| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-17页 |
| 1.1 抗菌肽的来源 | 第8-10页 |
| 1.1.1 细菌抗菌肽 | 第8页 |
| 1.1.2 昆虫抗菌肽 | 第8-9页 |
| 1.1.3 两栖类抗菌肽 | 第9页 |
| 1.1.4 植物抗菌肽 | 第9页 |
| 1.1.5 哺乳动物抗菌肽 | 第9页 |
| 1.1.6 鱼类抗菌肽 | 第9-10页 |
| 1.2 抗菌肽的作用机制 | 第10-11页 |
| 1.2.1 抗菌肽的细胞膜作用机理 | 第10页 |
| 1.2.2 抗菌肽胞内作用机制 | 第10-11页 |
| 1.3 抗菌肽的应用及前景 | 第11-12页 |
| 1.3.1 抗菌肽在食品领域的应用 | 第11页 |
| 1.3.2 抗菌肽在农业领域的应用 | 第11页 |
| 1.3.3 抗菌肽在医药领域的应用 | 第11-12页 |
| 1.4 抗菌肽基因工程表达策略 | 第12-15页 |
| 1.4.1 抗菌肽在大肠杆菌中的表达 | 第12-13页 |
| 1.4.2 抗菌肽在毕赤酵母中的表达 | 第13-15页 |
| 1.5 贻贝抗菌肽 | 第15页 |
| 1.5.1 贻贝抗菌肽的研究进展 | 第15页 |
| 1.5.2 Mytichitin-A的结构和理化性质 | 第15页 |
| 1.5.3 Mytichitin-A的抗菌活性 | 第15页 |
| 1.6 细菌素 | 第15-17页 |
| 1.6.1 细菌素的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.6.2 抗菌肽Plantaricin ZJ5的理化性质 | 第16页 |
| 1.6.3 抗菌肽Plantaricin ZJ5的抗菌活性 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-24页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 酶与主要试剂 | 第17-19页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.4 培养基的配制 | 第20-21页 |
| 2.1.5 主要溶液的配制 | 第21-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-36页 |
| 2.2.1 抗菌肽Plantaricin ZJ5和Mytichitin-A在大肠杆菌中的表达纯化及活性鉴定 | 第24-30页 |
| 2.2.2 抗菌肽Mytichitin-A在毕赤酵母中的表达纯化及活性鉴定 | 第30-36页 |
| 3 结果与讨论 | 第36-52页 |
| 3.1 抗菌肽Plantaricin ZJ5和Mytichitin-A在大肠杆菌中的表达纯化及活性鉴定 | 第36-43页 |
| 3.1.1 大肠杆菌表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.1.2 重组质粒的鉴定 | 第37-39页 |
| 3.1.3 重组抗菌肽在大肠杆菌BL21中的表达 | 第39-41页 |
| 3.1.4 重组抗菌肽的亲和纯化 | 第41-42页 |
| 3.1.5 GST标签的去除 | 第42页 |
| 3.1.6 重组抗菌肽的活性测定 | 第42-43页 |
| 3.2 抗菌肽Mytichitin-A在毕赤酵母GS115中的表达纯化及活性鉴定 | 第43-52页 |
| 3.2.1 毕赤酵母表达载体pPICZαA-Mytichitin-A的构建 | 第43-44页 |
| 3.2.2 重组质粒pPICZαA-Mytichitin-A的鉴定 | 第44-45页 |
| 3.2.3 重组质粒pPICZαA-Mytichitin-A的线性化 | 第45-46页 |
| 3.2.4 毕赤酵母重组子的PCR鉴定 | 第46页 |
| 3.2.5 Tricine-SDS-PAGE蛋白电泳检测抗菌肽表达 | 第46-47页 |
| 3.2.6 琼脂糖扩散法测定重组抗菌肽Mytichitin-A的活性 | 第47-48页 |
| 3.2.7 不同甲醇浓度对重组抗菌肽的影响 | 第48-49页 |
| 3.2.8 重组抗菌肽Mytichitin-A的抑菌效果 | 第49-50页 |
| 3.2.9 重组抗菌肽Mytichitin-A的亲和纯化 | 第50-51页 |
| 3.2.10 最小抑制浓度MIC (μg/mL)的测定 | 第51-52页 |
| 4 结论 | 第52-53页 |
| 5 展望 | 第53-54页 |
| 6 参考文献 | 第54-61页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第61-62页 |
| 8 致谢 | 第62页 |
