摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
1 绪论 | 第13-21页 |
·研究意义 | 第13-14页 |
·国内外研究现状 | 第14-18页 |
·bZIP转录因子的概述 | 第14-17页 |
·bZIP转录因子的研究现状 | 第17-18页 |
·过表达载体构建技术 | 第18页 |
·酵母单杂交技术 | 第18-19页 |
·转录组测序 | 第19页 |
·实时定量PCR技术 | 第19-20页 |
·试验研究内容以及技术路线图 | 第20-21页 |
·试验研究内容 | 第20页 |
·试验技术路线图 | 第20-21页 |
2 慈竹BebZIP基因的克隆 | 第21-50页 |
·试验材料与主要仪器 | 第21-22页 |
·试验材料 | 第21页 |
·试验用主要仪器 | 第21页 |
·试验用主要试剂和菌种 | 第21-22页 |
·试验用其它主要试剂的配制 | 第22页 |
·慈竹BebZIP基因的克隆 | 第22-32页 |
·慈竹笋总RNA的提取 | 第22-23页 |
·慈竹cDNA的合成 | 第23-24页 |
·慈竹BebZIP基因的克隆 | 第24-28页 |
·慈竹BebZIP基因的生物信息学分析 | 第28-32页 |
·结果与分析 | 第32-47页 |
·慈竹BebZIP基因全长克隆 | 第32-36页 |
·慈竹BebZIP基因生物信息学分析 | 第36-47页 |
·结论与讨论 | 第47-50页 |
3 慈竹bZIP转录因子的转录活性分析 | 第50-64页 |
·试验材料与主要仪器 | 第50-51页 |
·菌种和质粒 | 第50页 |
·试验用主要试剂 | 第50页 |
·试验主要试剂配制方法 | 第50-51页 |
·试验用主要仪器 | 第51页 |
·试验方法 | 第51-57页 |
·慈竹BebZIP基因引物设计 | 第51-52页 |
·慈竹BebZIP基因全长(含酶切位点)扩增 | 第52-53页 |
·慈竹BebZIP全长基因 (含有酶切位点)PCR产物的胶回收和连接 | 第53-54页 |
·大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第54页 |
·菌落蓝白斑筛选、摇菌和质粒提取 | 第54页 |
·pMD19-T-BebZIPs质粒以及pEG202质粒双酶切 | 第54-55页 |
·pMD19-T-BebZIPs质粒和pEG202质粒酶切胶回收 | 第55页 |
·酵母单杂交载体pEG202-BebZIPs的构建 | 第55-56页 |
·阳性克隆的筛选以及双酶切验证 | 第56-57页 |
·酵母EGY48感受态的制备及酵母转化 | 第57页 |
·结果与分析 | 第57-63页 |
·慈竹BebZIP基因全长(含酶切位点)的扩增 | 第57-58页 |
·慈竹pMD19-T-BebZIPs质粒以及pEG202质粒双酶切 | 第58-60页 |
·慈竹BebZIP基因酵母单杂交载体的构建以及双酶切验证 | 第60-61页 |
·慈竹BebZIP基因酵母菌菌液PCR鉴定 | 第61-62页 |
·慈竹BebZIP转录因子的转录活性分析 | 第62-63页 |
·结论与讨论 | 第63-64页 |
4 慈竹BebZIP基因的组织表达模式分析 | 第64-71页 |
·试验材料、试剂和仪器设备 | 第64页 |
·植物材料 | 第64页 |
·主要试剂 | 第64页 |
·仪器设备 | 第64页 |
·慈竹BebZIP基因的组织模式表达分析 | 第64-67页 |
·慈竹各组织的总RNA提取 | 第64页 |
·慈竹各组织的cDNA的合成 | 第64页 |
·慈竹BebZIP和Tubulin基因real-time引物设计 | 第64-65页 |
·Real-time PCR引物特异性检测 | 第65-66页 |
·Real-time PCR体系与反应程序 | 第66-67页 |
·数据处理 | 第67页 |
·结果与分析 | 第67-69页 |
·慈竹各组织RNA提取 | 第67-68页 |
·Real-time PCR引物特异性检测 | 第68页 |
·慈竹BebZIP基因的表达分析 | 第68-69页 |
·结论与讨论 | 第69-71页 |
5 胁迫处理对BebZIP基因转录水平的影响 | 第71-77页 |
·试验材料、试剂以及设备仪器 | 第71页 |
·植物材料 | 第71页 |
·试验试剂 | 第71页 |
·试验仪器设备 | 第71页 |
·试验方法 | 第71-73页 |
·慈竹幼苗的培育和胁迫处理 | 第71-73页 |
·胁迫处理后总RNA的提取 | 第73页 |
·胁迫处理后cDNA的合成 | 第73页 |
·慈竹BebZIP和Tubulin基因real-time引物设计 | 第73页 |
·Real-time PCR引物特异性检测 | 第73页 |
·Real-time PCR体系与反应程序 | 第73页 |
·数据处理 | 第73页 |
·结果与分析 | 第73-76页 |
·植物表型分析 | 第73-74页 |
·胁迫处理下慈竹RNA提取 | 第74-75页 |
·慈竹BebZIP基因在各种胁迫下差异性表达分析 | 第75-76页 |
·结论与讨论 | 第76-77页 |
6 慈竹BebZIP基因过表达载体的构建 | 第77-85页 |
·试验材料及仪器 | 第77页 |
·试验菌种、质粒及试剂 | 第77页 |
·试验主要仪器 | 第77页 |
·试验方法 | 第77-82页 |
·慈竹BebZIP6全长基因过表达引物设计 | 第77页 |
·慈竹BebZIP6基因全长(含有酶切位点)的扩增 | 第77-78页 |
·慈竹BebZIP6全长基因 (含有酶切位点)PCR产物的胶回收和连接 | 第78-79页 |
·大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第79页 |
·菌落蓝白斑筛选、摇菌和质粒提取 | 第79页 |
·pMD19-T-BebZIP6质粒以及pCAMBIA 1303质粒双酶切 | 第79-80页 |
·pMD19-T-BebZIP6质粒和pCAMBIA 1303质粒酶切胶回收 | 第80页 |
·过表达载体pCAMBIA1303–BebZIP6的构建 | 第80页 |
·阳性克隆的筛选以及质粒PCR验证 | 第80-82页 |
·结果分析 | 第82-84页 |
·慈竹BebZIP6基因全长(含酶切位点)的扩增以及pCAMBIA 1303质粒酶切 | 第82-83页 |
·BebZIP6基因植物过表达载体的构建 | 第83-84页 |
·质粒PCR验证 | 第83-84页 |
·结论 | 第84-85页 |
7 慈竹pCAMBIA1303-BebZIP6质粒转化青杨 | 第85-91页 |
·试验材料和仪器 | 第85-86页 |
·试验材料、试剂及培养基配方 | 第85-86页 |
·试验工具与仪器 | 第86页 |
·试验方法 | 第86-89页 |
·青杨无菌苗的培育 | 第86页 |
·pCAMBIA1303–BebZIP6质粒转化农杆菌 | 第86-87页 |
·叶盘法转化青杨叶片 | 第87-88页 |
·转基因青杨植物的验证 | 第88-89页 |
·结果分析 | 第89-90页 |
·BebZIP6过表达转基因青杨抗性苗的获得以及阳性苗的验证 | 第89-90页 |
·结论 | 第90-91页 |
8 结论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
攻读硕士学位期间的学术科研情况 | 第102页 |