| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 符号表 | 第8-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-29页 |
| 1.1 鸡新城疫研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1.1 ND病原学研究 | 第13-14页 |
| 1.1.2 NDV分子生物学研究 | 第14-15页 |
| 1.1.3 ND流行病学研究 | 第15-16页 |
| 1.1.4 ND的诊断与防制 | 第16-18页 |
| 1.2 鸡传染性法氏囊研究进展 | 第18-22页 |
| 1.2.1 IBD病原学研究 | 第19页 |
| 1.2.2 IBD流行病学研究 | 第19-20页 |
| 1.2.3 IBD的诊断 | 第20页 |
| 1.2.4 IBD的防治 | 第20-22页 |
| 1.3 减毒沙门菌作为疫苗活载体的研究进展 | 第22-27页 |
| 1.3.1 沙门菌减毒的相关基因 | 第22-23页 |
| 1.3.2 减毒沙门菌诱导的免疫应答 | 第23-24页 |
| 1.3.3 减毒沙门菌载体的优缺点 | 第24-25页 |
| 1.3.4 减毒沙门菌载体的应用 | 第25-27页 |
| 1.4 展望 | 第27-29页 |
| 第2章 NDV HN和IBDV VP2融合蛋白的原核表达及鉴定 | 第29-43页 |
| 2.1 材料 | 第29-32页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第29-30页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.3 主要培养基、试剂的配制 | 第30-32页 |
| 2.1.4 主要实验器材 | 第32页 |
| 2.2 方法 | 第32-37页 |
| 2.2.1 目的基因的扩增 | 第32-33页 |
| 2.2.2 目的基因的回收 | 第33页 |
| 2.2.3 融合基因片段的获取 | 第33-34页 |
| 2.2.4 DH5α感受态细胞的制备 | 第34页 |
| 2.2.5 重组质粒pMD19-T-HN-VP2的构建 | 第34-35页 |
| 2.2.6 重组质粒的提取 | 第35页 |
| 2.2.7 重组质粒pMD19-T-HN-VP2的鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2.8 重组质粒pET32a-HN-VP2的构建及鉴定 | 第36页 |
| 2.2.9 融合蛋白的表达及鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3 结果与分析 | 第37-42页 |
| 2.3.1 HN基因片段及VP2主要抗原片段的扩增 | 第37-38页 |
| 2.3.2 融合基因HN-VP2扩增结果 | 第38-39页 |
| 2.3.3 重组质粒pMD19-T-HN-VP2的PCR鉴定 | 第39页 |
| 2.3.4 重组质粒pMD19-T-HN-VP2的双酶切鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3.5 重组质粒pET32a-HN-VP2的PCR鉴定 | 第40页 |
| 2.3.6 重组质粒pET32a-HN-VP2的双酶切鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3.7 SDS-PAGE检测HN-VP2融合蛋白的表达 | 第41页 |
| 2.3.8 Western Blot检测结果 | 第41-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-43页 |
| 第3章 表达NDV HN和IBDV VP2融合蛋白的重组减毒沙门菌的构建及生物学特性分析 | 第43-55页 |
| 3.1 材料 | 第43-45页 |
| 3.1.1 菌株及质粒 | 第43-44页 |
| 3.1.2 试剂及培养基 | 第44页 |
| 3.1.3 试剂及培养基配制方法 | 第44-45页 |
| 3.1.4 实验动物 | 第45页 |
| 3.1.5 实验器材 | 第45页 |
| 3.2 方法 | 第45-48页 |
| 3.2.1 HN-VP2融合基因的获取 | 第45页 |
| 3.2.2 重组质粒pMD19-T-HN-VP2的构建 | 第45页 |
