摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
主要缩略语表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-30页 |
1 Reelin信号途径 | 第13-17页 |
·概述 | 第13-14页 |
·Reelin信号级联反应 | 第14-15页 |
·Reelin受体的不同功能 | 第15-16页 |
·Reelin信号与疾病 | 第16-17页 |
2 接头蛋白Dab1 | 第17-20页 |
·概述 | 第17页 |
·Dab1在Reelin信号中的作用 | 第17-18页 |
·Dab1的选择性剪接 | 第18-20页 |
3 酪氨酸蛋白激酶Fyn | 第20-22页 |
·概述 | 第20-21页 |
·Fyn在Reelin信号中的作用 | 第21页 |
·Fyn的选择性剪接 | 第21-22页 |
4 细胞肌动蛋白骨架 | 第22-27页 |
·细胞运动中肌动蛋白丝的聚合与解聚 | 第22-24页 |
·树突棘中的肌动蛋白 | 第24-27页 |
5 粘着斑及粘着斑激酶 | 第27-30页 |
·粘着斑上的分子结构 | 第27-28页 |
·粘着斑激酶(Focal adhesion kinase,FAK) | 第28-30页 |
第二章 猪Dab1和Fyn基因的克隆、表达及染色体定位 | 第30-47页 |
1 前言 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-36页 |
·实验动物 | 第31页 |
·RNA的制备与反转录 | 第31页 |
·基因组DNA的提取 | 第31页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
·基因的克隆 | 第32-33页 |
·转化感受态 | 第33页 |
·染色体定位 | 第33-34页 |
·定位PCR | 第33-34页 |
·定位信号分析 | 第34页 |
·实时荧光定量PCR | 第34-35页 |
·Leptomycin B(LMB)刺激实验 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-43页 |
·猪Dab1和Fyn基因不同剪接体的克隆 | 第36-38页 |
·猪Dab1和Fyn基因的染色体定位 | 第38页 |
·猪Dab1及Fyn基因剪接体的组织表达谱分析 | 第38-40页 |
·sDab1与sFyn-B的时空表达谱分析 | 第40-41页 |
·sDab1和sDab1-Li具有核质穿梭属性 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
第三章 sDab1剪接体与sFyn相互作用的研究 | 第47-55页 |
1 前言 | 第47页 |
2 材料与方法 | 第47-50页 |
·细胞系、抗体和抑制剂 | 第47-48页 |
·海马神经元的原代培养 | 第48页 |
·载体的构建及瞬时转染 | 第48-49页 |
·Western blotting | 第49-50页 |
3 结果与分析 | 第50-54页 |
·原代神经元中sFyn-B与sDab1和sDab1-Li的共定位 | 第50-51页 |
·sFyn磷酸化sDab1剪接体的特异位点 | 第51-54页 |
4 讨论 | 第54-55页 |
第四章 Fyn调控细胞骨架重排的分子机理 | 第55-83页 |
1 前言 | 第55-56页 |
2 材料与方法 | 第56-59页 |
·细胞系 | 第56页 |
·载体的构建与瞬时转染 | 第56-57页 |
·抗体 | 第57-58页 |
·免疫荧光染色 | 第58页 |
·Western blotting | 第58-59页 |
3 结果与分析 | 第59-81页 |
·Fyn导致细胞形态变化 | 第59-60页 |
·细胞肌动蛋白重组与Fyn激酶活性 | 第60-65页 |
·SH2和SH3结构域与Fyn介导的肌动蛋白骨架重排 | 第65-73页 |
·蛋白共价修饰在Fyn介导的肌动蛋白重排中的作用 | 第73-77页 |
·Fyn介导FAK磷酸化 | 第77-79页 |
·Reelin上调SFKs介导的FAK的磷酸化 | 第79-81页 |
4 讨论 | 第81-83页 |
第五章 Fyn对神经元树突骨架调控的研究 | 第83-92页 |
1 前言 | 第83页 |
2 材料与方法 | 第83-86页 |
·细胞系、抗体和抑制剂 | 第83-84页 |
·海马神经元的原代培养 | 第84页 |
·Reelin条件培养基的收集 | 第84页 |
·海马脑片培养 | 第84-85页 |
·单细胞显微注射 | 第85-86页 |
3 结果与分析 | 第86-89页 |
·Fyn促进神经元树突的分枝 | 第86-87页 |
·Fyn增加海马锥体神经元的树突棘密度 | 第87-89页 |
4 讨论 | 第89-92页 |
参考文献 | 第92-109页 |
研究生期间论文发表情况 | 第109-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
附录 | 第112-113页 |