| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-17页 |
| ·选题依据 | 第10-11页 |
| ·NAC转录因子研究进展 | 第11-15页 |
| ·NAC转录因子概述 | 第11-12页 |
| ·NAC转录因子功能及其表达调控 | 第12-15页 |
| ·NAC转录因子的转基因研究 | 第15页 |
| ·实时荧光定量PCR概述 | 第15-16页 |
| ·高通量测序 | 第16页 |
| ·主要研究内容与技术路线 | 第16-17页 |
| ·主要研究内容 | 第16-17页 |
| ·技术路线 | 第17页 |
| 2 慈竹BeNACs基因全长的克隆 | 第17-39页 |
| ·试验材料与主要仪器 | 第17-19页 |
| ·试验材料 | 第17页 |
| ·试验用主要仪器 | 第17-18页 |
| ·试验用主要试剂和菌种 | 第18页 |
| ·试验用其它主要试剂的配制 | 第18-19页 |
| ·试验方法 | 第19-25页 |
| ·慈竹笋总RNA的提取 | 第19页 |
| ·慈竹笋cDNA的合成 | 第19页 |
| ·慈竹BeNACs基因全长克隆 | 第19-24页 |
| ·慈竹BeNACs基因的生物信息学分析 | 第24-25页 |
| ·结果分析 | 第25-39页 |
| ·慈竹BeNACs基因全长克隆 | 第25-33页 |
| ·慈竹BeNACs基因生物信息学分析 | 第33-39页 |
| ·结论 | 第39页 |
| 3 慈竹BeNACs转录活性分析 | 第39-43页 |
| ·试验材料、试剂和仪器 | 第39-41页 |
| ·试验材料 | 第39页 |
| ·试剂配制 | 第39-40页 |
| ·主要仪器 | 第40-41页 |
| ·试验方法 | 第41-42页 |
| ·PEG202载体及引物设计（带酶切位点） | 第41-42页 |
| ·酵母感受态制备以及转化 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-43页 |
| 4 慈竹BeNACs基因的组织表达模式分析 | 第43-49页 |
| ·试验材料与仪器 | 第43页 |
| ·试验材料 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·药品 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-45页 |
| ·慈竹各组织总RNA的提取 | 第43页 |
| ·慈竹各组织cDNA的合成 | 第43页 |
| ·慈竹BeNACs和Tublin基因real-time PCR引物设计 | 第43-44页 |
| ·Real-time PCR引物特异性检测 | 第44-45页 |
| ·Real-Time PCR反应体系与程序 | 第45页 |
| ·数据统计 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-48页 |
| ·RNA完整性和纯度 | 第45-46页 |
| ·引物特异性检测结果 | 第46页 |
| ·慈竹BeNACs基因表达分析 | 第46-48页 |
| ·讨论与结论 | 第48-49页 |
| 5 胁迫处理对慈竹BeNACs转录水平表达的影响 | 第49-52页 |
| ·试验材料、试剂以及仪器设备 | 第49页 |
| ·试验材料 | 第49页 |
| ·试验试剂 | 第49页 |
| ·试验仪器设备 | 第49页 |
| ·试验方法 | 第49-50页 |
| ·慈竹幼苗的培育和胁迫处理 | 第49-50页 |
| ·胁迫处理后总RNA的提取 | 第50页 |
| ·胁迫处理后cDNA的合成 | 第50页 |
| ·慈竹BeNAC2-4 和Tublin基因real-time引物设计 | 第50页 |
| ·Real-time PCR引物特异性检测 | 第50页 |
| ·Real-time PCR体系与反应程序 | 第50页 |
| ·数据处理 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-52页 |
| ·植株表型分析 | 第50-51页 |
| ·胁迫处理下慈竹RNA提取 | 第51页 |
| ·慈竹BeNAC2-4 在胁迫下差异表达分析 | 第51-52页 |
| 6. 慈竹BeNAC2-4 基因植物过表达载体的构建 | 第52-59页 |
| ·试验材料及仪器 | 第52-53页 |
| ·试验用主要试剂、菌种及质粒 | 第52页 |
| ·试验用其他主要试剂的配制 | 第52页 |
| ·试验用主要仪器 | 第52-53页 |
| ·试验方法 | 第53-56页 |
| ·Be NAC2-4（含酶切位点）PCR引物设计 | 第53页 |
| ·Be NAC2-4 基因全长（含酶切位点）的扩增 | 第53-54页 |
| ·Be NAC2-4 全长基因（含酶切位点）PCR产物的胶回收与连接 | 第54页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第54页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第54页 |
| ·蓝白斑筛选、摇菌和质粒提取 | 第54页 |
| ·pMD19-T-BeNAC2-4 质粒和pCAMBIA 1303质粒双酶切 | 第54-55页 |
| ·pMD19-T-BeNAC2-4 质粒、pCAMBIA 1303质粒酶切胶回收 | 第55页 |
| ·过表达载体pCAMBIA 1303-BeNAC2-4 的构建 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-59页 |
| ·Be NAC2-4 基因全长（含酶切位点）的扩增 | 第56-57页 |
| ·pM19-T-Be NAC2-4 质粒、pCAMBIA 1303质粒酶切 | 第57-58页 |
| ·慈竹BeNAC2-4 基因植物过表达载体的构建 | 第58-59页 |
| 7 梁山慈竹pCAMBIA 1303-Be NAC2-4 质粒转化青杨 | 第59-65页 |
| ·试验材料及试剂 | 第59-60页 |
| ·试验材料 | 第59页 |
| ·菌种及质粒 | 第59页 |
| ·主要试验试剂配制 | 第59-60页 |
| ·试验仪器 | 第60页 |
| ·试验方法 | 第60-62页 |
| ·pCAMBIA 1303- BeNAC2-4 质粒转化农杆菌EHA105 | 第60-61页 |
| ·叶盘法转化青杨 | 第61页 |
| ·转基因青杨植株的验证 | 第61-62页 |
| ·结果分析 | 第62-64页 |
| ·pCAMBIA 1303-BeNAC2-4 质粒转化农杆菌 | 第62-63页 |
| ·转基因青杨植株的PCR检验 | 第63-64页 |
| ·结论 | 第64-65页 |
| 8 结论 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及研究成果 | 第72页 |
