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离子液体[C8mim]BF4和[C8mim]NO3对土壤微生物群落多样性的影响

符号说明第4-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-21页
    1.1 离子液体概况第12-13页
        1.1.1 离子液体定义第12页
        1.1.2 离子液体的特点第12页
        1.1.3 离子液体的应用第12-13页
    1.2 离子液体的毒性第13-15页
        1.2.1 离子液体对植物的影响第14页
        1.2.2 离子液体对土壤动物的影响第14页
        1.2.3 离子液体对水生生物的影响第14-15页
        1.2.4 离子液体对微生物的影响第15页
    1.3 土壤微生物生态学研究方法第15-19页
        1.3.1 平板计数法第16-17页
        1.3.2 土壤酶第17页
        1.3.3 微生物群落多样性第17-19页
    1.4 小结第19-21页
2 材料与方法第21-44页
    2.1 药品试剂第21页
    2.2 仪器设备第21-22页
    2.3 实验土壤第22-23页
        2.3.1 土样基本理化性质第22页
        2.3.2 土壤染毒第22-23页
    2.4 土壤中离子液体含量的测定第23-25页
        2.4.1 试剂配制第23页
        2.4.2 标准曲线绘制与液相色谱测定条件第23-24页
        2.4.3 添加回收率实验第24-25页
        2.4.4 样品中[C_8mim]BF_4和[C_8mim]NO_3含量的测定第25页
    2.5 平板计数第25-26页
        2.5.1 培养基配置第25页
        2.5.2 土壤稀释液制备第25页
        2.5.3 涂板与微生物计数第25-26页
        2.5.4 土壤含菌量的计算第26页
        2.5.5 数据处理第26页
    2.6 土壤酶活性的测定第26-34页
        2.6.1 脲酶测定第26-28页
        2.6.2 脱氢酶测定第28-30页
        2.6.3 酸性磷酸酶测定第30-32页
        2.6.4 β-葡糖苷酶测定第32-33页
        2.6.5 数据统计与处理第33-34页
    2.7 末端限制性片段长度多态性(T-RFLP)第34-36页
        2.7.1 土壤总DNA提取第34页
        2.7.2 细菌 16s RNA片段的PCR扩增第34-36页
        2.7.3 16s PCR片段的酶切第36页
        2.7.4 T-RFLP检测及数据分析第36页
    2.8 氨氧化微生物基因表达丰度—RT-PCR第36-44页
        2.8.1 土壤总DNA提取第36页
        2.8.2 amoA基因的PCR扩增第36-38页
        2.8.3 连接转化第38-39页
        2.8.4 质粒提取第39页
        2.8.5 质粒鉴定第39-40页
        2.8.6 质粒标准品的制备第40页
        2.8.7 标准曲线的制作第40-43页
        2.8.8 样品的实时荧光定量PCR检测第43页
        2.8.9 数据统计与分析第43-44页
3 结果与分析第44-62页
    3.1 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3在土壤中的浓度变化第44-45页
    3.2 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤可培养微生物数量的影响第45-47页
        3.2.1 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤中细菌数量的影响第45-46页
        3.2.2 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤中真菌数量的影响第46页
        3.2.3 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤中放线菌数量的影响第46-47页
    3.3 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤酶活性的影响第47-50页
        3.3.1 [C_8mim]BF_4对土壤酶活性的影响第47-49页
        3.3.2 [C_8mim]NO_3对土壤酶的活性第49-50页
    3.4 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤微生物群落结构多样性的影响第50-57页
        3.4.1 [C_8mim]BF_4对土壤微生物群落结构多样性的影响第50-53页
        3.4.2 [C_8mim]NO_3对土壤微生物群落结构多样性的影响第53-56页
        3.4.3 T-RFs片段菌种推测第56-57页
    3.5 [C_8mim]BF_4和[C_8mim]NO_3对土壤功能微生物基因表达丰度的影响第57-62页
        3.5.1 AOA基因表达丰度的变化第57-59页
        3.5.2 AOB基因表达丰度的变化第59-62页
4 讨论第62-66页
    4.1 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3在土壤中的浓度变化第62页
    4.2 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤可培养微生物数量的影响第62-63页
    4.3 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤酶活性的影响第63-64页
    4.4 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤微生物群落结构多样性的影响第64-65页
    4.5 [C_8mim]BF_4和[C_8mim]NO_3对土壤功能微生物基因表达丰度的影响第65-66页
5 结论第66-67页
6 创新与不足之处第67-68页
7 参考文献第68-76页
8 致谢第76-77页
9 攻读学位期间发表论文第77页

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