| 3.2.3 重组质粒pMD19-T-HN-VP2的鉴定 | 第45-46页 |
| 3.2.4 重组载体pYA-HN-VP2的构建 | 第46页 |
| 3.2.5 沙门菌（SL1344Δcrp?cya?asd）感受态的制备 | 第46页 |
| 3.2.6 沙门菌的电转化 | 第46页 |
| 3.2.7 重组菌SL1344Δcrp?cya?asd (pYA-HN-VP2)的鉴定 | 第46页 |
| 3.2.8 重组菌SL1344Δcrp?cya?asd (pYA-HN-VP2)的表型及生化鉴定 | 第46-47页 |
| 3.2.9 重组菌 SL1344Δcrp?cya?asd (p YA-HN-VP2)的生长特性测定 | 第47页 |
| 3.2.10 融合基因在重组菌株中的遗传稳定性检测 | 第47页 |
| 3.2.11 重组蛋白在沙门菌中的表达及鉴定 | 第47页 |
| 3.2.12 重组菌SL1344Δcrp?cya?asd (pYA-HN-VP2)对雏鸡的毒力试验 | 第47-48页 |
| 3.3 结果 | 第48-52页 |
| 3.3.1 重组菌SL1344Δcrp?cya?asd (pYA-HN-VP2)的PCR鉴定 | 第48页 |
| 3.3.2 重组菌SL1344Δcrp?cya?asd (pYA-HN-VP2)的双酶切鉴定 | 第48-49页 |
| 3.3.3 重组菌SL1344Δcrp?cya?asd (pYA-HN-VP2)的表型及生化鉴定 | 第49页 |
| 3.3.4 重组菌 SL1344Δcrp?cya?asd (p YA-HN-VP2)的生长曲线测定 | 第49-50页 |
| 3.3.5 重组菌的遗传稳定性检测 | 第50-51页 |
| 3.3.6 融合蛋白在重组菌中的表达 | 第51-52页 |
| 3.3.7 重组菌株对雏鸡的毒力试验 | 第52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-55页 |
| 第4章 减毒重组菌SL1344Δcrp?cya?asd(pYA-HN-VP2)的免疫学特性研究 | 第55-75页 |
| 4.1 材料 | 第55-57页 |
| 4.1.1 菌株 | 第55页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第55-56页 |
| 4.1.3 主要试剂的配制 | 第56页 |
| 4.1.4 实验动物 | 第56页 |
| 4.1.5 仪器设备 | 第56-57页 |
| 4.2 方法 | 第57-60页 |
| 4.2.1 雏鸡的免疫 | 第57页 |
| 4.2.2 雏鸡免疫后的体重变化 | 第57页 |
| 4.2.3 免疫雏鸡的免疫器官指数测定 | 第57页 |
| 4.2.4 NDV抗体水平测定 | 第57-58页 |
| 4.2.5 间接ELISA法检测IBDV VP2抗体水平 | 第58页 |
| 4.2.6 淋巴细胞增殖活性检测 | 第58-59页 |
| 4.2.7 免疫雏鸡消化道sIgA抗体水平的测定 | 第59页 |
| 4.2.8 免疫雏鸡血清中IFN-γ水平的测定 | 第59-60页 |
| 4.2.9 免疫雏鸡血清中IL-4 水平的测定 | 第60页 |
| 4.2.10 重组菌株对鸡的免疫保护效力试验 | 第60页 |
| 4.2.11 数据分析 | 第60页 |
| 4.3 结果 | 第60-71页 |
| 4.3.1 雏鸡体重变化测定 | 第60-61页 |
| 4.3.2 免疫雏鸡免疫器官指数的测定 | 第61-65页 |
| 4.3.3 免疫雏鸡体内新城疫HI抗体水平的测定 | 第65页 |
| 4.3.4 免疫雏鸡体内鸡传染性法氏囊VP2抗体水平的测定 | 第65-66页 |
| 4.3.5 淋巴细胞增殖试验 | 第66-67页 |
| 4.3.6 免疫雏鸡消化道sIgA抗体水平的测定 | 第67-68页 |
| 4.3.7 免疫雏鸡血清中IFN-γ水平的测定 | 第68-69页 |
| 4.3.8 免疫雏鸡血清中IL-4 水平的测定 | 第69-70页 |
| 4.3.9 重组菌对鸡的免疫保护效力试验 | 第70-71页 |
| 4.4 讨论 | 第71-75页 |
| 第5章 结论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 附录Ⅰ 主要仪器设备 | 第85-86页 |
| 附录Ⅱ HN-VP2测序结果 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 硕士期间的研究成果 | 第89页 |
