中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
1. V.mimicus的微生物学特征 | 第11-13页 |
·分类地位 | 第11页 |
·形态与大小 | 第11页 |
·培养特性 | 第11-12页 |
·生物化学特性 | 第12页 |
·抵抗力及药物敏感性试验 | 第12页 |
·V.mimicus的感染范围及症状 | 第12-13页 |
2. 致病机制及相关毒力因子 | 第13-15页 |
·粘附素 | 第13-14页 |
·肠毒素 | 第14页 |
·溶血素 | 第14-15页 |
·其它致病因子 | 第15页 |
3. 诊断与防治 | 第15-16页 |
4. 南方鲇的养殖及常见疾病 | 第16-18页 |
·南方鲇的生物学特性 | 第16页 |
·南方鲇的常见疾病 | 第16-18页 |
·细菌性疾病 | 第16-17页 |
·真菌性疾病 | 第17页 |
·寄生虫性疾病 | 第17-18页 |
5. 目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 拟态弧菌的分离鉴定 | 第19-43页 |
1. 材料 | 第19-20页 |
·实验动物 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·主要仪器设备 | 第20页 |
2. 方法 | 第20-24页 |
·病原菌的分离 | 第20页 |
·人工感染试验 | 第20-21页 |
·V.mimicus的培养和计数 | 第20-21页 |
·试验动物的分组及感染方式 | 第21页 |
·分离株的鉴定 | 第21-23页 |
·分离菌的形态学观察 | 第21页 |
·生理生化特性鉴定 | 第21-22页 |
·16S rRNA和gyrB基因鉴定 | 第22页 |
·16S rRNA及gyrB基因序列测定及系统发育树构建 | 第22页 |
·基于弧菌系统发育标志性鉴别基因dnaJ的双重PCR检测 | 第22-23页 |
·南方鲇拟态弧菌自然感染的病理学观察 | 第23-24页 |
·临床症状及病理解剖观察 | 第23页 |
·组织病理学观察 | 第23-24页 |
·取材 | 第23页 |
·石蜡切片的制备 | 第23页 |
·HE染色 | 第23-24页 |
·药敏性检测 | 第24页 |
3. 结果 | 第24-39页 |
·病原菌的分离与人工感染试验 | 第24-26页 |
·分离株的表型特征 | 第26-28页 |
·细菌的形态 | 第26页 |
·生理生化特性 | 第26-28页 |
·16S rRNA基因和gyrB基因PCR扩增与系统发育学分析 | 第28-30页 |
·双重PCR检测 | 第30页 |
·南方鲇拟态弧菌自然感染的病理学观察 | 第30-38页 |
·临床症状及病理解剖观察 | 第30-34页 |
·组织病理学变化 | 第34-38页 |
·药物敏感性试验 | 第38-39页 |
4. 讨论 | 第39-43页 |
·V.mimicus的鉴定 | 第39-40页 |
·V.mimicus感染的临床症状辨析 | 第40页 |
·V.mimicus感染的病理损伤特点 | 第40-41页 |
·V.mimicus感染的防治 | 第41-43页 |
第三章 鲇源拟态弧菌的生物学特性研究 | 第43-63页 |
1. 材料 | 第43页 |
·菌株 | 第43页 |
·主要试剂 | 第43页 |
·主要仪器设备 | 第43页 |
2. 方法 | 第43-49页 |
·拟态弧菌基因组DNA提取 | 第43-44页 |
·拟态弧菌毒力基因的检测 | 第44-45页 |
·毒力基因引物设计 | 第44页 |
·各毒力基因PCR扩增程序及条件 | 第44-45页 |
·拟态弧菌溶血素基因(vmh)的克隆与生物信息学分析 | 第45-48页 |
·引物设计 | 第45页 |
·vmh基因的PCR扩增 | 第45-46页 |
·vmh基因的PCR扩增体系 | 第45页 |
·vmh基因的PCR程序 | 第45-46页 |
·vmh基因的T-载体克隆与鉴定 | 第46-48页 |
·目的DNA片段的回收 | 第46页 |
·感受态细胞DH5α的制备 | 第46页 |
·连接 | 第46页 |
·重组克隆质粒转化感受态细胞DH5α | 第46-47页 |
·重组克隆质粒的鉴定 | 第47-48页 |
·拟态弧菌溶血素基因(vmh)的生物信息学分析 | 第48-49页 |
3. 结果 | 第49-59页 |
·毒力基因的检测 | 第49页 |
·vmh基因的克隆 | 第49-51页 |
·vmh基因的PCR扩增 | 第49-50页 |
·PCR产物的单、双酶切鉴定 | 第50页 |
·重组质粒pMD19-T-vmh的PCR鉴定 | 第50-51页 |
·vmh基因的生物信息学分析 | 第51-59页 |
·vmh基因核酸序列的开放阅读狂ORF分析 | 第51页 |
·vmh基因编码的氨基酸序列的理化特性分析 | 第51-52页 |
·vmh基因编码的氨基酸序列的结构域预测 | 第52-53页 |
·vmh基因编码的氨基酸序列的多序列比对 | 第53页 |
·vmh基因编码的氨基酸序列的二级结构预测 | 第53-54页 |
·vmh基因编码的氨基酸序列的柔性区域预测 | 第54-55页 |
·vnh基因编码的氨基酸序列的表面可及性预测 | 第55页 |
·vmh基因编码的氨基酸序列的疏水性预测 | 第55-56页 |
·vnh基因编码的氨基酸序列的信号肽预测 | 第56-57页 |
·vnh基因编码的氨基酸序列的跨膜区预测 | 第57页 |
·vmh基因编码的氨基酸序列的抗原表位预测 | 第57-58页 |
·vmh基因编码的氨基酸翻译后磷酸化和糖基化位点预测 | 第58-59页 |
4. 讨论 | 第59-62页 |
·V.mimicus的毒力基因 | 第59-60页 |
·V.mimicus vmh基因的分子特性分析 | 第60-61页 |
·V.mimicus vmh基因编码的氨基酸序列的抗原表位分析 | 第61-62页 |
5. 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第69页 |