致谢 | 第7-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10页 |
1 绪论 | 第14-27页 |
1.1 井冈霉素研究背景 | 第14-18页 |
1.1.1 井冈霉素的发现及结构性质 | 第14-16页 |
1.1.2 井冈霉素的应用 | 第16-17页 |
1.1.3 井冈霉素的生物合成途径 | 第17-18页 |
1.2 井冈霉素发酵研究进展 | 第18-20页 |
1.3 pH对链霉菌发酵的影响 | 第20-24页 |
1.3.1 pH是影响发酵的重要因素 | 第20-22页 |
1.3.2 pH对链霉菌发酵的影响 | 第22页 |
1.3.3 链霉菌对pH的响应机制 | 第22-24页 |
1.3.4 井冈霉素发酵pH研究 | 第24页 |
1.4 本研究的目的内容与意义 | 第24-27页 |
1.4.1 研究目的和内容 | 第24-26页 |
1.4.2 本研究的意义 | 第26-27页 |
2 pH冲击对吸水链霉菌5008产井冈霉素的影响研究 | 第27-46页 |
2.1 材料与仪器 | 第27-28页 |
2.1.1 菌种 | 第27页 |
2.1.2 主要试剂 | 第27-28页 |
2.1.3 主要仪器 | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-34页 |
2.2.1 培养基与溶液配制 | 第28-29页 |
2.2.2 菌体培养与发酵 | 第29-32页 |
2.2.3 井冈霉素产量检测 | 第32-33页 |
2.2.4 吸水链霉菌5008生物量测定 | 第33-34页 |
2.2.5 发酵培养基残糖测定 | 第34页 |
2.2.6 发酵液pH的测定 | 第34页 |
2.2.7 数据处理与分析 | 第34页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第34-44页 |
2.3.1 不同pH处理对井冈霉素产量的影响 | 第34-36页 |
2.3.2 不同pH冲击处理剂处理对井冈霉素产量的影响 | 第36-37页 |
2.3.3 不同时间进行pH冲击对井冈霉素产量的影响 | 第37-38页 |
2.3.4 不同pH冲击次数对井冈霉素产量的影响 | 第38-40页 |
2.3.5 pH冲击对吸水链霉菌5008发酵过程中生物量的影响 | 第40-42页 |
2.3.6 pH冲击对吸水链霉菌5008发酵过程中糖的消耗的影响 | 第42-43页 |
2.3.7 pH冲击对吸水链霉菌5008发酵过程中发酵液pH的影响 | 第43-44页 |
本章小结 | 第44-46页 |
3 pH冲击对吸水链霉菌5008转录组的影响及生物信息学分析 | 第46-62页 |
3.1 材料与仪器 | 第46-47页 |
3.1.1 菌种 | 第46页 |
3.1.2 主要试剂 | 第46页 |
3.1.3 溶液配制 | 第46-47页 |
3.1.4 主要仪器 | 第47页 |
3.2 实验方法 | 第47-52页 |
3.2.1 引物设计 | 第47-48页 |
3.2.2 吸水链霉菌5008总RNA的提取 | 第48-49页 |
3.2.3 cDNA合成 | 第49-50页 |
3.2.4 反转录PCR反应 | 第50-51页 |
3.2.5 qRT-PCR反应 | 第51-52页 |
3.2.6 数据处理与分析 | 第52页 |
3.3 基因芯片实验 | 第52-54页 |
3.3.1 芯片实验流程(上海伯豪生物技术有限公司) | 第52-54页 |
3.3.2 芯片数据分析 | 第54页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第54-61页 |
3.4.1 基因芯片质控报告与数据统计 | 第54-55页 |
3.4.2 差异表达基因的筛选及功能分类 | 第55-56页 |
3.4.3 差异表达基因的分析 | 第56-60页 |
3.4.4 qRT-PCR验证 | 第60-61页 |
本章小结 | 第61-62页 |
4 pH冲击影响井冈霉素产量的机制研究 | 第62-71页 |
4.1 材料与仪器 | 第62-63页 |
4.1.1 菌种 | 第62页 |
4.1.2 主要试剂 | 第62页 |
4.1.3主要仪器 | 第62-63页 |
4.2 实验方法 | 第63-66页 |
4.2.1 呼吸活性的测定 | 第63页 |
4.2.2 胞内谷氨酸含量检测 | 第63-64页 |
4.2.3 胞内pH的检测 | 第64-66页 |
4.2.4 数据处理 | 第66页 |
4.3 实验结果与讨论 | 第66-70页 |
4.3.1 pH冲击对吸水链霉菌5008细胞呼吸活性的影响 | 第66-67页 |
4.3.2 pH冲击对吸水链霉菌5008细胞内谷氨酸浓度的影响 | 第67-69页 |
4.3.3 pH冲击对吸水链霉菌5008细胞内pH的影响 | 第69-70页 |
本章小结 | 第70-71页 |
5 一种快速检测井冈霉素发酵过程污染的方法 | 第71-89页 |
5.1 材料与仪器 | 第71-72页 |
5.1.1 菌种 | 第71页 |
5.1.2 主要试剂 | 第71-72页 |
5.1.3 主要仪器 | 第72页 |
5.2 实验方法 | 第72-75页 |
5.2.1 培养基配制 | 第72-73页 |
5.2.2 菌体培养与发酵 | 第73-74页 |
5.2.3 GC-MS分析 | 第74-75页 |
5.2.4 数据处理 | 第75页 |
5.3 实验结果与讨论 | 第75-88页 |
5.3.1 不同发酵阶段气味物质的差异 | 第80-82页 |
5.3.2 不同污染菌浓度条件下发酵液气味物质的差异 | 第82-84页 |
5.3.3 不同污染菌株条件下发酵液气味物质的差异 | 第84-86页 |
5.3.4 不同培养基条件下发酵液气味物质的差异 | 第86-88页 |
本章小结 | 第88-89页 |
6 结论与展望 | 第89-92页 |
6.1 主要结论 | 第89-90页 |
6.2 创新点 | 第90页 |
6.3 不足与展望 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-101页 |
作者简介 | 第101页 |