| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-24页 |
| 1.1 三酮类除草剂的研究概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 三酮类除草剂发展史 | 第13-14页 |
| 1.1.2 三酮类除草剂的构效关系 | 第14-15页 |
| 1.1.3 三酮类除草剂特性 | 第15-16页 |
| 1.2 甲基磺草酮的概述 | 第16-18页 |
| 1.2.1 甲基磺草酮的理化性质 | 第16-17页 |
| 1.2.2 甲基磺草酮的毒理学参数 | 第17页 |
| 1.2.3 甲基磺草酮的作用机制 | 第17-18页 |
| 1.3 土壤微生物的研究方法 | 第18-21页 |
| 1.3.1 微生物数量 | 第19页 |
| 1.3.2 土壤酶 | 第19-20页 |
| 1.3.3 末端限制性片段长度多态性分析技术（T-RFLP） | 第20页 |
| 1.3.4 实时荧光定量PCR技术（RT-PCR） | 第20-21页 |
| 1.4 土壤蚯蚓的研究方法 | 第21-23页 |
| 1.4.1 活性氧自由基（ROS） | 第21页 |
| 1.4.2 抗氧化酶系（SOD、CAT和POD）概述 | 第21-22页 |
| 1.4.3 谷胱甘肽硫转移酶（GST）概述 | 第22-23页 |
| 1.4.4 丙二醛（MDA）概述 | 第23页 |
| 1.4.5 单细胞凝胶电泳（SCGE）概述 | 第23页 |
| 1.5 课题研究的主要内容 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 土壤酶及土壤微生物试验的供试土壤 | 第24页 |
| 2.1.2 蚯蚓毒性试验土壤材料与供试蚯蚓 | 第24页 |
| 2.1.3 药品试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要设备和仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-50页 |
| 2.2.1 试验设计与土壤染毒 | 第26-27页 |
| 2.2.1.1 土壤酶与土壤微生物试验设计与土壤染毒 | 第26页 |
| 2.2.1.2 蚯蚓毒性试验设计及染毒 | 第26-27页 |
| 2.2.2 甲基磺草酮对土壤微生物数量的影响 | 第27-28页 |
| 2.2.2.1 土壤稀释液制备 | 第27页 |
| 2.2.2.2 细菌计数 | 第27页 |
| 2.2.2.3 真菌计数 | 第27页 |
| 2.2.2.4 放线菌计数 | 第27-28页 |
| 2.2.2.5 土壤含菌量的计算 | 第28页 |
| 2.2.2.6 数据处理 | 第28页 |
| 2.2.3 甲基磺草酮对土壤酶的影响 | 第28-33页 |
| 2.2.3.1 脲酶测定 | 第28-30页 |
| 2.2.3.2 磷酸酶测定 | 第30-32页 |
| 2.2.3.3 β-葡萄糖苷酶测定 | 第32-33页 |
| 2.2.4 末端限制性片段长度多样性（T-RFLP）实验 | 第33-35页 |
| 2.2.4.1 土壤总DNA的提取 | 第33-34页 |
| 2.2.4.2 细菌 16s RNA片段的PCR扩增 | 第34-35页 |
| 2.2.4.3 16s rDNA片段的酶切 | 第35页 |
| 2.2.4.4 T-RFLP检测及数据分析 | 第35页 |
| 2.2.5 氨氧化微生物基因表达丰度——RT-PCR实验 | 第35-41页 |
| 2.2.5.1 土壤的基因组DNA的提取 | 第35页 |
| 2.2.5.2 amoA基因的PCR扩增 | 第35-37页 |
| 2.2.5.3 连接转化 | 第37页 |
| 2.2.5.4 质粒的提取 | 第37-38页 |
| 2.2.5.5 质粒的鉴定 | 第38-39页 |
| 2.2.5.6 质粒标准品的制备 | 第39页 |
| 2.2.5.7 标准曲线制作 | 第39-41页 |
| 2.2.5.8 样品的实时荧光定量PCR检测 | 第41页 |
| 2.2.5.9 数据统计与分析 | 第41页 |
