| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-37页 |
| ·研究问题的由来 | 第12页 |
| ·文献综述 | 第12-37页 |
| 第二章 猪骨骼肌发育中相关microRNA的鉴定 | 第37-49页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·组织匀浆及总RNA的提取 | 第38页 |
| ·实验流程简介 | 第38页 |
| ·信息分析流程简介 | 第38-39页 |
| ·已知MIRNA差异分析 | 第39-40页 |
| ·MICRORNA的反转录 | 第40页 |
| ·荧光定量PCR检测 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-49页 |
| ·SMALL RNA测序结果的统计分析 | 第41-42页 |
| ·SMALL RNA的片段长度分布统计 | 第42页 |
| ·SMALL RNA的分类注释 | 第42-45页 |
| ·E90和D100中高丰度MIRNA的表达 | 第45-46页 |
| ·E90和D100中已知MIRNA差异表达比较 | 第46-47页 |
| ·E90和D100测序结果中差异表达MIRNAs的定量PCR检测 | 第47-49页 |
| 第三章 骨骼肌发育中miR-21的功能研究 | 第49-77页 |
| ·实验材料 | 第49-54页 |
| ·实验动物 | 第49页 |
| ·载体和菌株 | 第49页 |
| ·细胞系 | 第49页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第49-50页 |
| ·主要试剂溶液的配制 | 第50页 |
| ·主要仪器设备 | 第50-51页 |
| ·主要分析工具及网站 | 第51-52页 |
| ·MIR-21模拟物和抑制剂 | 第52-53页 |
| ·用于实验的抗体 | 第53页 |
| ·用于细胞增殖实验的试剂 | 第53页 |
| ·用于细胞凋亡实验的试剂 | 第53页 |
| ·荧光素酶报告载体和荧光素酶检测试剂盒 | 第53-54页 |
| ·TGFBI SIRNA | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-62页 |
| ·技术路线 | 第54-55页 |
| ·细胞复苏与培养 | 第55页 |
| ·细胞转染 | 第55-56页 |
| ·组织匀浆及总RNA的提取 | 第56页 |
| ·细胞总RNA的提取：按试剂盒说明进行 | 第56-57页 |
| ·RNA纯度和浓度检测 | 第57页 |
| ·RT-PCR:按试剂盒说明进行 | 第57页 |
| ·荧光定量PCR检测 | 第57-58页 |
| ·蛋白的提取 | 第58页 |
| ·蛋白浓度的检测,：按试剂盒说明进行 | 第58页 |
| ·免疫印迹 | 第58-59页 |
| ·细胞增殖实验 | 第59页 |
| ·流式细胞术检测细胞周期 | 第59-60页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第60页 |
| ·荧光素酶报告实验 | 第60-62页 |
| ·sIRNA干扰TGFBI实验 | 第62页 |
| ·结果与分析 | 第62-77页 |
| ·MIR-21在小鼠骨骼肌不同发育时期表达谱 | 第62-63页 |
| ·MIR-21在C2C12成肌细胞分化过程中表达降低 | 第63-64页 |
| ·MIR-21促进C2C12成肌细胞增殖 | 第64-66页 |
| ·MIR-21抑制C2C12成肌细胞凋亡 | 第66-67页 |
| ·MIR-21靶标验证 | 第67-70页 |
| ·荧光素酶报告试验 | 第67-69页 |
| ·MIR-21对C2C12成肌细胞内源性TGFBI的调控 | 第69-70页 |
| ·TGFBI在小鼠骨骼肌组织的表达 | 第70页 |
| ·损伤后在肌肉细胞再生过程中MIR-21和TGFBI的相互作用 | 第70-71页 |
| ·SIRNA干扰TGFBI后对C2C12成肌细胞增殖的影响 | 第71-73页 |
| ·SIRNA干扰TGFBI后对C2C12成肌细胞周期的影响 | 第73-74页 |
| ·SIRNA干扰TGFBI后对C2C12成肌细胞凋亡的影响 | 第74-75页 |
| ·MIR-21和TGFBI调控肌肉增殖、分化的通路分析 | 第75-77页 |
| 第四章 讨论 | 第77-82页 |
| ·利用深度测序发现新的MICRORNAs | 第77-78页 |
| ·关于猪胚胎期肌肉发育的几个时间节点 | 第78页 |
| ·关于MIR-21的研究 | 第78-79页 |
| ·关于细胞增殖的检测 | 第79-80页 |
| ·关于细胞凋亡的检测 | 第80页 |
| ·关于MIR-21与其靶标的互作 | 第80-81页 |
| ·关于MIR-21参与的调控通路 | 第81-82页 |
| 第五章 结论 | 第82-84页 |
| ·本研究的主要结果与结论 | 第82页 |
| ·创新点 | 第82页 |
| ·不足之处 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 附录 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 个人简历 | 第98-99页 |
