| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10页 |
| 1 实验背景介绍 | 第10-19页 |
| ·辽宁新品系绒山羊的概述 | 第10页 |
| ·角蛋白家族基因及其研究现状 | 第10-12页 |
| ·角蛋白 | 第10-11页 |
| ·角蛋白家族 | 第11页 |
| ·角蛋白家族基因的研究现状 | 第11-12页 |
| ·BMP 及其介导的信号通路 | 第12-15页 |
| ·BMP | 第12-13页 |
| ·BMP 信号通路 | 第13-14页 |
| ·BMP 信号通路的研究现状 | 第14-15页 |
| ·RNA 干扰技术 | 第15-18页 |
| ·RNA 干扰原理及发现 | 第15-16页 |
| ·RNA 干扰技术的应用 | 第16-18页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 角蛋白家族基因在辽宁新品系绒山羊毛囊生长不同时期的表达研究 | 第19-30页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·样本采集 | 第19页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-23页 |
| ·初、次级毛囊的分离 | 第20页 |
| ·初、次级毛囊总 RNA 提取 | 第20-21页 |
| ·反转录 PCR 反应 | 第21-22页 |
| ·实时荧光定量 PCR 反应 | 第22-23页 |
| ·实验结果 | 第23-27页 |
| ·毛囊兴盛期总 RNA 提取 | 第23-24页 |
| ·毛囊退行期总 RNA 提取 | 第24页 |
| ·毛囊休止期总 RNA 提取 | 第24-25页 |
| ·实时荧光定量 PCR 实验结果 | 第25-27页 |
| ·讨论 | 第27-30页 |
| ·RNA 提取 | 第27-28页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术 | 第28-30页 |
| 3 利用半定量 RT-PCR 技术研究角蛋白家族基因在不同组织中的表达情况 | 第30-39页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·样本采集 | 第30页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·辽宁新品系绒山羊毛囊生长期皮肤组织的获取 | 第31页 |
| ·辽宁新品系绒山羊毛囊生长期皮肤细胞的原代培养 | 第31-32页 |
| ·皮肤细胞传代培养 | 第32页 |
| ·毛囊退行期皮肤、耳组织以及毛囊生长期皮肤细胞总 RNA 的提取 | 第32页 |
| ·反转录 PCR 反应 | 第32-33页 |
| ·半定量 RT-PCR 反应 | 第33页 |
| ·实验结果 | 第33-36页 |
| ·辽宁新品系绒山羊毛囊生长期皮肤细胞 | 第33页 |
| ·RNA 提取 | 第33-34页 |
| ·RT-PCR 实验结果 | 第34-36页 |
| ·讨论 | 第36-39页 |
| ·实验结果讨论 | 第36-37页 |
| ·辽宁新品系绒山羊生长期皮肤细胞原代培养 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR 实验 | 第38-39页 |
| 4 Noggin 基因慢病毒干扰载体的构建及干扰 Noggin 基因表达后相关角蛋白家族基因表达研究 | 第39-74页 |
| ·实验材料 | 第39-41页 |
| ·实验所用细胞，质粒及菌株 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39-40页 |
| ·主要实验仪器 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-55页 |
| ·慢病毒感染辽宁新品系绒山羊原代皮肤细胞的最佳 MOI 值摸索 | 第41页 |
| ·Noggin 基因干扰序列的设计 | 第41-42页 |
| ·RNA 干扰载体的构建 | 第42-45页 |
| ·Noggin 基因慢病毒干扰载体的构建 | 第45-51页 |
| ·Noggin 基因干扰慢病毒包装 | 第51-52页 |
| ·Noggin 基因干扰慢病毒感染靶细胞羊皮肤细胞后的 qPCR 干扰评价 | 第52-54页 |
| ·Noggin 基因干扰慢病毒感染羊皮肤细胞后相关角蛋白家族基因的 qPCR 检测 | 第54-55页 |
| ·实验结果 | 第55-72页 |
| ·慢病毒感染辽宁新品系绒山羊皮肤细胞的最佳 MOI 值 | 第55-57页 |
| ·Noggin 基因慢病毒干扰载体的构建 | 第57-60页 |
| ·Noggin 基因干扰慢病毒包装 | 第60-61页 |
| ·Noggin 基因干扰慢病毒的 qPCR 干扰筛选结果 | 第61-65页 |
| ·Lenti-EGFP-Noggin-3-miR 感染羊皮肤细胞后相关角蛋白家族基因 qPCR 检测结果 | 第65-72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| ·慢病毒载体的研究进展 | 第72-73页 |
| ·Noggin 基因敲减后相关角蛋白家族基因的表达研究 | 第73-74页 |
| 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 附录 A 角蛋白家族基因在毛囊不同时期荧光定量 PCR 的曲线图 | 第81-91页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
