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水稻细菌性条斑病菌中hshB基因及其所在基因簇功能的研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
上篇 文献综述第13-52页
    第一章 水稻细菌性条斑病菌致病机理及其相关毒性因子第14-28页
        1 水稻细菌性条斑病菌的发现、生物学性状、分布及危害第15-17页
            1.1 水稻细菌性条斑病菌的发现第15页
            1.2 水稻细菌性条斑病菌的生物学性状第15-16页
            1.3 水稻细菌性条斑病的分布和危害第16-17页
        2 水稻细菌性条斑病菌的致病机理以及相关毒性因子第17-23页
            2.1 水稻细菌性条斑病菌的致病机理第17页
            2.2 水稻细菌性条斑病菌的毒性因子第17-21页
                2.2.1 胞外多糖和脂多糖第17-18页
                2.2.2 黏附因子第18页
                2.2.3 胞外酶类第18-19页
                2.2.4 毒素第19-20页
                2.2.5 激素第20页
                2.2.6 效应蛋白第20-21页
            2.3 水稻细菌性条斑病菌的毒性因子泌出途径第21-23页
        3 黄单胞属基因组研究概述第23-27页
            3.1 黄单胞菌属基因组特征第24-25页
            3.2 功能基因组学研究进展第25-26页
            3.3 进化趋势第26-27页
        4 前景与展望第27-28页
    第二章 植物病原细菌的信号转导第28-52页
        1 细菌群体感应第28-35页
            1.1 细菌的群体感应及主要类型第28页
            1.2 AHLs介导的群体感应系统第28-30页
            1.3 DSF介导的群体感应系统第30-33页
            1.4 小分子肽类Ax21介导的群体感应系统第33-34页
            1.5 其他信号分子介导的群体感应系统第34-35页
        2 双组份信号转导系统第35-43页
            2.1 双组份系统结构特征及作用机制第35-37页
            2.2 黄单胞属菌基因组中双组份系统概况第37-38页
            2.3 黄单胞属菌中主要的双组份系统第38-43页
                2.3.1 RpfC/RpfG第38-39页
                2.3.2 RavS/RavR第39-41页
                2.3.3 HrpG第41页
                2.3.4 VgrS/VgrR及VemR第41-42页
                2.3.5 RaxH/RaxR及PhoQ/PhoP第42-43页
        3 cyclic di-GMP信号传导机制第43-49页
            3.1 cyclic di-GMP的合成与降解第44-45页
            3.2 cyclic di-GMP介导信号传导第45-47页
                3.2.1 信号输入到c-di-GMP调控网络第45-46页
                3.2.2 c-di-GMP通过结合效应因子输出信号第46-47页
            3.3 cyclic di-GMP调控多种生物学功能第47-48页
            3.4 细胞不同时期内cyclic di-GMP水平第48-49页
        4 前景与展望第49-52页
下篇 研究内容第52-118页
    第一章 转录组数据揭示水稻细菌性条斑病菌中毒性相关基因hshB新功能第54-88页
        1 引言第54-55页
        2 材料与方法第55-70页
            2.1 实验所用菌株、质粒及引物第55-57页
            2.2 培养基、试剂及培养条件第57-59页
                2.2.1 培养基第57-58页
                2.2.2 抗生素、酶及试剂盒第58-59页
                2.2.3 培养条件第59页
            2.3 实验方法第59-70页
                2.3.1 细菌基因组的提取第59-60页
                2.3.2 PCR操作体系第60-61页
                2.3.3 DNA凝胶电泳及DNA片段的胶回收第61-62页
                2.3.4 DNA的酶切、回收及连接第62-63页
                2.3.5 小量质粒的提取第63-64页
                2.3.6 重组质粒的转化第64-65页
                2.3.7 Xoc电转化感受态的制备及电击转化第65-66页
                2.3.8 相对实时荧光定量PCR方法第66-68页
                2.3.9 缺失突变体的构建第68-69页
                2.3.10 致病性测定第69-70页
                2.3.11 运动能力测定第70页
        3 结果与分析第70-84页
            3.1 hshB基因的生物信息学分析第70-72页
            3.2 △hshB运动能力测定第72-74页
            3.3 电镜下观察△hshB鞭毛第74-76页
            3.4 转录组测序分析揭示hshB调控的基因第76-77页
            3.5 转录组数据的验证第77-79页
            3.6 hshB基因与信号分子的关系第79-80页
            3.7 hshB对flhF基因调控的初步分析第80-82页
            3.8 △hshB生物膜形成能力测定第82-83页
            3.9 hshB基因与c-di-GMP受体YajQ的关系第83-84页
        4 讨论第84-88页
    第二章 水稻细菌性条斑病菌中hshB所在nodB-rghB基因簇中致病相关基因的鉴定与功能分析第88-118页
        1 引言第89页
        2 材料与方法第89-100页
            2.1 实验所用菌株、质粒及引物第89-92页
            2.2 培养基、试剂及培养条件第92页
                2.2.1 培养基第92页
                2.2.2 抗生素、酶及试剂盒第92页
                2.2.3 培养条件第92页
            2.3 实验方法第92-100页
                2.3.1 细菌基因组的提取第92页
                2.3.2 PCR操作体系第92页
                2.3.3 DNA凝胶电泳及DNA片段的胶回收第92页
                2.3.4 DNA的酶切、回收及连接第92-93页
                2.3.5 小量质粒的提取第93页
                2.3.6 重组质粒的转化第93页
                2.3.7 Xoc电转化感受态的制备及电击转化第93页
                2.3.8 Southern杂交第93-97页
                2.3.9 DSF信号分子的提取及检测第97-98页
                2.3.10 相对实时荧光定量PCR方法第98页
                2.3.11 缺失突变体的构建第98页
                2.3.12 致病性及定殖能力测定第98-99页
                2.3.13 附生定殖能力的测定第99页
                2.3.14 生长曲线的测定第99-100页
                2.3.15 蛋白酶分泌能力测定第100页
                2.3.16 过氧化氢耐受能力测定第100页
                2.3.17 胞外多糖产生能力测定第100页
        3 结果与分析第100-116页
            3.1 nodB-rhgB基因簇在部分黄单胞属细菌及相关菌中同源基因分析第100-103页
            3.2 Southern杂交验证Xoc中hshA、hshC及hshD基因特异性第103-104页
            3.3 DSF调控hshA、hshC基因的转录第104-106页
            3.4 hshC与hshD基因双交换载体及缺失突变体的构建第106-107页
            3.5 hshA与hshC基因突变在低浓度接种病菌时削弱Xoc水稻上的致病及定殖能力第107-111页
            3.6 hshA与hshC基因突变不影响Xoc的生长能力第111-112页
            3.7 hshA与hshC基因突变削弱Xoc在水稻上的附生定殖能力第112-113页
            3.8 hshA、hshC及hshD基因突变不影响Xoc的胞外蛋白酶产生第113-114页
            3.9 hshA、hshC及hshD基因突变不影响Xoc抗氧化压力能力第114-115页
            3.10 hshA、hshC及hshD基因突变不影响Xoc胞外多糖产生第115-116页
        4 讨论第116-118页
全文总结第118-120页
本论文的创新点第120-122页
攻读博士学位期间发表的论文第122-124页
参考文献第124-144页
致谢第144页

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