| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩写词中英文对照 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-18页 |
| 1.1 癌症研究现状 | 第12-13页 |
| 1.2 PI3K/AKT信号通路 | 第13-15页 |
| 1.3 UPR（unfolded protein response） | 第15-18页 |
| 第二章 MK-2206 抑制食管癌细胞增殖 | 第18-37页 |
| 2.1. 材料与仪器 | 第19-24页 |
| 2.1.1 主要仪器与耗材 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19-21页 |
| 2.1.3 细胞株 | 第21页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第21-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-29页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第24页 |
| 2.2.2 CCK8法测定细胞增殖 | 第24页 |
| 2.2.3 显微镜观察细胞形态 | 第24-25页 |
| 2.2.4 PI单染法检测细胞周期 | 第25页 |
| 2.2.5 Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡 | 第25-26页 |
| 2.2.6 Western blot检测细胞蛋白的表达量 | 第26-29页 |
| 2.2.7 统计学分析 | 第29页 |
| 2.3 实验结果 | 第29-35页 |
| 2.3.1 MK-2206 抑制食管癌细胞的增殖 | 第29-30页 |
| 2.3.2 MK-2206 抑制食管鳞癌细胞株Kyse450、Kyse510的增殖 | 第30-31页 |
| 2.3.3 MK-2206诱导食管癌细胞株Kyse450和Kyse510周期阻滞在G0/G1期 | 第31-33页 |
| 2.3.4 MK-2206 不能诱导Kyse450和Kyse510发生细胞凋亡 | 第33-34页 |
| 2.3.5 MK-2206 抑制p-Akt的激活 | 第34-35页 |
| 2.4 本章小结与讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 MK-2206 在Kyse450和Kyse510中诱导内质网应激通路IRE1/XBP1激活 | 第37-43页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第37-38页 |
| 3.1.1 主要仪器与耗材 | 第37页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.3 Q-PCR引物 | 第38页 |
| 3.1.4 主要溶液配制 | 第38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-40页 |
| 3.2.1Western blot检测内质网应激相关蛋白 | 第38页 |
| 3.2.2 si RNA干扰XBP1的表达 | 第38-39页 |
| 3.2.3 荧光定量PCR(Q-PCR) | 第39-40页 |
| 3.2.4 干扰XBP1后MK-2206 对Kyse450细胞增殖的影响 | 第40页 |
| 3.3 实验结果 | 第40-42页 |
| 3.3.1 MK-2206 诱导Kyse450和Kyse510中IRE1/XBP1的激活 | 第40-41页 |
| 3.3.2 si XBP1能够增强MK-2206 对于Kyse450的敏感性 | 第41-42页 |
| 3.4 本章小结与讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 IRE1核酸内切酶抑制剂STF083010增强Kyse450和Kyse510对MK-2206的敏感性 | 第43-51页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第43-44页 |
| 4.1.1 主要仪器与耗材 | 第43页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 主要溶液配制 | 第43-44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-45页 |
| 4.2.1 CCK8法测定联用MK-2206 与STF-083010 对两株食管癌增殖率的影响 | 第44页 |
| 4.2.2 联合指数（CI） | 第44页 |
| 4.2.3 平板克隆形成实验 | 第44-45页 |
| 4.3 实验结果 | 第45-50页 |
| 4.3.1 STF083010增强Kyse450和Kyse510对MK-2206 的敏感性 | 第45-47页 |
| 4.3.2 MK-2206 联用 STF-083010 增强抑制 Kyse450 和 Kyse510 细胞增殖能力 | 第47-50页 |
| 4.4 本章小结与讨论 | 第50-51页 |
| 第五章 MK-2206 与STF-083010 联用不诱导Kyse450和Kyse510发生细胞凋亡 | 第51-55页 |
| 5.1 材料与仪器 | 第51页 |
| 5.1.1 主要仪器与耗材 | 第51页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第51页 |
| 5.1.3 主要溶液配制 | 第51页 |
| 5.2 实验方法 | 第51-52页 |
| 5.2.1 Annexin V-FITC/PI检测联用MK-2206 与STF-083010 对细胞凋亡的影响 | 第51-52页 |
