缩略词表 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
1.1 斑马鱼肝脏的发育 | 第10-11页 |
1.1.1 斑马鱼肝脏的形态发生 | 第10页 |
1.1.2 肝脏发育的细胞和分子调控 | 第10-11页 |
1.2 斑马鱼胰腺的发育 | 第11-12页 |
1.2.1 斑马鱼胰腺的形态发生 | 第12页 |
1.2.2 胰腺发育的分子调控 | 第12页 |
1.3 斑马鱼的造血过程 | 第12-14页 |
1.3.1 脊椎动物的造血过程 | 第13页 |
1.3.2 造血过程的细胞或分子调控 | 第13-14页 |
1.4 核糖体及相关疾病 | 第14-16页 |
1.4.1 哺乳动物核糖体的组成 | 第14页 |
1.4.2 核糖体的合成 | 第14-15页 |
1.4.3 rRNA的加工 | 第15页 |
1.4.4 核糖体病 | 第15-16页 |
1.4.5 核糖体合成的调控 | 第16页 |
1.5 ltv1基因的研究现状 | 第16-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-30页 |
2.1 斑马鱼的品系和饲养 | 第18页 |
2.2 主要实验材料、仪器、试剂及耗材 | 第18-19页 |
2.2.1 实验仪器 | 第18-19页 |
2.2.2 实验耗材 | 第19页 |
2.3 实验方法 | 第19-30页 |
2.3.1 基于CRISPR/Cas9技术的斑马鱼ltv1的敲除 | 第19页 |
2.3.2 ltv1~(Δ14/Δ14)突变体的基因型鉴定 | 第19页 |
2.3.3 质粒构建 | 第19-20页 |
2.3.4 细胞化学染色 | 第20页 |
2.3.5 全胚原位杂交 | 第20-22页 |
2.3.6 免疫荧光染色 | 第22-23页 |
2.3.7 mRNA合成 | 第23-24页 |
2.3.8 mRNA挽救实验 | 第24页 |
2.3.9 Total RNA的提取,cDNA的合成以及荧光定量PCR | 第24-26页 |
2.3.10 Nothern blot | 第26-30页 |
第三章 实验结果与分析 | 第30-44页 |
引言 | 第30-31页 |
3.1 实验结果 | 第31-44页 |
3.1.1 斑马鱼中敲除ltv1和ltv1~(Δ14/Δ14)突变体的表型初步分析 | 第31-32页 |
3.1.2 ltv1~(Δ14/Δ14)突变体的消化器官缺陷 | 第32-35页 |
3.1.3 ltv1~(Δ14/Δ14)突变体的永久造血缺陷 | 第35-38页 |
3.1.4 ltv1~(Δ14/Δ14)突变体中外分泌胰腺祖细胞和HSPC的增殖缺陷 | 第38-39页 |
3.1.5 ltv1在斑马鱼胚胎中的时空表达模式 | 第39-40页 |
3.1.6 ltv1~(Δ14/Δ14)突变体中 18s rRNA加工过程的缺陷 | 第40-41页 |
3.1.7 ltv1~(Δ14/Δ14)突变体表型的p53非依赖性 | 第41-44页 |
第四章 结论 | 第44-46页 |
第五章 讨论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-56页 |
致谢 | 第56页 |