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鲇源拟态弧菌的分离鉴定研究

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 文献综述第11-19页
 1. V.mimicus的微生物学特征第11-13页
   ·分类地位第11页
   ·形态与大小第11页
   ·培养特性第11-12页
   ·生物化学特性第12页
   ·抵抗力及药物敏感性试验第12页
   ·V.mimicus的感染范围及症状第12-13页
 2. 致病机制及相关毒力因子第13-15页
   ·粘附素第13-14页
   ·肠毒素第14页
   ·溶血素第14-15页
   ·其它致病因子第15页
 3. 诊断与防治第15-16页
 4. 南方鲇的养殖及常见疾病第16-18页
   ·南方鲇的生物学特性第16页
   ·南方鲇的常见疾病第16-18页
     ·细菌性疾病第16-17页
     ·真菌性疾病第17页
     ·寄生虫性疾病第17-18页
 5. 目的及意义第18-19页
第二章 拟态弧菌的分离鉴定第19-43页
 1. 材料第19-20页
   ·实验动物第19页
   ·主要试剂第19-20页
   ·主要仪器设备第20页
 2. 方法第20-24页
   ·病原菌的分离第20页
   ·人工感染试验第20-21页
     ·V.mimicus的培养和计数第20-21页
     ·试验动物的分组及感染方式第21页
   ·分离株的鉴定第21-23页
     ·分离菌的形态学观察第21页
     ·生理生化特性鉴定第21-22页
     ·16S rRNA和gyrB基因鉴定第22页
     ·16S rRNA及gyrB基因序列测定及系统发育树构建第22页
     ·基于弧菌系统发育标志性鉴别基因dnaJ的双重PCR检测第22-23页
   ·南方鲇拟态弧菌自然感染的病理学观察第23-24页
     ·临床症状及病理解剖观察第23页
     ·组织病理学观察第23-24页
       ·取材第23页
       ·石蜡切片的制备第23页
       ·HE染色第23-24页
   ·药敏性检测第24页
 3. 结果第24-39页
   ·病原菌的分离与人工感染试验第24-26页
   ·分离株的表型特征第26-28页
     ·细菌的形态第26页
     ·生理生化特性第26-28页
   ·16S rRNA基因和gyrB基因PCR扩增与系统发育学分析第28-30页
   ·双重PCR检测第30页
   ·南方鲇拟态弧菌自然感染的病理学观察第30-38页
     ·临床症状及病理解剖观察第30-34页
     ·组织病理学变化第34-38页
   ·药物敏感性试验第38-39页
 4. 讨论第39-43页
   ·V.mimicus的鉴定第39-40页
   ·V.mimicus感染的临床症状辨析第40页
   ·V.mimicus感染的病理损伤特点第40-41页
   ·V.mimicus感染的防治第41-43页
第三章 鲇源拟态弧菌的生物学特性研究第43-63页
 1. 材料第43页
   ·菌株第43页
   ·主要试剂第43页
   ·主要仪器设备第43页
 2. 方法第43-49页
   ·拟态弧菌基因组DNA提取第43-44页
   ·拟态弧菌毒力基因的检测第44-45页
     ·毒力基因引物设计第44页
     ·各毒力基因PCR扩增程序及条件第44-45页
   ·拟态弧菌溶血素基因(vmh)的克隆与生物信息学分析第45-48页
     ·引物设计第45页
     ·vmh基因的PCR扩增第45-46页
       ·vmh基因的PCR扩增体系第45页
       ·vmh基因的PCR程序第45-46页
     ·vmh基因的T-载体克隆与鉴定第46-48页
       ·目的DNA片段的回收第46页
       ·感受态细胞DH5α的制备第46页
       ·连接第46页
       ·重组克隆质粒转化感受态细胞DH5α第46-47页
       ·重组克隆质粒的鉴定第47-48页
   ·拟态弧菌溶血素基因(vmh)的生物信息学分析第48-49页
 3. 结果第49-59页
   ·毒力基因的检测第49页
   ·vmh基因的克隆第49-51页
     ·vmh基因的PCR扩增第49-50页
     ·PCR产物的单、双酶切鉴定第50页
     ·重组质粒pMD19-T-vmh的PCR鉴定第50-51页
   ·vmh基因的生物信息学分析第51-59页
     ·vmh基因核酸序列的开放阅读狂ORF分析第51页
     ·vmh基因编码的氨基酸序列的理化特性分析第51-52页
     ·vmh基因编码的氨基酸序列的结构域预测第52-53页
     ·vmh基因编码的氨基酸序列的多序列比对第53页
     ·vmh基因编码的氨基酸序列的二级结构预测第53-54页
     ·vmh基因编码的氨基酸序列的柔性区域预测第54-55页
     ·vnh基因编码的氨基酸序列的表面可及性预测第55页
     ·vmh基因编码的氨基酸序列的疏水性预测第55-56页
     ·vnh基因编码的氨基酸序列的信号肽预测第56-57页
     ·vnh基因编码的氨基酸序列的跨膜区预测第57页
     ·vmh基因编码的氨基酸序列的抗原表位预测第57-58页
     ·vmh基因编码的氨基酸翻译后磷酸化和糖基化位点预测第58-59页
 4. 讨论第59-62页
   ·V.mimicus的毒力基因第59-60页
   ·V.mimicus vmh基因的分子特性分析第60-61页
   ·V.mimicus vmh基因编码的氨基酸序列的抗原表位分析第61-62页
 5. 结论第62-63页
参考文献第63-68页
致谢第68-69页
攻读学位期间发表的学术论文第69页

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