| 5.2.2 Western blot检测细胞凋亡相关蛋白 | 第52页 |
| 5.3 实验结果 | 第52-54页 |
| 5.3.1 MK-2206 与STF-083010 联用不能诱导Kyse450与Kyse510发生凋亡 | 第52-53页 |
| 5.3.2 MK-2206 与STF-083010 联用对凋亡相关蛋白的影响 | 第53-54页 |
| 5.4 本章小结与讨论 | 第54-55页 |
| 第六章 MK-2206 与STF-083010 联用增强Kyse450和Kyse510自噬水平 | 第55-64页 |
| 6.1. 材料与仪器 | 第55-56页 |
| 6.1.1 主要仪器与耗材 | 第55-56页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第56页 |
| 6.1.3 主要溶液配制 | 第56页 |
| 6.2 实验方法 | 第56-57页 |
| 6.2.1Western blot检测细胞自噬亡相关蛋白 | 第56页 |
| 6.2.2 si RNA干扰XBP1的表达对自噬蛋白的影响 | 第56页 |
| 6.2.3 吖啶橙染色观察细胞自噬 | 第56-57页 |
| 6.2.4 氯喹抑制细胞自噬对细胞增殖率的影响 | 第57页 |
| 6.2.5 抑制细胞自噬对凋亡的影响 | 第57页 |
| 6.3 实验结果 | 第57-63页 |
| 6.3.1 STF-083010 增强MK-2206 在Kyse450和Kyse510诱导的自噬..466.3.2 抑制XBP1增强MK-2206 诱导的自噬 | 第57-59页 |
| 6.3.2 抑制 XBP1 增强 MK-2206 诱导的自噬 | 第59-60页 |
| 6.3.3 MK-2206 与STF-083010 联用诱导细胞保护性自噬在Kyse450和Kyse510细胞中 | 第60-61页 |
| 6.3.4 抑制自噬后联用MK-2206 与STF-083010 诱导细胞发生凋亡 | 第61-63页 |
| 6.4 本章小结与讨论 | 第63-64页 |
| 第七章 MK-2206 联用STF-083010 诱导Kyse450和Kyse510细胞周期阻滞在G0/G1期 | 第64-70页 |
| 7.1. 材料与仪器 | 第64页 |
| 7.1.1 主要仪器与耗材 | 第64页 |
| 7.1.2 主要试剂 | 第64页 |
| 7.1.3 主要溶液配制 | 第64页 |
| 7.2 实验方法 | 第64-65页 |
| 7.2.1 联用MK-2206 与STF-083010 对细胞周期的影响 | 第64-65页 |
| 7.2.2 Western-blot检测周期蛋白 | 第65页 |
| 7.2.3 si RNA干扰XBP1的表达对P21蛋白的影响 | 第65页 |
| 7.3 实验结果 | 第65-69页 |
| 7.3.1 MK-2206 联用STF-083010 诱导Kyse450和Kyse510细胞周期阻滞在G0/G1期 | 第65-67页 |
| 7.3.2 MK-2206 联用STF-083010 对周期相关蛋白的影响 | 第67-68页 |
| 7.3.3 抑制IRE1/XBP1通路增强P21对周期的调控 | 第68-69页 |
| 7.4 本章小结与讨论 | 第69-70页 |
| 第八章 STF-083010 抑制IRE1/XBP1通路激活，影响Akt与IRE1蛋白之间的相互作用 | 第70-77页 |
| 8.1 材料与仪器 | 第70页 |
| 8.1.1 主要仪器与耗材 | 第70页 |
| 8.1.2 主要试剂 | 第70页 |
| 8.1.3 主要溶液配制 | 第70页 |
| 8.2 实验方法 | 第70-71页 |
| 8.2.1 联用MK-2206 与STF-083010 对内质网相关蛋白及Akt的影响.598.2.2 Q-PCR检测联用MK-2206 与STF-083010 对XBP1剪切的影响 | 第70页 |
| 8.2.2 Q-PCR 检测联用 MK-2206 与 STF-083010 对 XBP1 剪切的影响 | 第70-71页 |
| 8.2.3 co-IP免疫共沉淀 | 第71页 |
| 8.3 实验结果 | 第71-75页 |
| 8.3.1 联用MK-2206 与STF-083010 短时间内增强IRE1的表达 | 第71-72页 |
| 8.3.2 STF-083010 抑制MK-2206 引起的IRE1/XBP1通路的激活 | 第72-73页 |
| 8.3.3 STF-083010 不能增强MK-2206 对于Akt活性的抑制作用 | 第73-74页 |
| 8.3.4 STF-083010 影响IRE1与Akt蛋白间的相互作用 | 第74-75页 |
| 8.4 本章小结与讨论 | 第75-77页 |
| 第九章 MK-2206 联用STF-083010 体内抗食管癌作用的研究 | 第77-84页 |
| 9.1 材料与仪器 | 第77-78页 |
| 9.1.1 主要仪器与耗材 | 第77页 |
| 9.1.2 主要试剂 | 第77页 |
| 9.1.3 实验动物及饲养环境 | 第77-78页 |
| 9.2 实验方法 | 第78-79页 |
| 9.2.1 动物实验 | 第78页 |
| 9.2.2 H&E染色 | 第78-79页 |
| 9.3 实验结果 | 第79-82页 |
| 9.3.1 MK-2206 与STF-083010 联用对裸鼠移植瘤生长的抑制作用 | 第79-81页 |
| 9.3.2 MK-2206 与STF-083010 联用体内诱导移植瘤细胞凋亡 | 第81-82页 |
| 9.4 本章小结与讨论 | 第82-84页 |
| 全文总结 | 第84页 |
| 本论文创新之处 | 第84-85页 |
| 展望 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-92页 |
| 硕士期间研究成果 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