| 2.2.6 甲基磺草酮对赤子爱胜蚓生态毒性及DNA损伤 | 第41-50页 |
| 2.2.6.1 蚯蚓酶液制备 | 第41页 |
| 2.2.6.2 酶液蛋白含量的测定 | 第41-42页 |
| 2.2.6.3 ROS含量测定 | 第42-43页 |
| 2.2.6.4 蚯蚓体内SOD活性测定 | 第43-45页 |
| 2.2.6.5 蚯蚓体内CAT活性测定 | 第45页 |
| 2.2.6.6 蚯蚓体内POD活性测定 | 第45-46页 |
| 2.2.6.7 蚯蚓体内GST活性测定 | 第46-47页 |
| 2.2.6.8 蚯蚓体内MDA含量测定 | 第47页 |
| 2.2.6.9 蚯蚓体腔细胞DNA损伤的测定 | 第47-50页 |
| 2.3 数据处理 | 第50-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-68页 |
| 3.1 甲基磺草酮对土壤中微生物数量的影响 | 第51-53页 |
| 3.1.1 甲基磺草酮对土壤中的细菌数量影响 | 第51页 |
| 3.1.2 甲基磺草酮对土壤中的真菌数量影响 | 第51-52页 |
| 3.1.3 甲基磺草酮对土壤中的放线菌数量影响 | 第52-53页 |
| 3.2 甲基磺草酮对土壤的酶活性影响 | 第53-56页 |
| 3.2.1 甲基磺草酮对土壤中的脲酶活性影响 | 第53-54页 |
| 3.2.2 甲基磺草酮对土壤中的磷酸酶活性影响 | 第54-55页 |
| 3.2.3 甲基磺草酮对土壤中的 β-葡萄糖苷酶活性影响 | 第55-56页 |
| 3.3 甲基磺草酮对土壤微生物群落的结构变化影响 | 第56-58页 |
| 3.4 甲基磺草酮对土壤AOA基因拷贝数的影响 | 第58-59页 |
| 3.5 甲基磺草酮对土壤AOB基因拷贝数的影响 | 第59页 |
| 3.6 甲基磺草酮对赤子爱胜蚓的生态毒性及DNA损伤 | 第59-68页 |
| 3.6.1 甲基磺草酮对蚯蚓体内ROS含量的影响 | 第59-60页 |
| 3.6.2 甲基磺草酮对蚯蚓抗氧化酶（SOD、CAT、POD）活性的影响 | 第60-63页 |
| 3.6.2.1 甲基磺草酮对蚯蚓超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响 | 第60-61页 |
| 3.6.2.2 甲基磺草酮对蚯蚓过氧化氢酶（CAT）活性的影响 | 第61-62页 |
| 3.6.2.3 甲基磺草酮对蚯蚓过氧化物酶（POD）活性的影响 | 第62-63页 |
| 3.6.3 甲基磺草酮对蚯蚓过氧化物酶（GST）活性的影响 | 第63页 |
| 3.6.4 甲基磺草酮对蚯蚓体内MDA含量的影响 | 第63-64页 |
| 3.6.5 甲基磺草酮对蚯蚓体腔细胞DNA损伤的影响 | 第64-65页 |
| 3.6.5.1 彗星图像 | 第64-65页 |
| 3.6.5.2 甲基磺草酮对蚯蚓体腔细胞的DNA损伤程度的影响 | 第65页 |
| 3.6.6 各个指标双因素方差分析 | 第65-68页 |
| 4 讨论 | 第68-73页 |
| 4.1 甲基磺草酮对土壤中微生物的数量和土壤酶活性的影响 | 第68-69页 |
| 4.2 甲基磺草酮对土壤微生物群落结构多样性的影响 | 第69-70页 |
| 4.3 甲基磺草酮对土壤功能微生物基因表达丰度的影响 | 第70页 |
| 4.4 甲基磺草酮对赤子爱胜蚓的生态毒性及DNA损伤 | 第70-73页 |
| 4.4.1 甲基磺草酮对蚯蚓体内ROS含量的影响 | 第70页 |
| 4.4.2 甲基磺草酮对蚯蚓抗氧化酶活性的影响 | 第70-71页 |
| 4.4.3 甲基磺草酮对蚯蚓GST活性的影响 | 第71-72页 |
| 4.4.4 甲基磺草酮对蚯蚓MDA含量的影响 | 第72页 |
| 4.4.5 甲基磺草酮对蚯蚓的体腔细胞DNA的损伤 | 第72-73页 |
| 5 结论 | 第73-75页 |
| 6 本论文创新与不足之处 | 第75-76页 |
| 7 参考文献 | 第76-86页 |
| 8 致谢 | 第86-87页 |
| 9 攻读学位期间发表论文 | 第87页 |
