| 符号说明 | 第4-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 1. 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 抗生素的概况 | 第11-13页 |
| 1.1.1 抗生素的种类 | 第11页 |
| 1.1.2 抗生素的应用现状 | 第11-12页 |
| 1.1.3 抗生素在土壤环境中的行为 | 第12-13页 |
| 1.2 抗生素耐药菌的耐药性 | 第13-15页 |
| 1.2.1 细菌耐药性的产生机制 | 第13-14页 |
| 1.2.2 多重耐药菌的出现 | 第14-15页 |
| 1.3 抗生素抗性基因的概况 | 第15-18页 |
| 1.3.1 抗性基因的来源与分布 | 第15页 |
| 1.3.2 抗性基因的抗性机制 | 第15-16页 |
| 1.3.3 抗性基因的传播与环境风险 | 第16-17页 |
| 1.3.4 抗性基因的检测手段 | 第17-18页 |
| 1.4 抗性基因与土壤理化性质、抗生素、耐药菌及可移动元件的相关性 | 第18-19页 |
| 1.5 本论文的研究意义及内容 | 第19-20页 |
| 2. 材料与方法 | 第20-32页 |
| 2.1 药品试剂 | 第20-21页 |
| 2.2 仪器设备 | 第21页 |
| 2.3 土壤样品的采集和理化性质的测定 | 第21-23页 |
| 2.4 土壤样品中抗生素含量的检测 | 第23-24页 |
| 2.5 土样中可培养细菌及耐药菌计数 | 第24-26页 |
| 2.5.1 溶液配制 | 第25页 |
| 2.5.2 可培养细菌的计数 | 第25页 |
| 2.5.3 抗生素耐药菌的计数 | 第25-26页 |
| 2.6 土样中抗生素耐药菌的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.6.1 溶液配制 | 第26页 |
| 2.6.2 抗生素耐药菌的纯化培养 | 第26页 |
| 2.6.3 抗生素耐药菌DNA的提取 | 第26页 |
| 2.6.4 抗生素耐药菌的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.7 土壤样品中ARGs的定性检测 | 第27-29页 |
| 2.7.1 土壤样品中总DNA的提取 | 第27页 |
| 2.7.2 ARGs和MGEs的定性PCR检测 | 第27-29页 |
| 2.8 土壤样品中ARGs的定量检测 | 第29-32页 |
| 2.8.1 试剂及培养基的配制 | 第29-30页 |
| 2.8.2 目标基因片段回收纯化 | 第30页 |
| 2.8.3 连接转化 | 第30页 |
| 2.8.4 质粒的提取与鉴定 | 第30-31页 |
| 2.8.5 基因拷贝数的计算及质粒标准品的制备 | 第31页 |
| 2.8.6 Real-time qPCR标准曲线的制备 | 第31页 |
| 2.8.7 土壤样品中抗性基因的含量检测 | 第31-32页 |
| 2.9 数据分析 | 第32页 |
| 3. 结果与分析 | 第32-53页 |
| 3.1 土壤中抗生素含量检测结果 | 第32-33页 |
| 3.2 土样中可培养细菌的耐药性 | 第33-38页 |
| 3.2.1 可培养耐药菌的数量 | 第33-36页 |
| 3.2.2 可培养细菌的耐药率 | 第36-38页 |
| 3.3 抗生素耐药菌的鉴定 | 第38-44页 |
| 3.4 土样中抗性基因的定性检测 | 第44-45页 |
| 3.5 土样中抗性基因的定量检测 | 第45-51页 |
| 3.6 抗性基因与理化性质、抗生素含量、耐药菌数量及可移动元件的相关性 | 第51-53页 |
| 4. 讨论 | 第53-59页 |
| 4.1 土样中抗生素的残留 | 第53-54页 |
| 4.2 可培养细菌的耐药性 | 第54-55页 |
| 4.3 可培养耐药菌的多样性 | 第55-56页 |
| 4.4 抗性基因的多样性及丰度 | 第56-58页 |
| 4.5 抗性基因与理化性质、抗生素含量、耐药菌数量及可移动元件的相关性 | 第58-59页 |
| 5. 结论 | 第59页 |
| 6. 创新之处 | 第59-61页 |
| 7. 参考文献 | 第61-67页 |
| 8. 致谢 | 第67-68页 |
| 9. 攻读硕士期间发表论文情况 | 第68页 |
