符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-21页 |
1.1 离子液体概况 | 第12-13页 |
1.1.1 离子液体定义 | 第12页 |
1.1.2 离子液体的特点 | 第12页 |
1.1.3 离子液体的应用 | 第12-13页 |
1.2 离子液体的毒性 | 第13-15页 |
1.2.1 离子液体对植物的影响 | 第14页 |
1.2.2 离子液体对土壤动物的影响 | 第14页 |
1.2.3 离子液体对水生生物的影响 | 第14-15页 |
1.2.4 离子液体对微生物的影响 | 第15页 |
1.3 土壤微生物生态学研究方法 | 第15-19页 |
1.3.1 平板计数法 | 第16-17页 |
1.3.2 土壤酶 | 第17页 |
1.3.3 微生物群落多样性 | 第17-19页 |
1.4 小结 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-44页 |
2.1 药品试剂 | 第21页 |
2.2 仪器设备 | 第21-22页 |
2.3 实验土壤 | 第22-23页 |
2.3.1 土样基本理化性质 | 第22页 |
2.3.2 土壤染毒 | 第22-23页 |
2.4 土壤中离子液体含量的测定 | 第23-25页 |
2.4.1 试剂配制 | 第23页 |
2.4.2 标准曲线绘制与液相色谱测定条件 | 第23-24页 |
2.4.3 添加回收率实验 | 第24-25页 |
2.4.4 样品中[C_8mim]BF_4和[C_8mim]NO_3含量的测定 | 第25页 |
2.5 平板计数 | 第25-26页 |
2.5.1 培养基配置 | 第25页 |
2.5.2 土壤稀释液制备 | 第25页 |
2.5.3 涂板与微生物计数 | 第25-26页 |
2.5.4 土壤含菌量的计算 | 第26页 |
2.5.5 数据处理 | 第26页 |
2.6 土壤酶活性的测定 | 第26-34页 |
2.6.1 脲酶测定 | 第26-28页 |
2.6.2 脱氢酶测定 | 第28-30页 |
2.6.3 酸性磷酸酶测定 | 第30-32页 |
2.6.4 β-葡糖苷酶测定 | 第32-33页 |
2.6.5 数据统计与处理 | 第33-34页 |
2.7 末端限制性片段长度多态性(T-RFLP) | 第34-36页 |
2.7.1 土壤总DNA提取 | 第34页 |
2.7.2 细菌 16s RNA片段的PCR扩增 | 第34-36页 |
2.7.3 16s PCR片段的酶切 | 第36页 |
2.7.4 T-RFLP检测及数据分析 | 第36页 |
2.8 氨氧化微生物基因表达丰度—RT-PCR | 第36-44页 |
2.8.1 土壤总DNA提取 | 第36页 |
2.8.2 amoA基因的PCR扩增 | 第36-38页 |
2.8.3 连接转化 | 第38-39页 |
2.8.4 质粒提取 | 第39页 |
2.8.5 质粒鉴定 | 第39-40页 |
2.8.6 质粒标准品的制备 | 第40页 |
2.8.7 标准曲线的制作 | 第40-43页 |
2.8.8 样品的实时荧光定量PCR检测 | 第43页 |
2.8.9 数据统计与分析 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-62页 |
3.1 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3在土壤中的浓度变化 | 第44-45页 |
3.2 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤可培养微生物数量的影响 | 第45-47页 |
3.2.1 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤中细菌数量的影响 | 第45-46页 |
3.2.2 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤中真菌数量的影响 | 第46页 |
3.2.3 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤中放线菌数量的影响 | 第46-47页 |
3.3 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤酶活性的影响 | 第47-50页 |
3.3.1 [C_8mim]BF_4对土壤酶活性的影响 | 第47-49页 |
3.3.2 [C_8mim]NO_3对土壤酶的活性 | 第49-50页 |
3.4 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤微生物群落结构多样性的影响 | 第50-57页 |
3.4.1 [C_8mim]BF_4对土壤微生物群落结构多样性的影响 | 第50-53页 |
3.4.2 [C_8mim]NO_3对土壤微生物群落结构多样性的影响 | 第53-56页 |
3.4.3 T-RFs片段菌种推测 | 第56-57页 |
3.5 [C_8mim]BF_4和[C_8mim]NO_3对土壤功能微生物基因表达丰度的影响 | 第57-62页 |
3.5.1 AOA基因表达丰度的变化 | 第57-59页 |
3.5.2 AOB基因表达丰度的变化 | 第59-62页 |
4 讨论 | 第62-66页 |
4.1 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3在土壤中的浓度变化 | 第62页 |
4.2 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤可培养微生物数量的影响 | 第62-63页 |
4.3 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤酶活性的影响 | 第63-64页 |
4.4 [C_8mim]BF_4与[C_8mim]NO_3对土壤微生物群落结构多样性的影响 | 第64-65页 |
4.5 [C_8mim]BF_4和[C_8mim]NO_3对土壤功能微生物基因表达丰度的影响 | 第65-66页 |
5 结论 | 第66-67页 |
6 创新与不足之处 | 第67-68页 |
7 参考文献 | 第68-76页 |
8 致谢 | 第76-77页 |
9 攻读学位期间发表论文 | 第77页 |