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油菜角果热应答基因鉴定和拟南芥热激转录因子互作分析

目录第1-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词表第13-14页
前言第14-28页
 1 高温对油菜生产的影响以及机制研究第14-15页
 2 拟南芥抗热机制的研究进展第15-27页
   ·热激转录因子(Hsfs)和热激蛋白(Hsps)是热胁迫反应的主体第17-21页
   ·依赖Hsf-Hsp的调节途径第21-24页
   ·部分或不依赖Hsf-Hsp的调节途径第24-25页
   ·热调控网枢纽:MBF1c连接Hsf-Hsp途径和激素途径第25-26页
   ·高温与植物正常发育和其它逆境的互作第26-27页
 3 本研究的目的意义第27-28页
第一章 油菜果皮和种子中应答高温胁迫的转录谱分析第28-59页
 1 引言第28页
 2 材料与方法第28-34页
   ·实验材料第28-29页
     ·植物材料第28页
     ·试剂耗材第28-29页
   ·实验方法第29-34页
     ·材料种植第29页
     ·芯片实验和数据分析第29-30页
     ·油菜芯片表达验证第30-32页
     ·候选基因突变体筛选和表达检测第32-34页
 3 结果与讨论第34-58页
   ·高温处理后基因差异表达的总体趋势第34-36页
   ·果皮和种子中共同差异表达的基因第36-45页
   ·果皮中差异表达的基因第45-49页
   ·种子中差异表达的基因第49-52页
   ·大量功能未知基因参与热处理应答反应第52-54页
   ·利用拟南芥突变体鉴定抗热基因第54-58页
 4 本章小结第58-59页
第二章 几个拟南芥热激转录因子基因的互作分析第59-75页
 1 引言第59页
 2 材料与方法第59-63页
   ·实验材料第59-60页
     ·植物材料第59页
     ·质粒菌株第59页
     ·试剂耗材第59-60页
   ·实验方法第60-63页
     ·材料种植第60页
     ·突变体检测和多突变体构建第60页
     ·基因表达分析第60-62页
     ·载体构建第62页
     ·蛋白质互作检验—共转化酵母法第62-63页
 3 结果与分析第63-71页
   ·HsfAs基因间关系研究第63-67页
     ·HsfA2对HsfA3负向调节作用第64-65页
     ·hsfa2 hsfa3双突变体中热相关基因的表达分析第65-66页
     ·HsfA2和HsfA3蛋白互作分析第66-67页
   ·HsfBs基因间关系研究第67-71页
     ·hsfB双/多突变体材料的检测第67-69页
     ·hsfB突变体抗热性分析第69-70页
     ·hsfB三突变体在热处理过程中对基因表达的调节第70-71页
 4 讨论第71-75页
   ·HsfA3可以调节植物ATLR第71-72页
   ·HsfB2b在HsfB基因调节植物抗热性中的重要性第72页
   ·HsfA2、HsfA3和HsfBs在抗热反应中的地位第72-73页
   ·对Hsf家族基因进一步研究的设想第73-74页
   ·拟南芥Hsfs的研究可为油菜及其它物种的相关研究提供指导第74-75页
第三章 H38(AT4G23493)参与抗热等逆境反应和种子大小的调节第75-101页
 1 引言第75页
 2 材料与方法第75-81页
   ·实验材料第75-76页
     ·植物材料第75-76页
     ·质粒菌株第76页
     ·试剂耗材第76页
   ·实验方法第76-81页
     ·材料种植第76页
     ·基因表达分析第76页
     ·Gus染色第76-78页
     ·亚细胞定位第78-79页
     ·细胞学观察第79-80页
     ·花青素含量测定第80页
     ·种子大小分析第80页
     ·基因功能预测第80-81页
 3 结果与分析第81-97页
   ·H38序列保守性分析第81-83页
   ·H38定位于线粒体第83-84页
   ·H38 组织表达分析第84-87页
   ·h38突变体和互补材料的表达检测第87-88页
   ·H38响应热胁迫并且参与调节植物的抗热性第88-90页
   ·与H38共表达及热胁迫相关基因的表达分析第90-93页
   ·H38调节种子在葡萄糖和ABA处理条件下的萌发第93-95页
   ·H38对种子大小的调节第95-97页
 4 讨论第97-101页
   ·H38是植物特有的一个基因第97-98页
   ·H38影响其它线粒体定位的热调节基因的表达第98页
   ·H38依赖于Hsf-Hsp途径第98-99页
   ·H38调节植物抗热性依赖于发育时期第99页
   ·H38调节种子的形态和逆境下的萌发可能依赖于ABA途径第99-101页
参考文献第101-116页
附录第116-134页
 附录1 载体构建到拟南芥转化的实验流程第116-123页
 附录2 热处理后油菜果皮和种子中表达量改变的基因(Hsf/Hsp基因用粗体标示)第123-133页
 附录3 原生质体制备所用试剂第133页
  W5溶液第133页
  MMG溶液第133页
  PEG溶液第133页
 附录4 作者简介和在读期间发表的论文第133-134页
  作者简介第133页
  博士期间发表论文第133-134页
致谢第134页

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