摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-14页 |
·镉的生物学毒性 | 第7-8页 |
·镉的理化性质 | 第7页 |
·自然界中镉的存在状态及分布 | 第7页 |
·镉污染的来源和对人体健康的危害 | 第7-8页 |
·镉与ROS | 第8页 |
·镉对酿酒酵母MAPK信号的影响 | 第8-10页 |
·镉对HOG-MAPK信号的影响 | 第9页 |
·镉对CWI-MAPK信号的影响 | 第9-10页 |
·与镉耐受性相关基因的筛选 | 第10-12页 |
·SGA方法简介及应用 | 第12-13页 |
·本课题研究的内容和意义 | 第13-14页 |
第二章 实验材料与方法 | 第14-26页 |
·实验材料 | 第14-21页 |
·主要试剂 | 第14-15页 |
·主要仪器设备 | 第15-16页 |
·实验菌株、质粒和引物 | 第16-17页 |
·培养基与试剂配方 | 第17-21页 |
·实验方法 | 第21-26页 |
·菌株的培养与保存 | 第21页 |
·碱裂解法质粒的小量提取 | 第21页 |
·酿酒酵母基因组DNA的玻璃珠法提取 | 第21-22页 |
·PCR扩增DNA片段 | 第22页 |
·酿酒酵母片段DNA的转化 | 第22页 |
·酿酒酵母质粒的转化 | 第22-23页 |
·倍比稀释法表型分析 | 第23页 |
·β-半乳糖苷酶(lac Z)活性的测定 | 第23-24页 |
·SGA筛选双基因缺失株 | 第24页 |
·Western Blot | 第24-25页 |
·细胞内活性氧族物质(ROS)的测定 | 第25-26页 |
第三章 结果与讨论 | 第26-45页 |
·SGA分析与镉耐受性相关基因在镉敏感性中的遗传互作 | 第26-36页 |
·SGA靶菌株的选择和构建 | 第26-27页 |
·SGA缺失株阵列的获得 | 第27-29页 |
·SGA筛选双基因缺失株 | 第29-31页 |
·双基因缺失株的表型分析 | 第31-36页 |
·镉胁迫下CWI途径与HOG途径中各组分相互关系研究 | 第36-42页 |
·镉诱导CWI途径激活对基因转录水平的调控 | 第36-37页 |
·CWI途径与HOG途径在镉敏感和镉诱导CWI途径激活中的遗传互作 | 第37-40页 |
·镉诱导CWI途径激活不依赖于HOG途径 | 第40-41页 |
·钙/钙调蛋白信号途径对镉诱导CWI途径激活的影响 | 第41-42页 |
·CWI途径和HOG途径在镉诱导ROS产生中的遗传互作 | 第42-45页 |
·CWI途径和HOG途径对镉诱导ROS产生的影响 | 第42-43页 |
·CWI途径组分和HOG途径组分的同时缺失对胞内ROS的影响 | 第43-45页 |
主要结论与展望 | 第45-47页 |
主要结论 | 第45-46页 |
展望 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |