| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-19页 |
| 1. 鮰爱德华氏菌及生物学特性 | 第12-14页 |
| ·鮰爱德华氏菌的发现及分类 | 第12页 |
| ·鮰爱德华氏菌的生物学特性 | 第12-13页 |
| ·鮰爱德华氏菌的血清型 | 第13-14页 |
| 2. 鱼类鮰爱德华氏菌病的临床症状和病理变化 | 第14-15页 |
| ·鮰爱德华氏菌的感染宿主 | 第14页 |
| ·鮰爱德华氏菌感染的临床症状和病理变化 | 第14-15页 |
| 3. 鮰爱德华氏菌的毒力因子及致病机制 | 第15-17页 |
| ·透明质酸酶 | 第15页 |
| ·细胞附属物 | 第15页 |
| ·脂多糖 | 第15-16页 |
| ·细胞膜破坏毒素(MDTs) | 第16页 |
| ·外膜蛋白 | 第16-17页 |
| 4. 论文研究的目的意义 | 第17-19页 |
| 第二章 鮰爱德华氏菌ompNs全基因的克隆及生物信息学分析 | 第19-30页 |
| 1. 试验材料 | 第19-20页 |
| ·菌株及载体 | 第19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要试剂配置 | 第20页 |
| 2. 试验方法 | 第20-23页 |
| ·鮰爱德华氏菌ompNs全基因扩增 | 第20-21页 |
| ·ompNs全基因的T-载体克隆与鉴定 | 第21-22页 |
| ·生物信息学分析 | 第22-23页 |
| 3 结果 | 第23-27页 |
| ·ompNs全基因的扩增、T克隆和鉴定 | 第23页 |
| ·ompNs全基因的核酸序列理化特性分析 | 第23-25页 |
| ·ompNs全基因编码的氨基酸序列翻译后的修饰位点预测 | 第25-26页 |
| ·ompNs全基因编码的氨基酸序列的B细胞表位预测 | 第26-27页 |
| ·ompNs全基因编码的蛋白的亚细胞定位预测 | 第27页 |
| 4. 讨论 | 第27-30页 |
| ·ompNs全基因编码的氨基酸序列特性 | 第27-28页 |
| ·ompNs全基因编码的氨基酸序列B细胞表位分析 | 第28-30页 |
| 第三章 鮰爱德华氏菌ompNs功能活性区域克隆,原核表达及免疫原性分析 | 第30-44页 |
| 1. 试验材料 | 第30-32页 |
| ·质粒、菌株和细胞 | 第30页 |
| ·试验动物 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·主要溶液及培养基的配置 | 第31-32页 |
| 2 试验方法 | 第32-37页 |
| ·引物设计与合成 | 第32页 |
| ·PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·纯化PCR产物与pMD19-T连接 | 第33页 |
| ·T克隆ompNs基因的鉴定 | 第33页 |
| ·表达载体pET-32a(+)-pompN1/pompN2/pompN3的构建和表达 | 第33-34页 |
| ·rOmpN1/rOmpN2/rOmpN3的制备与纯化 | 第34-35页 |
| ·兔抗鮰爱德华氏菌多克隆抗体的制备 | 第35-36页 |
| ·兔抗鮰爱德华氏菌的IgG多克隆抗体的纯化 | 第36页 |
| ·Western-blotting检测rOmpNs特异性 | 第36-37页 |
| 3. 结果 | 第37-42页 |
| ·斑点叉尾鮰pompN1/pompN2/pompN3截段基因的扩增、T克隆和鉴定 | 第37-39页 |
| ·重组质粒pET-32a(+)-pompN1/pompN2/pompN3诱导表达及纯化 | 第39-40页 |
| ·兔抗鮰爱德华氏菌多克隆抗体IgG的制备及效价测定 | 第40-41页 |
| ·Western-blotting检测重组rOmpN1/rOmpN2/rOmpN3的特异性 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| ·表达区段的选择 | 第42页 |
| ·表达载体的选择 | 第42-43页 |
| ·原核表达中包涵体的形成及免疫原性分析 | 第43-44页 |
| 第四章 rOmpNs蛋白对斑点叉尾鮰的免疫效果研究 | 第44-68页 |
| 1. 试验材料 | 第44-45页 |
| ·试验菌株 | 第44页 |
| ·试验动物 | 第44-45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| 2. 试验方法 | 第45-50页 |
| ·抗原制备 | 第45页 |
| ·rOmpNs免疫试验 | 第45-46页 |
| ·免疫指标检测 | 第46-48页 |
| ·rOmpNs对斑点叉尾鮰细胞因子转录影响 | 第48-50页 |
| ·统计学分析 | 第50页 |
| 3. 试验结果 | 第50-62页 |
| ·斑点叉尾鮰抗OmpNs抗体效价检测 | 第50-51页 |
| ·补体旁路途径溶血活性的测定(ACH50) | 第51-52页 |
| ·血清溶菌酶活力检测 | 第52-53页 |
| ·血清SOD、AKP、ACP总活性和总蛋白含量测定 | 第53-57页 |
| ·相对免疫保护率 | 第57-59页 |
| ·Real-time PCR分析斑点叉尾鮰相关基因的转录表达情况 | 第59-62页 |
| 4. 讨论 | 第62-68页 |
| ·不同抗原对斑点叉尾鮰血清指标的影响 | 第62-65页 |
| ·不同抗原对斑点叉尾鮰攻毒后死亡率和相对免疫保护率的影响 | 第65-66页 |
| ·不同抗原对斑点叉尾鮰mRNA水平的影响 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 硕士研究生期间发表论文情况 | 第78页 |
