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椰子胚乳中WRI1-like类转录因子CoWRI1基因的克隆和功能初步分析

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 前言第11-25页
 1 转录因子第11-13页
   ·转录因子的调控机制第11-12页
   ·转录因子的功能第12页
   ·转录因子的分类第12-13页
 2 植物转录因子第13-16页
   ·DNA结合结构域第14-15页
   ·转录调控结构域第15-16页
   ·核定位信号区第16页
   ·寡聚化位点第16页
 3 植物转因子的研究方法第16-20页
   ·凝胶迁移率改变实验第16-17页
   ·足迹法第17页
   ·瞬时表达分析第17-19页
   ·功能突变分析第19-20页
 4 AP2/EREBP类转录因子第20-24页
   ·AP2亚家族转录因子第21页
   ·WRI1-like类转录因子第21-24页
 5 本研究的目的和内容第24-25页
   ·研究的目的和意义第24页
   ·研究的主要内容第24-25页
第二章 椰子CoWRI1基因的生物信息学分析第25-37页
 1 材料和方法第25页
   ·材料第25页
   ·工具第25页
   ·方法第25页
 2 结果和分析第25-36页
   ·全长cDNA的序列分析第25-27页
   ·开放阅读框架(ORF)的分析第27页
   ·保守结构域的分析第27-28页
   ·BLASTn和BLASTp分析第28-29页
   ·多序列比对和进化分析第29-31页
   ·CoWRI1蛋白质理化性质的分析第31页
   ·CoWRI1蛋白质结构城分析及motif搜索第31-32页
   ·CoWRI1蛋白质二级结构的预测第32-34页
   ·CoWRI1蛋白质三级结构预测第34-36页
 3 小结第36-37页
第三章 椰子CoWRI1基因的克隆载体构建和表达模式分析第37-57页
 1 材料第37-38页
   ·植物材料第37页
   ·菌株及载体第37页
   ·酶与化学试剂第37页
   ·溶液第37-38页
   ·培养基第38页
 2 方法第38-51页
   ·CoWRI1基因的克隆第38-44页
   ·napin启动子的克隆第44-46页
   ·pCAMBIA1300S-napin表达载体的构建第46-48页
   ·pCAMBIA1300S-napin-CoWRI1表达载体的构建第48-49页
   ·CoWRI1表达模式的分析第49-51页
 3 实验结果第51-54页
   ·椰子总RNA的检测第51-52页
   ·CoWRI1基因克隆产物的检测第52-53页
   ·pCAMBIA1300S-napin-CoWIRI1表达载体的验证第53-54页
   ·CoWRI1基因在椰子不同组织中的表达模式第54页
 4 小结第54-57页
第四章 椰子CoWRI1功能的初步分析第57-82页
 1.材料第62-64页
   ·植物材料第62页
   ·菌株和载体第62-63页
   ·酶与化学试剂第63页
   ·溶液第63-64页
   ·培养基第64页
 2 方法第64-73页
   ·菌株和载体的验证实验第64-67页
   ·利用酵母双杂交系统对CoWRI1的转录激活活性进行验证第67-71页
   ·利用酵母单杂交系统对CoWRI1的DNA结合活性进行验证第71-73页
 3 结果第73-81页
   ·载体质粒的酶切验证第73页
   ·酵母宿主菌的表型验证第73-74页
   ·重组载体的双酶切验证第74-75页
   ·CoWRI1转录激活性的验证第75-77页
   ·CoWRI1 DNA结合活性的验证第77-81页
 4 小结第81-82页
结论第82-84页
参考文献第84-89页
附录一 仪器设备第89-90页
附录二 酵母用培养基第90-92页
附录三 重组载体的测序结果第92-97页
附录四 硕士期间发表的文章第97-98页
致谢第98页

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