| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词及符号说明表 | 第7-11页 |
| 一、引言 | 第11-18页 |
| 1. 鸭疫里默氏菌概述 | 第11-12页 |
| ·鸭疫里默氏菌简介 | 第11页 |
| ·病原学研究 | 第11-12页 |
| ·流行病学 | 第12页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第12页 |
| ·诊断 | 第12页 |
| 2. 鸭疫里默氏菌的分子生物学研究概况 | 第12-14页 |
| ·RA毒力相关基因 | 第13页 |
| ·RA的免疫蛋白 | 第13-14页 |
| ·RA的亚单位疫苗 | 第14页 |
| 3. 鸭疫里默氏菌外膜蛋白OmpA以及OmpA/MotB的研究 | 第14-18页 |
| ·RA外膜蛋白A的研究 | 第14-17页 |
| ·RAOmpA的结构特性及其序列保守性 | 第15-16页 |
| ·OmpA在RA诊断方面的应用 | 第16页 |
| ·RAOmpA的致病作用 | 第16页 |
| ·RAOmpA的免疫原性 | 第16-17页 |
| ·RA凝血酶敏感Ⅲ型重复蛋白(Thrombospondin type 3 repeats)：OmpA/MotB的研究 | 第17-18页 |
| 4. 研究目的和意义 | 第18页 |
| 二、试验研究 | 第18-61页 |
| 1 试验材料 | 第18-19页 |
| ·菌株、菌种及试验动物 | 第18页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第18-19页 |
| ·血清、疫苗、试剂盒 | 第19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19页 |
| 2 方法 | 第19-27页 |
| ·OmpA/MotB基因生物信息学分析 | 第19页 |
| ·OmpA/MotB基因核酸序列分析 | 第19页 |
| ·OmpA/MotB蛋白生物信息学分析 | 第19页 |
| ·OmpA/MotB去信号肽及主要抗原表位区段原核表达及纯化 | 第19-24页 |
| ·引物 | 第19-20页 |
| ·RA全基因组提取 | 第20页 |
| ·OmpA/MotB去信号肽及其主要抗原表位区段PCR扩增 | 第20-21页 |
| ·OmpA/MotB基因的T克隆 | 第21-22页 |
| ·OmpA/MotB蛋白的表达及纯化 | 第22-24页 |
| ·基于OmpA/MotB去信号肽蛋白、主要抗原表位区蛋白间接ELISA方法的建立 | 第24-25页 |
| ·基于OmpA/MotB去信号肽和主要抗原表位区蛋白ELISA方法的反应条件优化 | 第24页 |
| ·ELISA方法特异性检测 | 第24-25页 |
| ·变异系数 | 第25页 |
| ·阳性阂值确定 | 第25页 |
| ·ELISA方法敏感性检测 | 第25页 |
| ·符合率的测定 | 第25页 |
| ·OmpA/MotB蛋白对雏鸭的免疫保护效果研究 | 第25-27页 |
| ·试验分组及免疫程序 | 第25页 |
| ·OmpA/MotB抗体、鸭疫里默氏菌血清1型抗体水平检测 | 第25-26页 |
| ·雏鸭攻毒保护 | 第26页 |
| ·免疫细胞因子检测 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-54页 |
| ·OmpA/MotB基因的生物信息学分析 | 第27-32页 |
| ·RA-CH-1 OmpA/MotB基因的核苷酸序列分析 | 第27-28页 |
| ·相关蛋白质的生物信息学分析 | 第28-32页 |
| ·RA-CH-1 OmpA/MotB去信号肽及其主要抗原表位区段的克隆和原核表达及纯化 | 第32-37页 |
| ·OmpA/MotB基因PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·OmpA/MotB基因的T克隆及亚克隆 | 第33-34页 |
| ·OmpA/MotB蛋白的表达及纯化 | 第34-37页 |
| ·基于OmpA/MotB去信号肽蛋白、主要抗原表位区蛋白间接ELISA方法建立 | 第37-49页 |
| ·最佳抗原包被浓度及血清稀释度 | 第38-39页 |
| ·最佳酶标抗体浓度 | 第39-40页 |
| ·最佳显色时间优化 | 第40页 |
| ·最佳包被条件的选择 | 第40-41页 |
| ·最佳封闭液、封闭时间 | 第41-42页 |
| ·最佳血清、酶标抗体孵育时间 | 第42-43页 |
| ·特异性检验 | 第43-44页 |
| ·变异系数 | 第44-46页 |
| ·阳性阈值确定 | 第46页 |
| ·敏感性检测 | 第46-48页 |
| ·基于OmpA/MotB两种蛋白的ELISA和基于RA-CH-1的ELISA方法符合率检测 | 第48-49页 |
| ·OmpA/MotB蛋白对雏鸭的免疫保护效果研究 | 第49-54页 |
| ·OmpA/MotB抗体、血清1型鸭疫里默氏菌抗体水平检测 | 第49-51页 |
| ·雏鸭攻毒保护 | 第51-52页 |
| ·细胞因子水平检测 | 第52-54页 |
| 4 小结 | 第54-55页 |
| ·OmpA/MotB基因及OmpA/MotB蛋白生物信息学分析 | 第54页 |
| ·RA-CH-1 OmpA/MotB去信号肽及其主要抗原表位区段的克隆和原核表达及表达蛋白的纯化 | 第54页 |
| ·基于OmpA/MotB去信号肽蛋白、主要抗原表位区蛋白间接ELISA方法建立 | 第54-55页 |
| ·OmpA/MotB蛋白对雏鸭的免疫保护效果研究 | 第55页 |
| 5 讨论 | 第55-61页 |
| ·OmpA/MotB基因生物信息学分析 | 第55-57页 |
| ·OmpA/MotB去信号肽、主要抗原表位区段的原核表达与纯化 | 第57-58页 |
| ·基于OmpA/MotB去信号肽蛋白、主要抗原表位区蛋白间接ELISA方法建立 | 第58-59页 |
| ·OmpA/MotB蛋白诱导的免疫鸭产生的ELISA抗体及其意义 | 第59页 |
| ·OmpA/MotB蛋白诱导的免疫鸭产生的细胞因子及其意义 | 第59-60页 |
| ·OmpA/MotB蛋白对雏鸭的免疫保护率 | 第60-61页 |
| 三、结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
