-91页
        5.4.1 CAPN1蛋白二级结构预测第87-88页
        5.4.2 CAPN2蛋白质二级结构预测第88-89页
        5.4.3 CAPN3蛋白质二级结构预测第89-90页
        5.4.4 CAST蛋白质二级结构预测第90-91页
    5.5 CAPN蛋白家族三级结构预测第91-95页
        5.5.1 CAPN1蛋白质三级结构预测第91-92页
        5.5.2 CAPN2蛋白质三级结构预测第92-93页
        5.5.3 CAPN3蛋白质三级结构预测第93-94页
        5.5.4 CAST蛋白质三级结构预测第94-95页
    5.6 CAPN蛋白家族的结构域及功能基序分析第95-104页
        5.6.1 CAPN1蛋白质的结构域及功能基序分析第95-97页
        5.6.2 CAPN2蛋白质的结构域及功能基序分析第97-99页
        5.6.3 CAPN3蛋白质的结构域及功能基序分析第99-102页
        5.6.4 CAST蛋白质的结构域及功能基序分析第102-104页
    5.7 本章小结第104-105页
第6章 鲤capn基因家族表达及与肌肉质构相关分析第105-132页
    6.1 引言第105页
    6.2 鲤capn基因家族不同组织表达分析第105-110页
        6.2.1 鲤组织RNA提取方法的优化第106页
        6.2.2 鲤capn1基因不同组织表达分析第106-108页
        6.2.3 鲤capn2基因不同组织表达分析第108-109页
        6.2.4 鲤cast基因不同组织表达分析第109-110页
    6.3 capn基因家族在胚胎和肌肉内的表达相关分析第110-113页
        6.3.1 capn基因家族在不同胚胎发育时期表达分析第110-112页
        6.3.2 capn基因家族在两种鲤肌肉内表达及相关分析第112-113页
    6.4 鲤肌肉CAPN蛋白酶家族的分离及相关分析第113-115页
        6.4.1 鲤肌肉C A PN蛋 白酶家族的分离与检测第113-114页
        6.4.2 鲤肌肉C A PN蛋 白酶家族的电泳分析第114-115页
    6.5 两种鲤营养成分和不同温度下肌肉质构分析第115-123页
        6.5.1 两种鲤常规营养成分分析第116页
        6.5.2 不同 4℃冷藏时间对鲤肌肉质构的影响第116-117页
        6.5.3 不同保存温度对鲤肌肉硬度的影响第117-118页
        6.5.4 不同保存温度对鲤肌肉黏附性的影响第118-119页
        6.5.5 不同保存温度对鲤肌肉弹性的影响第119-120页
        6.5.6 不同保存温度对鲤肌肉黏聚性的影响第120-121页
        6.5.7 不同保存温度对鲤肌肉胶黏性的影响第121页
        6.5.8 不同保存温度对鲤肌肉咀嚼度的影响第121-122页
        6.5.9 不同保存温度对鲤肌肉恢复性的影响第122-123页
    6.6 鲤生长性状和营养成分与肌肉质构的相关分析第123-126页
        6.6.1 鲤生长性状及营养成分与肌肉质构的相关分析第124页
        6.6.2 鲤肌肉质构和肌肉营养成分的主成分分析第124-126页
    6.7 鲤capn基因家族与生长和肉质性状相关分析第126-130页
        6.7.1 鲤capn基因家族与生长和肌肉营养成分相关分析第126-127页
        6.7.2 鲤capn基因家族与肌肉质构的相关分析第127-129页
        6.7.3 鲤肌肉capn基因家族和质构指标的主成分分析第129-130页
    6.8 本章小结第130-132页
结论第132-133页
创新点第133-134页
展望第134-135页
参考文献第135-148页
攻读博士学位期间发表的论文及其它成果第148-150页
致谢第150-151页
个人简历第151-152页
附录第152-156页

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