| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-29页 |
| ·研究问题的由来 | 第13页 |
| ·文献综述 | 第13-27页 |
| ·骨骼肌的发育特点 | 第13-17页 |
| ·microRNA的基本特征 | 第17-19页 |
| ·化学合成的miRNA模拟物和抑制物 | 第19-20页 |
| ·miRNA靶基因的预测与验证 | 第20-22页 |
| ·骨骼肌发育相关miRNAs的研究概况 | 第22-23页 |
| ·miR-133b、miR-214和miR-495在骨骼肌发育中的研究进展及存在的问题 | 第23-24页 |
| ·MAPK信号通路与骨骼肌生长发育 | 第24-27页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-44页 |
| ·材料 | 第29-31页 |
| ·用于体外试验的细胞系 | 第29页 |
| ·用于miRNAs功能研究的miRNA模拟物和抑制物 | 第29页 |
| ·荧光素酶报告基因载体 | 第29-30页 |
| ·抗体 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-44页 |
| ·本研究技术路线 | 第31页 |
| ·细胞培养 | 第31页 |
| ·细胞RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第31-33页 |
| ·miRNA的表达分析 | 第33-34页 |
| ·转染 | 第34-35页 |
| ·细胞增殖的实时监测 | 第35页 |
| ·细胞周期分析 | 第35页 |
| ·肌肉分化标志(marker)基因的表达检测 | 第35-36页 |
| ·miRNA靶基因的预测 | 第36页 |
| ·荧光素酶报告基因试验 | 第36-41页 |
| ·靶基因mRNA表达水平的检测 | 第41页 |
| ·Western免疫印迹(Western blot) | 第41-43页 |
| ·C2C12细胞中ERK1/2信号通路的抑制 | 第43-44页 |
| 3 结果 | 第44-75页 |
| ·miRNAs在C2C12细胞分化不同时期的表达 | 第44-45页 |
| ·miRNAs在C2C12细胞增殖和分化中的作用 | 第45-58页 |
| ·miR-133b在C2C12细胞增殖和分化中的作用 | 第45-52页 |
| ·miR-214在C2C12细胞增殖和分化中的作用 | 第52-56页 |
| ·miR-495在细胞分化中的作用 | 第56-58页 |
| ·miRNAs靶基因预测和验证结果 | 第58-70页 |
| ·miRNAs靶基因的预测结果 | 第58-59页 |
| ·荧光素酶报告基因试验结果 | 第59-66页 |
| ·FGFR1、Ppp2ca、Ppp2cb和ARGEF9在C2C12细胞分化过程中的表达 | 第66-67页 |
| ·miR-133b对C2C12细胞中FGFR1和PP2AC的表达及ERK1/2磷酸化的调节 | 第67-70页 |
| ·C2C12细胞中抑制ERK1/2通路的研究 | 第70-75页 |
| ·抑制增殖期C2C12细胞中ERK1/2通路的研究 | 第70-72页 |
| ·抑制分化的C2C12细胞中ERK1/2通路的研究 | 第72-75页 |
| 4 讨论 | 第75-82页 |
| ·miR-133b通过ERK1/2通路调节肌细胞的增殖和分化 | 第75-79页 |
| ·miR-133b抑制肌细胞增殖、促进其分化 | 第75-76页 |
| ·miR-133b抑制分化的肌细胞中ERK1/2通路的活性 | 第76-78页 |
| ·在分化初期的肌细胞中ERK1/2通路的激活是必要的 | 第78-79页 |
| ·miR-133b与ERK1/2之间存在的负反馈调节圈 | 第79页 |
| ·miR-214正调控肌细胞的增殖和分化 | 第79-81页 |
| ·miR-495在肌细胞分化中的作用 | 第81-82页 |
| 5 小结 | 第82-84页 |
| ·本研究的主要结果与结论 | 第82-83页 |
| ·本研究的创新点与特色 | 第83页 |
| ·本研究不足之处与进一步工作的建议 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 攻读学位期间撰写论文题录 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
